背景:細(xì)胞壞死是腦缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的神經(jīng)元死亡的主要方式,研究發(fā)現(xiàn)一種新的程序性壞死方式-壞死性凋亡,可通過釋放DMAPs誘發(fā)炎癥,進(jìn)一步加重組織損傷。壞死性凋亡可能在腦缺血再灌注損傷的病理過程中發(fā)揮重要的作用。有研究報道β-石竹烯能減輕腦缺血再灌注損傷并具有強大的抗炎作用,但其具體保護(hù)機制還有待進(jìn)一步探討。目的:研究β-石竹烯（β-caryophyllene,BCP）對腦缺血再灌注損傷（ischemia-reperfusion,I/R）神經(jīng)保護(hù)作用,觀察其對神經(jīng)元necroptosis和炎癥的影響。方法:1.原代培養(yǎng)神經(jīng)元,進(jìn)行純度鑒定后進(jìn)行試驗,建立體外氧糖剝奪/復(fù)氧（OGD/R）模型;隨機分為7個組,分別為Control組、OGD/R組、OGD/R+BCP（0.2、1、5、25μM）組、OGD/R+Nec-1（10μM）組。氧糖剝奪2 h,復(fù)氧48 h后,采用LDH漏出率測定OGD/R后神經(jīng)元損傷和死亡率;采用PI/Hoechst和Annexin V/PI核染色法觀察OGD/R后神經(jīng)元主要死亡方式;采用激光共聚焦法測定神經(jīng)元MLKL表達(dá)情況。2.將C57BL/6小鼠隨機分組為假... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

神經(jīng)元生長形態(tài)及純度鑒定Fig.1-1Morphologyandpurityofneuronsinprimaryculture

1-2 BCP 對 OGD/R 誘導(dǎo)的神經(jīng)元 LDH 漏出率的影響he effect of BCP on LDH release of primary neurons exposeNote:##p < 0.01 vs. control;**p < 0.01 vs. OGD/R groupD/R 誘導(dǎo)的神經(jīng)元死亡的影響，在糖氧剝奪-復(fù)氧后，神經(jīng)元損傷，細(xì)胞膜破壞，RIPK1 的抑制劑 Nec-1 能明顯降低 PI 陽性的細(xì)胞，能明顯降低 PI 陽性細(xì)胞，減輕 OGD/R 后神經(jīng)元損，對 PI 陽性細(xì)胞和細(xì)胞核固縮呈藍(lán)色高亮的細(xì)胞分示。結(jié)果顯示在 OGD/R 后，其中 PI 陽性細(xì)胞約為元約為 19%，表明神經(jīng)元 OGD/R 后主要表現(xiàn)為細(xì)不大，較少出現(xiàn)細(xì)胞核固縮，并且 Nec-1 能明顯抑/R 后神經(jīng)元死亡方式主要為細(xì)胞壞死。BCP (0.2,1,5，并具有統(tǒng)計學(xué)差異，其中 BCP(5 μM)的效果最佳

BCP對OGD/R后神經(jīng)元的PI/Hoechst染色結(jié)果的影響


本文編號：3005824