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鎖陽多糖提取純化、結(jié)構(gòu)解析及生物活性研究

發(fā)布時間:2021-05-13 18:58
  鎖陽(Cynomorium songaricum Rupr.)俗稱不老藥,也稱沙漠人參,是一種根寄生肉質(zhì)草本植物,生長于沙漠地帶。鮮鎖陽既可食用,又可飼喂家畜,其干燥肉質(zhì)莖用作傳統(tǒng)中蒙藥材,F(xiàn)代藥理研究表明鎖陽提取物具有多種生物活性,醇提物中主要含有黃酮、萜類等成分,而水提物中主要成分多糖的研究相對較少。多糖是植物次生代謝產(chǎn)物的重要組成部分,與生物體的生理功能密切相關(guān),也是中醫(yī)藥發(fā)揮獨特療效的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。本文采用物理、化學(xué)和光譜方法分析比較了五種提取方法,進而采用掃描電鏡(SEM)、原子力顯微鏡(AFM)和單糖組成分析技術(shù)手段對新方法酶輔助提取鎖陽多糖和傳統(tǒng)水提醇沉鎖陽多糖的形貌和單糖組成進行比較研究,同時采用體外清除自由基和總還原能力試驗對兩種鎖陽多糖的體外抗氧化能力進行評價。其次,針對酶輔助提取鎖陽多糖的提取工藝采用響應(yīng)面法優(yōu)化了提取工藝參數(shù),采用DEAE-52、Sephedex G-200柱層析分離純化得到兩種鎖陽多糖純化組分,采用高效凝膠滲透色譜(HPGPC)、單糖組成分析、甲基化分析、紫外光譜、紅外光譜、氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)和核磁共振(NMR)等手段對其化學(xué)結(jié)構(gòu)進行了... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:142 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 多糖研究進展
        1.1.1 多糖概述
        1.1.2 多糖的提取
        1.1.3 多糖的分離純化
        1.1.4 多糖的結(jié)構(gòu)解析
        1.1.5 多糖的生物活性
        1.1.6 多糖藥物的研究與開發(fā)
    1.2 鎖陽多糖研究進展
        1.2.1 鎖陽簡介
        1.2.2 鎖陽的化學(xué)組成及生物活性研究進展
        1.2.3 鎖陽多糖研究進展
    1.3 研究目的和意義
第二章 不同方法提取的鎖陽多糖理化性質(zhì)
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料與試劑
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 實驗方法
            2.1.3.1 五種方法提取制備鎖陽多糖
            2.1.3.2 化學(xué)組成測定
            2.1.3.3 紫外光譜分析
            2.1.3.4 紅外光譜分析
            2.1.3.5 掃描電鏡制樣及觀測
            2.1.3.6 原子力顯微鏡制樣及觀測
            2.1.3.7 單糖組成分析
            2.1.3.8 數(shù)據(jù)處理
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 鎖陽多糖的化學(xué)組成分析
        2.2.2 鎖陽多糖的紫外光譜分析
        2.2.3 鎖陽多糖的紅外光譜分析
        2.2.4 鎖陽多糖的掃描電鏡分析
        2.2.5 鎖陽多糖的原子力顯微鏡分析
        2.2.6 鎖陽多糖的單糖組成分析
    2.3 本章小結(jié)
第三章 酶輔助提取鎖陽多糖的工藝研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料與試劑
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 實驗方法
            3.1.3.1 酶輔助提取鎖陽多糖的制備工藝
            3.1.3.2 單因素實驗
            3.1.3.3 篩選主要影響因素實驗
            3.1.3.4 響應(yīng)面法(RSM)優(yōu)化提取條件
            3.1.3.5 統(tǒng)計分析
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 單因素實驗各因素對鎖陽多糖得率的影響
        3.2.2 影響鎖陽多糖得率主要因素的篩選
        3.2.3 響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝
    3.3 本章小結(jié)
第四章 鎖陽多糖的分離純化及結(jié)構(gòu)解析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料與試劑
