目的:高糖導(dǎo)致的大血管和微血管病變繼而引發(fā)的一系列血管并發(fā)癥是糖尿病致殘和致死的首要原因。近年來高糖誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老在糖尿病血管并發(fā)癥中的作用受到了廣泛的關(guān)注。在高糖狀態(tài)下,氧化應(yīng)激水平明顯增加,可下調(diào)細(xì)胞長(zhǎng)壽蛋白Sirt1,從而加速內(nèi)皮細(xì)胞衰老。Sirt1作為去乙�；�,可通過抑制P53活性而減少細(xì)胞周期抑制蛋白P21的表達(dá)而產(chǎn)生抗衰老效應(yīng)。吳茱萸次堿（rutaecarpine,Rut）是傳統(tǒng)中藥吳茱萸的主要活性成分,是一種五環(huán)類吲哚喹唑啉類生物堿,具有廣泛的心血管保護(hù)作用,其主要心血管保護(hù)效應(yīng)均為激活辣椒素受體（Transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）。前期有研究發(fā)現(xiàn)Rut有抑制ROS生成的抗氧化效應(yīng),還有文獻(xiàn)報(bào)道Rut可抑制高血壓狀態(tài)下的內(nèi)皮祖細(xì)胞衰老。因此本課題的研究目的是在培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上觀察Rut對(duì)高糖誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞衰老的影響,并進(jìn)一步確定Rut抗衰老效應(yīng)機(jī)制是否涉及TRPV1/[Ca²⁺]i/Sirt1途徑。方法:在培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株HUVEC中,加入30mM高糖孵育24h誘導(dǎo)高糖... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中文對(duì)照表
第1章 引言
第2章 材料與試劑
    2.1 主要的材料與試劑
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)用的細(xì)胞株
        2.1.2 主要的試劑和產(chǎn)品
    2.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備
    2.3 主要試劑配制
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的培養(yǎng)
        3.1.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.1.2 細(xì)胞傳代
    3.2 實(shí)驗(yàn)分組及處理方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)分組與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        3.2.2 CCK比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖
        3.2.3 細(xì)胞凋亡試劑盒檢測(cè)凋亡率
        3.2.4 細(xì)胞周期試劑盒檢測(cè)細(xì)胞周期
        3.2.5 SA-β-Gal染色法檢測(cè)細(xì)胞衰老
        3.2.6 Fluo-3 AM鈣離子熒光探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣含量
        3.2.7 ROS試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平
        3.2.8 Western blotting檢測(cè)HUVEC細(xì)胞中P21、Sirt1及LC3II/LC3I蛋白表達(dá)水平
    3.3 數(shù)據(jù)處理
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第一部分 RUT抗高糖誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞損傷
        4.1 RUT抑制高糖誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞活力下降
        4.2 RUT可輕度抑制高糖誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞凋亡
        4.3 RUT對(duì)高糖誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞自噬無明顯影響
        4.4 RUT抑制內(nèi)皮細(xì)胞衰老
        4.5 RUT抑制高糖誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞周期G1/G0期阻滯
        4.6 RUT可顯著上調(diào)HUVEC細(xì)胞中長(zhǎng)壽蛋白SIRT1的表達(dá)
        4.7 RUT可顯著降低高糖誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞中ROS的生成
    第二部分 TRPV1/胞內(nèi)鈣信號(hào)介導(dǎo)RUT的抗衰老機(jī)制
        4.8 RUT可升高HUVEC細(xì)胞內(nèi)鈣濃度
        4.9 TRPV1阻斷劑CAPZ及胞內(nèi)鈣信號(hào)阻斷劑（W-7和BAPTA）可減弱RUT的抗衰老作用
第5章 討論
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3032871