發(fā)布時間：2021-02-11 16:57

　　目的本研究以自發(fā)性肥胖型2型糖尿病db/db小鼠為研究對象,觀察紅芪多糖（HPS）對糖尿病心肌病（DCM）心肌的保護作用,借助PCR Array篩選模型動物心肌纖維化的相關基因,尋找控制氧化應激和炎癥反應的重要基因和途徑,驗證模型動物DCM發(fā)病過程中心肌組織PPARγ/NF-κB信號通路及其下游相關基因的表達及HPS干預的影響,探討HPS干預DCM心肌纖維化的作用機理,揭示具有補氣化瘀功效的紅芪之有效成分HPS治療糖尿病及其慢性并發(fā)癥“虛、瘀、毒”病機理論的科學內涵,為HPS防治DCM提供科學依據。方法:本研究分為以下三部分內容（1）第一部分:6周齡雄性2型糖尿病db/db小鼠60只,隨機分為HPS高、中、低劑量組、羅格列酮組和模型組5組;同周齡同品系非糖尿病db/m小鼠12只作為正常組。灌胃給藥8周后,心臟取血,頸椎脫臼處死后取出心臟。全自動生化分析儀檢測血清LDH、CK-MB、TC、TG的含量;ELISA法測定心肌中羥脯氨酸（Hyp）含量;HE、Masson染色觀察小鼠心肌組織病理學改變及纖維化程度,透射電鏡觀察小鼠心肌組織超微結構;q PCR和Western blot法檢測心肌C... 