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 實驗方法
            4.1.3.1 酶輔助提取鎖陽多糖CSP-PAE的分離與純化
            4.1.3.2 鎖陽多糖各組分的化學(xué)成分分析
            4.1.3.3 純度鑒定與分子量測定
            4.1.3.4 紫外光譜分析
            4.1.3.5 紅外光譜分析
            4.1.3.6 單糖組成分析
            4.1.3.7 甲基化分析
            4.1.3.8 核磁共振波譜分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 分離與純化
        4.2.2 鎖陽多糖各組分的化學(xué)成分分析
        4.2.3 CSP1和CSP2的純度鑒定及分子量測定
        4.2.4 CSP1和CSP2的紫外光譜分析
        4.2.5 CSP1和CSP2的紅外光譜分析
        4.2.6 CSP1和CSP2的單糖組成分析
        4.2.7 CSP1和CSP2的甲基化分析
        4.2.8 CSP1和CSP2的核磁共振波譜分析
    4.3 討論
    4.4 本章小結(jié)
第五章 鎖陽多糖的體外抗氧化活性研究
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料與試劑
        5.1.2 主要儀器
        5.1.3 實驗方法
            5.1.3.1 清除DPPH自由基能力的測定
            5.1.3.2 清除ABTS自由基能力的測定
            5.1.3.3 清除羥基自由基能力的測定
            5.1.3.4 清除超氧陰離子自由基能力的測定
            5.1.3.5 鐵還原/抗氧化能力的測定
    5.2 結(jié)果與討論
        5.2.1 鎖陽多糖對DPPH自由基的清除能力
        5.2.2 鎖陽多糖對ABTS自由基的清除能力
        5.2.3 鎖陽多糖對羥基自由基的清除能力
        5.2.4 鎖陽多糖對超氧陰離子自由基的清除能力
        5.2.5 鎖陽多糖的鐵還原/抗氧化能力
    5.3 本章小結(jié)
第六章 鎖陽多糖的體外免疫活性研究
    6.1 材料與方法
        6.1.1 材料與試劑
        6.1.2 主要儀器
        6.1.3 實驗方法
            6.1.3.1 小鼠脾淋巴細胞懸液的制備
            6.1.3.2 CCK8法檢測鎖陽多糖對淋巴細胞的毒性
            6.1.3.3 CCK8法檢測鎖陽多糖對淋巴細胞增殖的影響
            6.1.3.4 ELISA法檢測鎖陽多糖對淋巴細胞分泌細胞因子的影響
            6.1.3.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計
    6.2 結(jié)果與分析
        6.2.1 鎖陽多糖對淋巴細胞毒性的評價
        6.2.2 鎖陽多糖對淋巴細胞增殖的影響
        6.2.3 鎖陽多糖對淋巴細胞分泌細胞因子的影響
    6.3 討論
        6.3.1 免疫活性
        6.3.2 構(gòu)效關(guān)系
    6.4 本章小結(jié)
第七章 結(jié)論與展望
    7.1 主要結(jié)論
    7.2 創(chuàng)新點
    7.3 展望
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
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[5]玉郎傘多糖抗衰老作用及機制研究[D]. 段文明(DOAN VAN MINH).廣西醫(yī)科大學(xué) 2014
[6]河蜆多糖結(jié)構(gòu)特征、生物活性及其對人體腸道菌群的影響[D]. 廖寧波.浙江大學(xué) 2014
[7]當歸多糖調(diào)控造血干細胞衰老的機制研究[D]. 張先平.重慶醫(yī)科大學(xué) 2013
[8]五味子多糖的分離、結(jié)構(gòu)鑒定及免疫活性研究[D]. 汪艷群.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[9]樺褐孔菌多糖純化、結(jié)構(gòu)及其抗腫瘤機制研究[D]. 陳義勇.江南大學(xué) 2010
[10]鎖陽多糖延緩衰老的作用及端粒酶調(diào)控機制研究[D]. 馬麗杰.內(nèi)蒙古大學(xué) 2009

碩士論文
[1]脫落酸和茉莉酸甲酯對鎖陽莖切口愈合及褐變的調(diào)控[D]. 段園園.內(nèi)蒙古大學(xué) 2013
[2]鎖陽中原花青素的提取、鑒別及抗氧化性研究[D]. 高乃群.江南大學(xué) 2011
[3]堿提滸苔多糖降血糖、降血脂生物活性研究[D]. 孫士紅.東北師范大學(xué) 2007



本文編號:3184540

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