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田螺硫酸多糖的制備、表征及穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊作用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-23 10:52
  動(dòng)脈粥樣硬化(AS)易損斑塊作為所有心腦血管疾病的共同病理基礎(chǔ),為冠心病、腦梗死及外周血管病的主要誘因,其進(jìn)一步累及心臟而引起的冠狀A(yù)S性心臟病排名全球死亡原因中的首位。針對(duì)易損斑塊形成及破裂機(jī)制,研發(fā)有效治療藥物及方法,促使斑塊向穩(wěn)定方向轉(zhuǎn)變,不僅是預(yù)防AS及繼發(fā)疾病的重要方法,而且是國(guó)內(nèi)外心血管學(xué)界面臨的重點(diǎn)課題!敖抵、扶正化瘀”為中醫(yī)目前治療AS斑塊的主要治則之一。硫酸多糖在免疫調(diào)節(jié)和抗凝血方面具有的顯著作用,滿足了 AS斑塊“降脂化痰、扶正化瘀”治療的功效和理論需求。其已在AS斑塊防治方面顯示出巨大潛能。水產(chǎn)動(dòng)物所處的特殊環(huán)境造就了其多糖高硫酸基含量的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),其為目前天然硫酸多糖獲取的主要來(lái)源之一。田螺為圓田螺屬一種貝類軟體動(dòng)物。田螺肉自古就是我國(guó)城鄉(xiāng)居民十分喜歡的一種美味佳肴,同時(shí)還是歷代醫(yī)家的一味除疾良藥。作為一種習(xí)見的藥食同源水產(chǎn)動(dòng)物,其生長(zhǎng)環(huán)境滿足了其體內(nèi)硫酸多糖合成的天然條件。因此,基于該資源,制備開發(fā)硫酸多糖,并深入研究該硫酸多糖對(duì)AS斑塊的作用及機(jī)制,是一個(gè)非常有理論價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義的課題。目的:本課題旨在通過(guò)對(duì)田螺硫酸多糖(Sulfated polysac... 

