研究目的:魚藤素為魚藤酮的類衍生物,來自豆科非洲軟木。魚藤素通過作用于不同的途徑而具有廣譜抗腫瘤活性,例如肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、淋巴癌等。但有研究表明,魚藤素對心臟、肺及神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生損害,此為魚藤素不能作為抗腫瘤藥物的主要原因。為改善魚藤素的毒副作用,在魚藤素的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上合成出了含游離羥基的魚藤素衍生物,從而來探究魚藤素及魚藤素衍生物的體內(nèi)、外抗腫瘤活性。研究內(nèi)容:1.合成出魚藤素及7位羥基取代的魚藤素衍生物,并探究兩種藥物對H1299肺癌細胞及MCF-7乳腺癌細胞的抗增殖活性及誘導凋亡作用的體外研究。2.分子水平上,利用熒光定量PCR和Western Blotting檢測魚藤素和7位羥基取代的魚藤素衍生物處理H1299、MCF-7細胞前后,相關(guān)誘導腫瘤細胞凋亡因子的表達量影響。3.體內(nèi)實驗:建立H1299肺癌移植模型,魚藤素及含游離羥基的魚藤素衍生物進行藥物干預實驗,探究藥物的體內(nèi)抗腫瘤活性。研究結(jié)果:1.合成出魚藤素及7位羥基取代的魚藤素衍生物,并對其結(jié)構(gòu)進行表征。2.CCK-8實驗結(jié)果得知,魚藤素及7位羥基取代的魚藤素衍生物可抑制H1299細胞及MCF-7細胞的增殖作用,并呈時間... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 肺癌及乳腺癌現(xiàn)狀
        1.1.1 肺癌現(xiàn)狀
        1.1.2 乳腺癌現(xiàn)狀
    1.2 魚藤素研究現(xiàn)狀
        1.2.1 魚藤素簡介
        1.2.2 魚藤素體外抗腫瘤活性研究
        1.2.3 魚藤素體內(nèi)抗腫瘤活性研究
        1.2.4 魚藤素毒性研究
    1.3 魚藤素結(jié)構(gòu)改造
    1.4 本課題研究意義與主要研究內(nèi)容
第二章 魚藤素對H1299、MCF-7細胞的抑制增殖和誘導凋亡的活性研究
    2.1 前言
    2.2 材料和儀器
        2.2.1 細胞株
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 魚藤素的合成
        2.3.2 細胞的復蘇與培養(yǎng)
        2.3.3 CCK-8實驗
        2.3.4 顯微鏡觀測細胞形態(tài)
        2.3.5 AO-EB實驗
        2.3.6 AnnexinV-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        2.3.7 統(tǒng)計學分析
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 魚藤素合成實驗
        2.4.2 CCK-8實驗
        2.4.3 顯微鏡下觀察魚藤素對H1299、MCF-7生長狀態(tài)的影響
        2.4.4 AO-EB實驗
        2.4.5 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
    2.5 討論
第三章 7位羥基取代的魚藤素衍生物對H1299、MCF-7細胞的抑制增殖和誘導凋亡的活性研究
    3.1 前言
    3.2 材料和儀器
        3.2.1 主要試劑
        3.2.2 主要儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 7位羥基取代的魚藤素衍生物的合成
        3.3.2 CCK8實驗
        3.3.3 顯微鏡觀測細胞形態(tài)
        3.3.4 AO-EB實驗
        3.3.5 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        3.3.6 統(tǒng)計學分析
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 魚藤素合成實驗
        3.4.2 CCK-8實驗
        3.4.3 顯微鏡下觀察衍生物對H1299、MCF-7生長狀態(tài)的影響
        3.4.4 AO-EB實驗
        3.4.5 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
    3.5 討論
第四章 魚藤素及7位羥基取代的魚藤素衍生物對H1299、MCF-7細胞凋亡的機制研究
    4.1 前言
    4.2 材料和儀器
        4.2.1 主要試劑
        4.2.2 主要儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 qPCR實驗
        4.3.2 Western blotting實驗
        4.3.3 統(tǒng)計學分析
    4.4 結(jié)果
        4.4.1 qPCR實驗
        4.4.2 Western Blot實驗
    4.5 討論
第五章 魚藤素及7位羥基取代的魚藤素衍生物對肺癌小鼠模型的抑瘤作用
    5.1 前言
    5.2 材料和儀器
        5.2.1 實驗動物
        5.2.2 主要試劑
        5.2.3 主要儀器
    5.3 實驗方法
        5.3.1 BALB/c裸鼠H1299肺癌移植模型的建立
        5.3.2 H1299肺癌裸鼠的分組及處理方法
        5.3.3 腫瘤病理學探究
        5.3.4 統(tǒng)計學分析
    5.4 結(jié)果
        5.4.1 各組藥物對裸鼠的影響
        5.4.2 各組移植瘤體積生長及重量的比較
        5.4.3 各組腫瘤體積抑制率的比較
        5.4.4 各組藥物對腫瘤病理學的影響
    5.5 討論
全文小結(jié)與展望
參考文獻
攻讀學位期間成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]魚藤素對SH-SY5Y神經(jīng)母細胞瘤細胞凋亡的誘導作用[J]. 吳碧娟,姜志輝,孫婧雯,譚翠雯,范俁琳,丁曉艷,上官信一,吳新榮.  中國藥理學通報. 2017(08)
[2]乳腺癌相關(guān)基因p16、PTEN、ATM的研究進展[J]. 殷發(fā)祥,許培權(quán).  蚌埠醫(yī)學院學報. 2016(02)
[3]促凋亡基因PUMA與腫瘤[J]. 彭松林,戴朝六.  世界華人消化雜志. 2013(21)
[4]ATM基因與惡性腫瘤發(fā)生關(guān)系的研究進展[J]. 喬勁鵬,彭開桂,李多杰.  中華全科醫(yī)學. 2012(01)
[5]Bcl-2和Bax調(diào)節(jié)細胞凋亡的研究[J]. 車曉芳,羅穎.  國外醫(yī)學.輸血及血液學分冊. 2001(02)

碩士論文
[1]魚藤素聯(lián)用L-肌肽的增效減毒作用研究[D]. 吳碧娟.南方醫(yī)科大學 2017
[2]魚藤素對斑馬魚胚胎CyclinD1的表達調(diào)控及相關(guān)抗腫瘤機制研究[D]. 海洋.華南理工大學 2015
[3]PUMA在胃癌中的表達和作用機制研究[D]. 金偉.浙江大學 2014



本文編號：3040918