目的:參附湯是治療缺血性心臟病的臨床常用經(jīng)典名方,主要用治心腎陽虛、陽虛氣弱證缺血性心臟病,其療效已得到廣泛的臨床證實。但因參附湯有效成分復雜多樣,其對缺血性心肌的保護作用機制研究尚不深入。前期實驗中已知參附湯有效成分中的人參皂苷Rg1、Re、烏頭原堿Aconine單體及配伍對心肌細胞鈣離子的有效調(diào)控作用,本實驗研究從抗氧化應激角度探討三種單體及配伍對缺氧復氧損傷H9C2心肌細胞的保護作用及分子機制。主要檢測指標包括抗氧化蛋白酶類Prx-3、SOD2,活性氧（ROS）,促細胞凋亡因子Bax以及抗氧化相關上游信號通路因子Nrf-2。通過觀察各種氧化應激相關蛋白活性變化,探討參附湯三種有效成分及配伍對抗氧化相關蛋白標志物的調(diào)控作用及機制,以期從微觀角度豐富參附湯對缺血性心肌病的保護作用機制,為參附湯益氣溫陽治療缺血性心臟病的中醫(yī)藥理論提供現(xiàn)代科學證據(jù)。研究結(jié)果顯示,Rg1/Re配伍組能夠上調(diào)Prx-3/SOD2表達并降低ROS生成水平;Rg1/Aconine配伍組能夠激活Nrf-2信號通路并下調(diào)ROS水平;Aconine組可以上調(diào)Prx-3表達并降低ROS水平。實驗結(jié)果證實參附湯三種有效成... 

【文章來源】：北京中醫(yī)藥大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

缺氧24H復氧3H對H9C2細胞生存率的影響(N=8)

確定細胞缺氧復氧損傷造模條件后,我們將細胞分組加藥預培養(yǎng),造模前鏡下觀察各組細胞形態(tài)均處于良好狀態(tài),然后嚴格按照造模條件進行缺氧復氧處理。在收集細胞進行后續(xù)實驗之前,我們顯微鏡下選用20倍鏡,對細胞形態(tài)拍照記錄。見圖2:3.3各有效組成分濃度組對缺氧復氧損傷H9C2細胞內(nèi)Prx-3蛋白表達的影響

鏡下肉眼觀察各組細胞形態(tài),判斷各組藥物對缺氧復氧損傷心肌細胞的保護作用。為了進一步客觀證明參附湯三種有效成分對缺氧復氧損傷心肌細胞的保護作用,我們將分組培養(yǎng)于100mm培養(yǎng)皿并造模完成的細胞在低溫環(huán)境下收集,并進行細胞蛋白提取,然后采用蛋白免疫印跡法測定各組細胞的Prx-3活性水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn),缺氧復氧損傷模型組細胞Prx-3水平明顯下降(P<0.05,N=6),用藥各組均不同程度的提高了缺氧復氧損傷細胞的Prx-3水平,如圖3所示。雖然用藥各組均呈現(xiàn)了保護趨勢,但Rg1+HR組、Re+HR組、Re+Aconine+HR組、Rg1+Re+Aconine+HR組對缺氧復氧損傷心肌細胞Prx-3水平的影響并無明顯差異(P>0.05,N=6);只有Aconine+HR、Rg1+Re+HR、Rg1+Aconine+HR組則明顯提高了缺氧復氧損傷心肌細胞的Prx-3水平(P<0.01,N=6)。3.3.2細胞免疫熒光法檢測細胞內(nèi)Prx-3水平

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]參附注射液治療急性失代償性心力衰竭的臨床研究[D]. 鄧建南.遼寧中醫(yī)藥大學 2016
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本文編號：2992870