【文章來源】：甘肅中醫(yī)藥大學甘肅省

【文章頁數】：158 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語表
前言
    參考文獻
第一章 紅芪多糖對2型糖尿病db/db小鼠心肌纖維化的防治作用
    引言
    材料與方法
        1. 實驗材料
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗藥物
            1.3 實驗主要試劑
            1.4 主要實驗儀器與耗材
        2. 實驗方法
            2.1 分組與給藥方法
            2.2 處死與取材
            2.3 實驗觀察項目及操作步驟
            2.4 統(tǒng)計方法
    結果
        1. HPS對DCM一般狀態(tài)的影響
        2. HPS對DCM小鼠體重的影響
        3. HPS對DCM小鼠血糖的影響
        4. HPS對DCM小鼠血清甘油三脂（TG）和總膽固醇（TC）的影響
        5. HPS對DCM小鼠血清乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶-MB（CK-MB）的影響
        6. HPS對DCM小鼠心肌羥脯氨酸（Hyp）含量的影響
        7. HPS對DCM小鼠心肌病理結果的影響
            7.1 HE染色觀察各組心肌形態(tài)學的改變
            7.2 Masson染色觀察心肌膠原纖維沉積情況
            7.3 電子透射顯微鏡觀察各組小鼠心肌超微結構的改變
        8. HPS對DCM小鼠心肌組織中Collagen I、Collagen III mRNA的表達的影響
        9. HPS對DCM小鼠心肌組織中Collagen I、Collagen III蛋白的表達的影響
        10. 相關分析
    討論
    小結
    參考文獻
第二章 應用PCR芯片篩選糖尿病心肌病db/db小鼠心肌纖維化相關基因
    引言
    材料與方法
        1.實驗材料
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗材料與主要試劑
            1.3 主要實驗儀器與耗材
        2.實驗方法
            2.1 處死與取材
            2.2 PCR Array芯片篩選糖尿病db/db小鼠與非糖尿病db/m小鼠心肌組織之間差異表達的基因
    結果
        1.PCR-Array芯片檢測糖尿病db/db小鼠心肌組織中差異表達的基因
        2.差異表達基因的分類
    討論
        1. PCR芯片介紹
        2. PCR芯片分類
        3. PCR芯片的應用
        4. 對DCM心肌纖維化發(fā)生機制的探討
    小結
    參考文獻
第三章 PPARγ/NF-κB信號通路在2型糖尿病db/db小鼠心肌病變中的表達及紅芪多糖的干預研究
    引言
    材料與方法
        1.實驗材料
            1.1 實驗動物
            1.2 實驗藥物
            1.3 實驗主要試劑
            1.4 主要實驗儀器與耗材
        2.實驗方法
            2.1 分組與給藥方法
            2.2 處死與取材
            2.3 實驗觀察項目及操作步驟
            2.4 統(tǒng)計方法
    結果
        1.HPS對DCM小鼠心肌組織SOD、GSH-PX、MDA的影響
        2.HPS對DCM小鼠心肌組織IL-6、TNF-α含量的影響
        3.HPS對DCM小鼠心肌組織中PPARγ、GLUT-4 m RNA表達的影響
        4.HPS對DCM小鼠心肌組織NF-κB、IKKβ mRNA的變化
        5.HPS對DCM小鼠心肌組織MMP-2、MMP-9 mRNA的表達的影響
        6.HPS對DCM小鼠心肌組織PPARγ、GLUT-4 蛋白表達的影響
        7.HPS對DCM小鼠心肌組織中NF-κB、IKKβ 蛋白表達水平的影響
        8.HPS對DCM小鼠心肌組織MMP-2、MMP-9 蛋白的表達
        9.相關分析
            9.1 心肌組織中Hyp含量與TNF-α、IL-6、SOD、GSHx、MDA相關分析結果
            9.2 心肌組織Masson染色膠原纖維陽性染色面積與PPARγ蛋白表達和NF-κB蛋白表達相關分析結果
            9.3 心肌組織PPARγ蛋白表達水平與心肌組織SOD、MDA、GSHx水平相關分析結果
            9.4 心肌組織中NF-κB蛋白表達與心肌組織IL-6、TNF-α的含量相關分析結果
    討論
    小結
    參考文獻
結語與展望
    1.結語
    2.展望
附錄
    附錄1 實驗動物質量合格證
    附錄2 實驗動物設施使用證明
    附錄3 各組小鼠心肌組織HE染色結果
    附錄4 各組小鼠心肌組織Masson染色結果
    附錄5 各組小鼠心肌組織電鏡結果
綜述 糖尿病心肌病的中西醫(yī)研究進展
    1 現代醫(yī)學對糖尿病心肌病的認識
        1.1 糖尿病心肌病的發(fā)病機制
        1.2 糖尿病心肌病的治療進展和現狀
    2 中醫(yī)學對糖尿病心肌病的認識
        2.1 病因病機
        2.2 辨證分型及基本治法
        2.3 中醫(yī)藥防治糖尿病心肌病的研究現狀
    參考文獻
致謝
在學期間取得的主要研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]糖尿病腎病中醫(yī)辨證分型及與客觀指標關系研究進展[J]. 張燁,何立群,彭文.  山東中醫(yī)雜志. 2016(11)
[3]硫化氫抑制p38MAPK和NF-κBp65信號通路活性改善糖尿病心肌纖維化的作用和機制[J]. 宋冰,丁利.  解放軍醫(yī)學雜志. 2016(11)
[4]肥胖型2型糖尿病的內科治療進展[J]. 李星,袁振芳.  中華肥胖與代謝病電子雜志. 2016(03)
[5]黃芪多糖對糖尿病心肌病大鼠的治療作用及機制探討[J]. 陳紅霞,曹霞,盧紅,汪蕾.  山東醫(yī)藥. 2016(30)
[6]紅芪多糖對D-半乳糖致衰老小鼠抗免疫衰老作用的研究[J]. 柳春玲,寇寧,張高林,李磊強,龐大勇,程衛(wèi)東.  中醫(yī)研究. 2016(06)
[7]高脂血癥大鼠肝臟脂蛋白和膽固醇代謝信號通路相關基因表達的變化[J]. 王英,王志丹,宋囡,曹媛,曹慧敏,劉晶晶,楊關林,賈連群.  遼寧醫(yī)學院學報. 2016(02)
[8]紅芪多糖對腦微血管內皮細胞氧化損傷保護作用的差異蛋白質研究[J]. 楊杰,衛(wèi)東鋒,李曉東,張占軍,呂曉云.  中藥藥理與臨床. 2016(02)
[9]紅芪多糖對早期糖尿病腎病db/db小鼠腎臟保護作用及PKC/TIMP-1表達的影響[J]. 祁雪艷,金智生,陳長浩,關雁,王倩,余海艷,張梅菊.  中國老年學雜志. 2015(18)
[10]白藜蘆醇對鏈脲佐菌素誘導2型糖尿病大鼠早期氧化應激和炎癥反應的影響[J]. 王玉琴,張偉.  南通大學學報(醫(yī)學版). 2015(05)

博士論文
[1]燈盞花素對糖尿病心肌病大鼠心臟結構和功能的影響及其機制的探討[D]. 王敏.浙江大學 2010
[2]2型糖尿病大鼠心肌纖維化的炎癥機制及阿托伐他汀、羅格列酮及二者聯合對心肌的保護作用[D]. 楊曉紅.河北醫(yī)科大學 2008

碩士論文
[1]紅芪多糖對糖尿病腎病db/db小鼠腎組織GluT-1、FN和Col-IV表達的影響[D]. 朱真靈.甘肅中醫(yī)學院 2014



本文編號：3029425