目的研究黃芩含藥血清對神經(jīng)干細胞分化的影響及可能機制。方法分離培養(yǎng)原代乳大鼠神經(jīng)干細胞,利用免疫熒光法進行鑒定。SD大鼠分別給予500和1000mg/kg黃芩水煎劑每日灌胃1次,連續(xù)7天后制備黃芩高、低劑量含藥血清。黃芩低、高含藥血清均設(shè)0.1%、1%、10%三個濃度干預(yù)神經(jīng)干細胞,進行試驗藥物濃度篩選。收集神經(jīng)干細胞以每孔1×10⁵個接種于24孔板中,實驗分為對照組、黃芩含藥血清組和含藥血清加抑制劑組,每組3個復(fù)孔。對照組每孔加入10μl空白大鼠血清,黃芩含藥血清組每孔加入10μl篩選濃度的黃芩含藥血清,含藥血清加抑制劑組每孔加入10μl篩選濃度的黃芩含藥血清及1μl濃度為10mmol/L的H89溶液,隔天換液,共分化7天。比較各組細胞中雙腎上腺皮質(zhì)激素（DCX）、神經(jīng)元核心抗原（NeuN）細胞增長率;檢測細胞中鈉離子通道亞型SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表達,蛋白激酶A（PKA）、磷酸化蛋白激酶A（p-PKA）蛋白表達,細胞上清中腺苷酸環(huán)化酶（AC）、環(huán)磷酸腺苷（cAMP）濃度。結(jié)果篩選出1%黃芩高劑量含藥血清用于后續(xù)實驗。與對照組比... 

【文章來源】：中醫(yī)雜志. 2020,61(16)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 動物
    1.2 藥物與試劑
    1.3 主要試劑及儀器
    1.4 大鼠神經(jīng)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
    1.5 黃芩含藥血清的制備及濃度篩選
    1.6 實驗分組及干預(yù)方法
    1.7 觀察指標及方法
        1.7.1 細胞中DCX、NeuN標記的陽性細胞數(shù)
        1.7.2 細胞中鈉離子通道亞型SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表達
        1.7.3 細胞中PKA、p-PKA蛋白表達
        1.7.4 細胞上清AC及cAMP濃度
    1.8 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 黃芩含藥血清濃度篩選結(jié)果
    2.2 各組細胞中DCX及NeuN陽性細胞增長率比較
    2.3 各組細胞中SCN1A、SCN2A、SCN3A、SCN8A mRNA表達比較
    2.4 各組細胞上清中AC、cAMP濃度比較
    2.5 各組細胞中p-PKA/PKA值比較
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]貝葉斯網(wǎng)絡(luò)模型在中醫(yī)證候研究中的應(yīng)用[J]. 曲淼,唐啟盛,包祖曉,王耘,馬良.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2008(07)
[2]抑郁癥中醫(yī)辨證證型因子頻次分析[J]. 姜勁峰,王玲玲.  新中醫(yī). 2008(02)



本文編號：3066254