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藤黃酸增加胰腺癌細(xì)胞化療敏感性和促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞自噬的機(jī)制研究

發(fā)布時間:2021-03-31 20:41
  目的:1.明確藤黃酸殺傷胰腺癌細(xì)胞的作用。2.探討藤黃酸能否促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的化療敏感性,并研究其作用機(jī)制。3.探討藤黃酸能否促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞發(fā)生自噬,并且明確其誘導(dǎo)的自噬在胰腺癌中的性質(zhì)。方法:1.通過MTT、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)證明藤黃酸抑制胰腺癌細(xì)胞的生長。2.聯(lián)合藤黃酸和吉西他濱對胰腺癌細(xì)胞進(jìn)行處理;通過MTT和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)分析藤黃酸能否促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞對吉西他濱的化療敏感性;使用q-PCR和Western-Blot實(shí)驗(yàn)分析藤黃酸對耐藥基因RRM1和RRM2的表達(dá)影響;最后通過構(gòu)建裸鼠皮下移植瘤模型觀察藤黃酸聯(lián)合吉西他濱對胰腺癌的抑制效果。3.通過Western-Blot、吖啶橙染色和透射電鏡觀察藤黃酸能否促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞發(fā)生自噬;通過轉(zhuǎn)染GFP/RFP-LC3-Ⅱ慢病毒載體進(jìn)入胰腺癌細(xì)胞,觀察胰腺癌細(xì)胞內(nèi)自噬流的發(fā)生;通過使用自噬抑制劑氯喹、3-MA或Si-Atg7轉(zhuǎn)染抑制胰腺癌細(xì)胞自噬,觀察自噬對藤黃酸抗胰腺癌細(xì)胞的影響,明確藤黃酸和自噬在胰腺癌中的關(guān)系;最后使用構(gòu)建裸鼠皮下移植瘤模型對體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:1.結(jié)果顯示藤黃酸可以有效抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖,抑制細(xì)胞周期,促進(jìn)細(xì)胞... 

【文章來源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:101 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

藤黃酸增加胰腺癌細(xì)胞化療敏感性和促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞自噬的機(jī)制研究


藤黃酸抑制胰腺癌細(xì)胞生長

藤黃酸,細(xì)胞株,細(xì)胞周期,流式細(xì)胞儀檢測


圖 2 藤黃酸使胰腺癌細(xì)胞發(fā)生 S 期阻滯Figure 2 Gambogic acid (GA) induced pancreatic cancer S-phase cell cycle arrest.分別使用 0.5,1 和 2μM 濃度的藤黃酸處理 4 株胰腺癌細(xì)胞株 24 小時,PI 染色,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期。(A) PANC-1 細(xì)胞株; (B) BxPC-3 細(xì)胞株; (C) MIA PaCa-2 細(xì)胞株; (D)SW1990 細(xì)胞株。

藤黃酸,細(xì)胞株,凋亡


圖 3 藤黃酸促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞發(fā)生凋亡Figure 3 Gambogic acid (GA)-induced apoptosis of pancreatic cancer cells.分別使用 0.5,1 和 2μM 濃度的藤黃酸處理 4 株胰腺癌細(xì)胞株 24 小時,AnnexinV/PI 染色,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。(A) PANC-1 細(xì)胞株; (B) BxPC-3 細(xì)胞株; (C) MIA PaCa-2 細(xì)胞株;(D) SW1990 細(xì)胞株。數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差顯示。***代表 P 值<0.001,**代表 P 值<0.01,n=3。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Autophagy and multidrug resistance in cancer[J]. Ying-Jie Li,Yu-He Lei,Nan Yao,Chen-Ran Wang,Nan Hu,Wen-Cai Ye,Dong-Mei Zhang,Zhe-Sheng Chen.  Chinese Journal of Cancer. 2017(08)
[2]Gambogic acid induces apoptosis and inhibits colorectal tumor growth via mitochondrial pathways[J]. Guang-Ming Huang,Yu Sun,Xin Ge,Xin Wan,Chun-Bo Li.  World Journal of Gastroenterology. 2015(20)



本文編號:3112046

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