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梣桐通過下調(diào)STAT3和HIF-1α抑制程序性細(xì)胞死亡配體-1的表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2021-03-31 15:58
  背景:白鮮是一種廣泛用于治療癌癥的傳統(tǒng)中藥。梣桐是從白鮮的根皮中分離的天然產(chǎn)物,已顯示其具有神經(jīng)保護(hù)和抗炎活性。然而,梣桐抗腫瘤的分子機(jī)制尚不清楚。目的:我們主要研究梣桐對(duì)肺癌細(xì)胞中PD-L1表達(dá)的影響。闡明梣桐抗腫瘤潛在作用機(jī)制。方法:1.使用流式細(xì)胞術(shù)、蛋白免疫印跡和RT-PCR實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)PD-L1蛋白表達(dá)的影響。2.使用分子對(duì)接、熒光素酶報(bào)告基因、免疫熒光、蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)STAT3蛋白表達(dá)的影響。利用蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)STAT3介導(dǎo)的A549細(xì)胞中PD-L1表達(dá)的影響。3.執(zhí)行分子對(duì)接、熒光素酶報(bào)告基因、免疫熒光、蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)HIF-1α蛋白表達(dá)的影響。采用蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)HIF-1α介導(dǎo)的A549細(xì)胞中PD-L1表達(dá)的影響。4.采用蛋白免疫印跡和免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)HIF-1α蛋白合成與降解的影響。執(zhí)行蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)mTOR/p70S6K/4EBP1和MAPK信號(hào)通路的影響。5.通過蛋白免疫印跡、細(xì)胞集落、EdU、流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)細(xì)胞增殖的影響。6.使用蛋白免疫印跡、小管形成、遷移、侵襲實(shí)驗(yàn)測定梣桐對(duì)細(xì)胞血... 

【文章來源】:延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

梣桐通過下調(diào)STAT3和HIF-1α抑制程序性細(xì)胞死亡配體-1的表達(dá)


圖1?PD-1/PD-L1信號(hào)途徑??1.2?STAT3??

信號(hào)通路


延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文?稗桐通過下調(diào)STAT3和HIF-la抑制程序性細(xì)胞死亡配體-1的表達(dá)??活,STAT3就會(huì)經(jīng)歷磷酸化,進(jìn)而誘導(dǎo)同源二聚體的產(chǎn)生,導(dǎo)致核移位,激活包??括PD-L1在內(nèi)的下游靶基因的表達(dá)[&29]。??STAT3的磷酸化是由非受體蛋白酪氨酸激酶JAK、Src所介導(dǎo)['?STAT3??的主要磷酸化位點(diǎn)包括定位在其轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域705位和727位的酪氨酸和絲??氨酸殘基[3U,STAT3在Tyr705和Ser727位點(diǎn)處的磷酸化常常與不良預(yù)后有??密切的關(guān)系。STAT3的激活導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞存活所必需的多種基因產(chǎn)物的表達(dá),包??括存活蛋白,例如:Bcl-xl、Bcl-2、IAP-1/2;增殖蛋白,例如:細(xì)胞周期蛋白D1、??c-Myc;轉(zhuǎn)移蛋白,例如:MMP-9;血管生成蛋白,例如:VEGF?[32]。因此,抑??制STAT3激活的藥物對(duì)于預(yù)防和治療癌癥具有強(qiáng)大的潛力。??,L'6?TNF-a??

血管生成,信號(hào)通路


圖3?HIF-lct信號(hào)通路??1.4血管生成??癌癥生態(tài)系統(tǒng)是由癌細(xì)胞、血管、免疫細(xì)胞和成纖維細(xì)胞基質(zhì)組成的[55]。管為癌細(xì)胞提供營養(yǎng)成分和分解代謝物交換,血管為轉(zhuǎn)移性腫瘤和原發(fā)性腫瘤間的通訊提供條件[56,?57]。血管生成定義為新血管生長的過程,對(duì)癌癥發(fā)生和展起著至關(guān)重要的作用,血管生成現(xiàn)在己成為癌癥治療手段的的潛在靶向。血生成被認(rèn)為是癌癥發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵步驟。血管的連續(xù)生成是惡性腫瘤特征之一?[是腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的先決條件[59,6G]。血管為了維持腫瘤的新陳代謝,提供了要的氧氣和營養(yǎng)。在正常情況下,抗血管生成因子和促血管生成因子保持一衡的狀態(tài),血管生成被嚴(yán)格的控制。然而,在病理環(huán)境中這種動(dòng)態(tài)平衡被打破[61]促血管生成活性增加。因此,抑制腫瘤細(xì)胞的血管生能有效地控制腫瘤進(jìn)展,經(jīng)投入了大量的努力來研發(fā)損壞血管生成的抗癌治療方法[62]。調(diào)節(jié)腫瘤的血管成可以影響腫瘤細(xì)胞的侵襲以及轉(zhuǎn)移能力,直接影響肺癌從起始到癌癥的轉(zhuǎn)移

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Fibroblast-derived CXCL12/SDF-1α promotes CXCL6 secretion and co-operatively enhances metastatic potential through the PI3K/Akt/m TOR pathway in colon cancer[J]. Jia-Chi Ma,Xiao-Wen Sun,He Su,Quan Chen,Tian-Kang Guo,Yuan Li,Xiao-Chang Chen,Jin Guo,Zhen-Qiang Gong,Xiao-Dan Zhao,Jian-Bo Qi.  World Journal of Gastroenterology. 2017(28)



本文編號(hào):3111702

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