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基于Nrf2/HO-1信號(hào)通路的夜關(guān)門(mén)提取物對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)小鼠海馬細(xì)胞HT22損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-10 10:31
  目的:基于核因子2(Nrf2)/血紅素加氧酶1(HO-1)信號(hào)通路研究夜關(guān)門(mén)提取物對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)小鼠海馬細(xì)胞HT22損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。方法:采用谷氨酸(5 mmol/L)建立HT22細(xì)胞損傷模型后,以水溶性維生素E為陽(yáng)性對(duì)照(50μmol/L),采用MTT法檢測(cè)0(空白對(duì)照)、25、50、100μg/mL夜關(guān)門(mén)的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯提取物預(yù)處理12 h后對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)損傷細(xì)胞增殖的影響。以水溶性維生素E為陽(yáng)性對(duì)照(50μmol/L),采用2′,7′-二氯熒光黃雙乙酸鹽探針(DCFH-DA)法檢測(cè)0(空白對(duì)照)、25、50、100μg/mL夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物預(yù)處理12 h后對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)損傷細(xì)胞中活性氧(ROS)水平的影響;以HO-1激動(dòng)劑鈷-原卟啉為陽(yáng)性對(duì)照,采用Western blotting法檢測(cè)0(空白對(duì)照)、25、50、100μg/mL夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物處理24 h后對(duì)細(xì)胞中HO-1蛋白表達(dá)的影響;分別采用Western blotting法(藥物分別處理0.5、1、1.5 h)和免疫熒光染色法(藥物處理1 h)檢測(cè)100μg/mL夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物處理后對(duì)細(xì)胞核內(nèi)外N... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)藥房. 2020,31(11)北大核心

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基于Nrf2/HO-1信號(hào)通路的夜關(guān)門(mén)提取物對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)小鼠海馬細(xì)胞HT22損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究


夜關(guān)門(mén)不同溶劑提取物的細(xì)胞毒性考察結(jié)果

提取物,谷氨酸,細(xì)胞,溶劑


與空白組比較,模型組細(xì)胞的存活率顯著降低(P<0.05)。與模型組比較,陽(yáng)性對(duì)照組和50、100μg/mL夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物組細(xì)胞的存活率顯著降低(P<0.05),而其余提取物組細(xì)胞存活率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),可見(jiàn)夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷具有一定的保護(hù)作用,故后續(xù)試驗(yàn)以夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物為研究對(duì)象。夜關(guān)門(mén)不同溶劑提取物對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)細(xì)胞損傷的影響考察結(jié)果見(jiàn)圖2。3.3 夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)損傷細(xì)胞中ROS水平的影響

電泳圖,蛋白,電泳圖,細(xì)胞


與空白組比較,CoPP組和25、50、100μg/mL夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物組細(xì)胞中HO-1蛋白表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05),且夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物的作用具有一定的濃度依賴趨勢(shì)。各組細(xì)胞中HO-1蛋白表達(dá)的電泳圖見(jiàn)圖3,蛋白表達(dá)水平測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。3.5 夜關(guān)門(mén)二氯甲烷提取物對(duì)細(xì)胞中Nrf2蛋白表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3074518

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