發(fā)布時間：2021-04-19 07:14

　　[目的]探討淫羊藿苷、槲皮素對高糖培養(yǎng)海馬神經(jīng)元凋亡的影響及其作用機制。[方法]取新生24hSD大鼠海馬,消化法分離海馬神經(jīng)元,密度梯度離心法和差速貼壁法進行純化,神經(jīng)元特異性烯醇化酶蛋白免疫熒光法進行鑒定。選擇25mmol/L濃度葡萄糖為正常對照組,根據(jù)課題組既往實驗結果,選取72h和50mmol/L濃度葡萄糖為高糖模型組。在50mmol/L Glu的高糖培養(yǎng)基中,分別加入不同濃度梯度的淫羊藿苷、槲皮素、Akt抑制劑MK-2206 2HCI和激動劑SC79。培養(yǎng)72h,CCK-8探索各藥物最佳作用濃度及其對高糖條件下海馬神經(jīng)元相對活性的影響。流式細胞儀檢測正常對照組、高糖模型組、淫羊藿苷組、槲皮素組、淫羊藿苷+Akt抑制劑組、槲皮素+Akt抑制劑組、Akt激動劑組神經(jīng)元的凋亡。Western Blotting檢測各組神經(jīng)元p-Akt、Akt、Bcl-2和Bax蛋白表達。[結果]1.成功培養(yǎng)海馬神經(jīng)元,經(jīng)鑒定純度96.5±1.2%。2.CCK-8探索各藥物最佳作用濃度及其對高糖條件下海馬神經(jīng)元相對活性的影響:與正常對照組相比,高糖組細胞相對活性降低（P<0.05）;與高糖組比較,... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?ＤＡＰＩ染色??注：２４ｈ新生ＳＤ大鼠海馬神經(jīng)元在２５ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ濃度的Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ＋Ｂ２７完全培養(yǎng)基中體外培??養(yǎng)７２ｈ后，所有細胞的胞核均被ＤＡＰＩ染成藍色（Ｘ?２００）

圖２．?ＮＳＥ染色??注：２４ｈ新生ＳＤ大鼠海馬神經(jīng)元在２５ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ濃度的Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ＋Ｂ２７完全培養(yǎng)基中體外培??養(yǎng)７２ｈ后，神經(jīng)元胞漿和突起被染成綠色（Ｘ２００）。??二、Ｃｅｌｌ?Ｃｏｕｎｔｉｎｇ?Ｋｉｔ－８（ＣＣＫ－８＞探索不同濃度淫羊藿苷對海馬神經(jīng)元相對活性的影??響??１．ＣＣＫ－８探索不同濃度淫羊藿苷對海馬神經(jīng)元相對活性的影響，各組神經(jīng)元相對活??性見表１及圖３。??２．與正常對照組相比，高糖組細胞相對活性降低（ＰＣ０．０１）；與高糖組比較，淫羊??蕾苷０．００１叫ｉｏｌ／Ｌ組細胞相對活性提高（ＰＣ０．０５）。??

?北京協(xié)和醫(yī)學院中國醫(yī)學科學院?碩士研究生學位論文???表１各組神經(jīng)元細胞相對活性（＾±ｓ，ｎ＝３）??組別?細胞相對活性??正常對照組?１００?＋?０．００％??高糖組?８１．１９±１０．５６％＊＊??淫羊藿苷?〇．〇ｌＭｍ〇ｌ／Ｌ?組?８６．６８±．５５％??淫羊藿苷?０．００１?坪ｎ〇ｌ／Ｌ?組?９２．０１±８．８１％＊??淫羊藿苷?０．０００１?叫ｉ〇ｌ／Ｌ?組?８６．６１±８．１８％???注：與正常對照組比較，＊＊：?Ｐ＜０．０１；與高糖組比較，★：?Ｐ＜０．０５。??

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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[2]槲皮素通過TLR4/NF-κB信號調節(jié)哮喘氣道炎癥機制研究[D]. 李鴻佳.山東大學 2015
[3]槲皮素及其糖苷衍生物蘆丁對心肌纖維化的抑制作用及機制研究[D]. 李敏.吉林大學 2014

碩士論文
[1]紅景天苷、葛根素對高糖培養(yǎng)SD大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響及其機制研究[D]. 徐小涵.北京協(xié)和醫(yī)學院 2014
[2]淫羊藿苷對前列腺癌LNCaP細胞的作用及其AR相關分子機制[D]. 張津.北京中醫(yī)藥大學 2013
[3]筋脈通對高糖培養(yǎng)SD大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響[D]. 郭蕾蕾.北京協(xié)和醫(yī)學院 2012



本文編號：3147092