惡性腫瘤,對人們的生理與心理都會造成極大創(chuàng)傷,每年有大量的患者死于癌癥,且患癌人數(shù)逐年增加。因此尋找新型化療藥物與探索新的癌癥治療方法成為了國內(nèi)外科研工作者關(guān)注的焦點(diǎn)。異甘草素,甘草中提取的天然化合物,被證實(shí)具有廣泛的藥理活性,但是其體外抗腫瘤活性及其機(jī)制仍需進(jìn)一步探究。呫噸類化合物作為一種潛在的光敏劑,將在抗腫瘤方面發(fā)揮重要作用。因此本論文首先是在分子水平上研究呫噸化合物與CT-DNA、BSA的結(jié)合能力,然后在細(xì)胞水平上對所合成的新型呫噸化合物進(jìn)行抗腫瘤機(jī)制的研究。本文共分為五章,主要內(nèi)容如下:1.綜述了異甘草素與呫噸類化合物的研究現(xiàn)狀,介紹了體外抗腫瘤的研究進(jìn)展,簡述本文的研究對象、意義以及主要內(nèi)容。2.以異甘草素為研究對象,采用MTT法對其體外細(xì)胞毒性進(jìn)行初步探究,然后通過凋亡、侵襲、自噬三個方面闡述異甘草素抗腫瘤機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在一定濃度范圍內(nèi),異甘草素可以有效誘導(dǎo)PC-12細(xì)胞發(fā)生凋亡,并且減弱其侵襲能力,研究還發(fā)現(xiàn),異甘草素作用于PC-12細(xì)胞后使細(xì)胞發(fā)生自噬現(xiàn)象,并且通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證自噬與凋亡成協(xié)同作用。3.以聯(lián)萘酚為原料合成了兩個互為同分異構(gòu)體的新型二苯并呫噸化合物,首... 

【文章來源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 異甘草素藥理作用研究進(jìn)展
        1.2.1 抗氧化作用
        1.2.2 抗炎作用
        1.2.3 鎮(zhèn)靜催眠作用
        1.2.4 保護(hù)肝臟作用
        1.2.5 雌激素樣作用
        1.2.6 抗腫瘤作用
    1.3 呫噸類化合物藥理作用研究進(jìn)展
        1.3.1 抑菌作用
        1.3.2 抗炎作用
        1.3.3 鎮(zhèn)痛作用
        1.3.4 抗病毒作用
        1.3.5 抗腫瘤作用
    1.4 藥物抗腫瘤活性研究
        1.4.1 細(xì)胞凋亡概念
        1.4.2 細(xì)胞凋亡特征
        1.4.3 細(xì)胞凋亡主要信號通路
    1.5 研究目的及意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 異甘草素體外抗腫瘤活性研究
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 主要儀器
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要溶液配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        2.3.3 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 AO/EB雙染實(shí)驗(yàn)
        2.3.6 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
        2.3.7 單細(xì)胞凝膠電泳
        2.3.8 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期
        2.3.9 細(xì)胞活性氧水平檢測
        2.3.10 細(xì)胞線粒體膜電位的檢測
        2.3.11 蛋白質(zhì)印跡法 (Western Blot)
        2.3.12 細(xì)胞自噬檢測
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 MTT檢測體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        2.4.2 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.4.3 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        2.4.4 AO/EB檢測細(xì)胞凋亡
        2.4.5 流式檢測細(xì)胞凋亡
        2.4.6 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
        2.4.7 流式測細(xì)胞周期
        2.4.8 細(xì)胞內(nèi)活性氧水平檢測
        2.4.9 細(xì)胞線粒體膜電位檢測
        2.4.10 Western Blot實(shí)驗(yàn)
        2.4.11 細(xì)胞自噬
    2.5 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 酰胺二苯并呫噸化合物體外抗腫瘤活性研究
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 化合物的合成與表征
        3.3.1 化合物合成路線圖
        3.3.2 化合物2的合成與表征
        3.3.3 化合物 3、4 的合成與表征
        3.3.4 化合物單晶結(jié)構(gòu)的確定與細(xì)化
    3.4 化合物與DNA、蛋白質(zhì)結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        3.4.1 緩沖溶液的配制
        3.4.2 CT-DNA濃度的確定
        3.4.3 化合物與DNA結(jié)合研究
        3.4.4 化合物與蛋白質(zhì)結(jié)合研究
        3.4.5 DNA裂解研究
    3.5 化合物體外抗腫瘤活性研究
        3.5.1 細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)
    3.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.6.1 紫外吸收光譜滴定實(shí)驗(yàn)
        3.6.2 粘度測定實(shí)驗(yàn)
        3.6.3 熒光光譜測量實(shí)驗(yàn)
        3.6.4 化合物與蛋白質(zhì)結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        3.6.5 DNA裂解實(shí)驗(yàn)
        3.6.6 體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        3.6.7 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
        3.6.8 AO/EB雙熒光染色法
        3.6.9 細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)
        3.6.10 細(xì)胞內(nèi)活性氧水平檢測
        3.6.11 細(xì)胞線粒體膜電位檢測
        3.6.12 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    3.7 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 二苯并呫噸化合物的光動力治療研究
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
    4.3 化合物的合成與表征
        4.3.1 化合物合成路線
        4.3.2 化合物 5、6 的合成與表征
        4.3.3 化合物 5、6 單晶結(jié)構(gòu)的測定
    4.4 化合物抗腫瘤活性研究
        4.4.1 體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        4.4.2 DPBF檢測單線態(tài)氧的產(chǎn)生
    4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.5.1 電子吸收光譜測定實(shí)驗(yàn)
        4.5.2 粘度測定實(shí)驗(yàn)
        4.5.3 熒光光譜測定實(shí)驗(yàn)
        4.5.4 化合物與蛋白質(zhì)結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        4.5.5 體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        4.5.6 DPBF檢測單線態(tài)氧
        4.5.7 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
        4.5.8 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期
        4.5.9 細(xì)胞凋亡檢測
        4.5.10 細(xì)胞內(nèi)活性氧水平檢測
        4.5.11 線粒體膜電位檢測
        4.5.12 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    4.6 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第五章 13c取代的二苯并呫噸類化合物體外抗腫瘤活性研究
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
    5.3 化合物的合成與表征
        5.3.1 化合物合成路線圖
        5.3.2 化合物7的合成與表征
        5.3.3 化合物8的合成與表征
        5.3.4 化合物9的合成與表征
        5.3.5 化合物10的合成與表征
    5.4 體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        5.4.1 Hoechst 33258 染色實(shí)驗(yàn)
    5.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        5.5.1 體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        5.5.2 細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)
        5.5.3 AO/EB雙染實(shí)驗(yàn)
        5.5.4 Hoechst 33258 染色實(shí)驗(yàn)
        5.5.5 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
        5.5.6 細(xì)胞內(nèi)活性氧水平檢測實(shí)驗(yàn)
        5.5.7 細(xì)胞線粒體膜電位變化檢測實(shí)驗(yàn)
        5.5.8 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    5.6 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
總結(jié)與展望
縮略語
攻讀碩士期間已發(fā)表論文
致謝



本文編號：3178635