【文章來(lái)源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:146 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)研究
    第一節(jié) 水產(chǎn)動(dòng)物多糖的研究進(jìn)展
        一、水產(chǎn)動(dòng)物多糖的提取
        二、水產(chǎn)動(dòng)物多糖的分離純化
        三、水產(chǎn)動(dòng)物多糖的結(jié)構(gòu)表征
        四、水產(chǎn)動(dòng)物多糖的藥理活性
        五、小結(jié)
    第二節(jié) 田螺多糖的研究進(jìn)展
    第三節(jié) AS斑塊內(nèi)血管新生與斑塊穩(wěn)定性的研究進(jìn)展
    第四節(jié) PI3K/Akt/mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路血管新生調(diào)控中的研究進(jìn)展
    第五節(jié) 硫酸多糖抗AS的研究進(jìn)展
        一、硫酸多糖抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷
        二、硫酸多糖調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移
        三、硫酸多糖減少炎性細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板等粘附和聚集到血管內(nèi)膜
        四、小結(jié)
第二章 CCPSs制備方法的構(gòu)建
    第一節(jié) CCPSs粗多糖超聲同步耦合酶解提取法的構(gòu)建
        一、實(shí)驗(yàn)材料、試劑及主要儀器
        二、實(shí)驗(yàn)方法
        三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        四、小結(jié)與討論
    第二節(jié) CCPSs粗多糖中蛋白雜質(zhì)循環(huán)凍融脫除法的構(gòu)建
        一、實(shí)驗(yàn)材料、主要儀器及試劑
        二、實(shí)驗(yàn)方法
        三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        四、小結(jié)與討論
    第三節(jié) CCPSs粗多糖離子交換與分子篩凝膠柱色譜聯(lián)合分級(jí)純化法的構(gòu)建
        一、實(shí)驗(yàn)試劑及主要儀器
        二、實(shí)驗(yàn)方法
        三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        四、小結(jié)與討論
    第四節(jié) 本章小結(jié)
第三章 CCPSs理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)鑒定研究
    一、實(shí)驗(yàn)主要儀器及試劑
        (一) 主要儀器
        (二) 實(shí)驗(yàn)試劑
    二、實(shí)驗(yàn)方法
        (一) CCPSs的制備
        (二) CCPSs的脫硫
        (三) CCPSs外觀性狀觀察和溶解度的測(cè)定
        (四) CCPSs總糖含量的測(cè)定
        (五) CCPSs蛋白質(zhì)含量的測(cè)定[14]
        (六) CCPSs中硫酸基含量的測(cè)定
        (七) CCPSs糖醛酸含量的測(cè)定
        (八) CCPSs的UV-vis光譜分析
        (九) CCPSs及其甲基化樣品的IR光譜分析
        (十) CCPSs單糖組成的測(cè)定
        (十一) CCPSs分子量測(cè)定及均質(zhì)性的評(píng)價(jià)
        (十二) 高碘酸氧化和Smith降解分析
        (十三) 甲基化分析
        (十四) 核磁共振波譜分析
    三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        (一) CCPSs性狀觀察和溶解度測(cè)定結(jié)果與分析
        (二) 總糖、硫酸基、蛋白質(zhì)和糖醛酸含量測(cè)定結(jié)果與分析
        (三) CCPSs的UV-vis和IR光譜分析結(jié)果與分析
        (四) CCPSs的單糖組成測(cè)定結(jié)果與分析
        (五) CCPSs的分子量測(cè)定及均質(zhì)性評(píng)價(jià)結(jié)果與分析
        (六) CCPSs和dsCCPSs的高碘酸氧化和Smith降解結(jié)果與分析
        (七) CCPSs和dsCCPSs的甲基化結(jié)果與分析
        (八) CCPSs的NMR波譜結(jié)果與分析
    四、本章小結(jié)與討論
第四章 CCPSs穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的作用研究
    一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、材料、主要試劑及儀器
        (一) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        (二) 實(shí)驗(yàn)原料
        (三) 主要試劑
        (四) 主要儀器
    二、實(shí)驗(yàn)方法
        (一) 給藥劑量的選擇
        (二) 動(dòng)物飼養(yǎng)及倫理
        (三) 動(dòng)物模型復(fù)制及給藥方案
        (四) 病理取材
        (五) 藥效評(píng)價(jià)
        (六) 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與處理
    三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        (一) 分組給藥前的模型確認(rèn)
        (二) 藥物干預(yù)過(guò)程中各組小鼠體重的變化情況
        (三) CCPSs對(duì)AS小鼠血脂水平及AI的影響
        (四) CCPSs對(duì)小鼠主動(dòng)脈和斑塊形態(tài)及斑塊與管腔面積比例的影響
        (五) CCPSs對(duì)小鼠主動(dòng)脈斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量的影響
        (六) CCPSs對(duì)小鼠主動(dòng)脈斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞含量的影響
        (七) CCPSs對(duì)小鼠主動(dòng)脈斑塊內(nèi)膠原含量的影響
        (八) CCPSs對(duì)小鼠主動(dòng)脈斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞含量的影響
        (九) CCPSs對(duì)小鼠主動(dòng)脈斑塊內(nèi)VI值的影響
    四、小結(jié)與討論
第五章 CCPSs穩(wěn)定AS斑塊的作用機(jī)制研究
    一、實(shí)驗(yàn)材料、主要儀器及試劑
        (一) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        (二) 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        (三) 實(shí)驗(yàn)材料
        (四) 主要儀器
        (五) 主要試劑
    二、實(shí)驗(yàn)方法
        (一) 體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        (二) 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        (三) 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        (一) CCPSs對(duì)斑塊內(nèi)血管新生的影響
        (二) CCPSs對(duì)斑塊內(nèi)PI3K/Akt/mTOR通路信號(hào)分子的mRNA和蛋白表達(dá)影響
        (三) CCPSs對(duì)斑塊內(nèi)VEGF和MMP-9信號(hào)分子的mRNA和蛋白表達(dá)影響
        (四) CCPSs對(duì)HUVECs的細(xì)胞毒性
        (五) CCPSs對(duì)HUVECs通路信號(hào)分子的mRNA和蛋白表達(dá)影響
        (六) CCPSs對(duì)HUVECs的Matrigel膠管腔形成情況的影響
    四、小結(jié)與討論
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
統(tǒng)計(jì)學(xué)審核證明


