我國海洋中蘊含著充足的生物資源,由于生存環(huán)境的特殊性,海洋生物體內多糖的合成過程與陸地生物存在差異,產生了很多結構新穎,具有特殊生理功能的活性物質�，F(xiàn)研究表明,海洋多糖因具有多種生物活性將可能作為藥物中有效成分克服某些疑難病癥。隨著對海膽多糖結構研究的不斷深入,人們開始關注海膽多糖的生物功能及其藥理活性,并在抗腫瘤、調節(jié)免疫活性等方面取得初步進展。蝦夷馬糞海膽（Strongylocentrotus intermedius）生殖腺多糖（SUP）通過結構解析,表明其分子量小,結構簡單穩(wěn)定,活性高,可能具有促進細胞成熟分化的功能。在此基礎之上,本實驗研究SUP協(xié)同重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2）對體外培養(yǎng)小鼠顱頂前成骨細胞（MC3T3-E1細胞）成骨分化活性的影響。采用復合酶法、乙醇沉淀法以及超濾分級法提取海膽生殖腺多糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化法分析其單糖組成。以MC3T3-E1細胞模型測試SUP協(xié)同成骨活性能力,以不同濃度的SUP作用于MC3T3-E1細胞,用MTT法、BCIP/NBT組織染色法、茜紅素染色法以及Elisa法分別對MC3T3-E1細胞的... 

【文章來源】：大連工業(yè)大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１?ＳＵＰ的單糖組成高效液相色譜圖??４??

ＱＤＯ?２００?４．００?６００?ＳＯＣ?１０．ＣＤ?２０３?１４００?１６０３?ＩＳ?００?２Ｑ０Ｃ?２２０３?Ｘ００?２￡??Ｍｎ＾ｅｓ??圖３．１?ＳＵＰ的單糖組成高效液相色譜圖??４??Ｆｉｇ．３．１?ＨＰＬＣ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ＳＵＰ?ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ??表３．１?ＳＵＰ的單糖組成高效液相色譜圖??Ｔａｂｌｅ．３．１?ＨＰＬＣ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ＳＵＰ?ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ??未知糖峰?出峰時間／ｍｉｎ??ａ?１０．１３７??ｂ?１２．１４２??ｃ?１９．５３９??Ｈ?ｌ??３（Ｘｈ?ｌ??ｓ?ｇ３??２９＞?＾?Ｓ??２０ＣＬ?人??－?Ｊ?！＼??Ｑ０Ｃ＞—■?Ｊ?，■■?■?．?７７＾．??Ｑ００?２００?４００?６００?８００?１Ｑ０Ｏ?１２００?１４?ＣＯ?ｉａ〇０?－Ｂ００?２ＱＣＤ?２２００?２４．０３?２６Ｃ??Ｍａｌｅｓ??圖３．２各標準單糖的液相色譜圖??Ｆｉｇ．３．２?ＨＰＬＣ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ?

３．１＿２?ＳＵＰ白勺純度鑒定??本實驗按照２．２．５中的方法進行高效液相色譜分析（ＨＰＬＣ）法鑒定ＳＵＰ的純度及??相對分子量大小，ＳＵＰ的液相色譜圖結果如圖３．３－３．５所示。ＳＵＰ色譜峰的保留時間為??２５．５?ｍｉｎ?（圖３．３所示），圖譜呈現(xiàn)狹窄單一對稱性較好的對稱峰，分子量分布范圍較??小，說明本實驗中所得ＳＵＰ分子量較均一，是較純的均一組分。采用ＨＰＬＣ法測得的??相對分子質量為ｌｋＤ標準品的液相色譜圖（圖３．４所示），保留時間為２７?ｍｉｎ；采用??ＨＰＬＣ法測得的相對分子質量為５?ｋＤ標準品的液相色譜圖（圖３．５所示），保留時間為??２４．５?ｍｉｎ。該實驗中所得ＳＵＰ色譜峰出峰位置在１?ｋＤ和５?ｋＤ之間，曹月剛［８４Ｈ侖文中所??得ＳＵＰ的相對分子質量為４４３６?Ｄ，與本實驗中所得結果一致。因此，該多糖ＳＵＰ可用??于后續(xù)的細胞實驗各指標的檢測。??ｚ叫??Ｏｆｉ？Ｔ???ａｏｏ?２〇〇?４．（〇?６．ｃｏ?ｔｏｏ?ｉｓ．ｅｃ?ｉｒｃｏ?ｍ．ｏｏ?＜ａｏｃ?ｕ．ｃｏ?ｘａｏ?？ｏｃ?７＊．ｃｃ?＾?？ｅｏ?２？ｏｃ?ｗｏｏ?？〇〇?ｍｏｃ?ｍｃｃ?ｍｃｏ?＜ｏｅｃ?＊３００?？〇〇?？〇〇?４？ｏｃ?

【參考文獻】：
期刊論文
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[9]硫酸酯化茶多糖的制備及降血糖活性的研究[J]. 彭永華,金征宇,王元鳳.  食品工業(yè)科技. 2006(11)
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碩士論文
[1]金絲桃苷通過BMP和Wnt/β-catenin信號通路調控成骨細胞MC3T3-E1增殖分化的實驗研究[D]. 林思儉.南昌大學醫(yī)學院 2015
[2]蝦夷馬糞海膽生殖腺多糖的提取、分離純化及結構研究[D]. 曹月剛.大連工業(yè)大學 2014



本文編號：2993357