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蝦夷扇貝多糖提取及純化方法的優(yōu)化[J]. 劉瑀,方志強(qiáng),劉宇馨,婁亞迪.  食品科學(xué). 2017(18)
[2]擬目烏賊肌肉多糖酶法脫蛋白工藝優(yōu)化及體外清除自由基能力[J]. 孫玉林,戴宏杰,文菁,張衛(wèi),趙娟,田麗,陳道海.  食品科學(xué). 2017(18)
[3]響應(yīng)面優(yōu)化酶解法提取縊蟶多糖的工藝研究[J]. 呂鳳嬌.  泉州師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2016(06)
[4]超聲波輔助提取泥鰍多糖的工藝優(yōu)化[J]. 黨曉妍,王茵,蘇永昌,劉淑集,吳成業(yè),陳麗嬌.  漁業(yè)研究. 2016(05)
[5]紫貽貝多糖酶法制備工藝研究[J]. 韓瑩,曲有樂.  浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(05)
[6]海灣扇貝多糖的純化、分離及抗腫瘤活性研究[J]. 李雪梅,李麗梅,陳輝,冀鵬,王頡.  中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2016(07)
[7]海參精多糖提取工藝優(yōu)化及其體外抗腫瘤活性[J]. 王婷,劉京熙,張健,劉昕,趙云蘋,井月欣,王共明,王茂劍.  食品工業(yè)科技. 2016(17)
[8]超濾膜分離牡蠣多糖工藝研究[J]. 鄭亞旭,石璇,李欣遙,佟長(zhǎng)青,李偉.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(19)
[9]響應(yīng)面法優(yōu)化近江牡蠣多糖提取工藝[J]. 牛改改,游剛,張晨曉,余振寧.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2016(06)
[10]響應(yīng)面優(yōu)化酶法提取泥鰍多糖工藝的研究[J]. 黨曉妍,王茵,蘇永昌,劉淑集,吳成業(yè),陳麗嬌.  福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2016(07)

博士論文
[1]舒脈膠囊干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)血管新生的作用及機(jī)理研究[D]. 喬云.山東大學(xué) 2014
[2]兩種海參多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及其生物活性研究[D]. 董曉弟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]不同海洋生境來(lái)源微生物胞外多糖的結(jié)構(gòu)及抗氧化活性研究[D]. 陳艷麗.中國(guó)海洋大學(xué) 2013
[4]超聲對(duì)麥冬多糖結(jié)構(gòu)、溶液行為及生物活性影響的研究[D]. 王小梅.陜西師范大學(xué) 2013
[5]青蛤多糖分離鑒定、硫酸酯化及其生物活性研究[D]. 蔣長(zhǎng)興.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]通脈地仙丸對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)血管新生及其穩(wěn)定性影響的研究[D]. 趙珊珊.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2010
[7]“以脾論治,內(nèi)清外柔”法對(duì)高血脂致動(dòng)脈粥樣硬化家兔脂質(zhì)代謝及血管內(nèi)皮功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 李曦明.遼寧中醫(yī)學(xué)院 2005
[8]泥鰍多糖的免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤作用機(jī)理[D]. 張晨曉.華中科技大學(xué) 2005

碩士論文
[1]牡蠣糖原和多肽的制備及重金屬的脫除[D]. 謝昕蟄.江南大學(xué) 2016
[2]冬青素A經(jīng)PI3K/AKT/mTOR通路抑制血管新生抗肝癌增殖[D]. 王娟.揚(yáng)州大學(xué) 2016
[3]馬氏珠母貝多糖的結(jié)構(gòu)分析及體外抗氧化活性的研究[D]. 郭妍妍.廣東海洋大學(xué) 2015
[4]近江牡蠣糖原提取、純化及化學(xué)結(jié)構(gòu)研究[D]. 張聯(lián)怡.廣東海洋大學(xué) 2013
[5]血管毀損術(shù)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)新生血管及斑塊穩(wěn)定性影響的研究[D]. 高雪.第四軍醫(yī)大學(xué) 2012
[6]PEF結(jié)合酶法提取鮑魚臟器粗多糖及其抑菌、免疫活性研究[D]. 盧曉燕.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[7]鮑魚臟器粗多糖的提取工藝及降血脂活性研究[D]. 余鑫.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[8]泥螺糖胺聚糖的提取、純化與功能活性研究[D]. 許江鷺.天津科技大學(xué) 2012
[9]鮑魚內(nèi)臟多糖的結(jié)構(gòu)和活性研究[D]. 劉春燕.東北師范大學(xué) 2011
[10]福壽螺多糖的提取及抗乙肝病毒實(shí)驗(yàn)研究[D]. 趙東賢.安徽理工大學(xué) 2010



本文編號(hào):3155193

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