背景及實驗?zāi)康墓切躁P(guān)節(jié)炎（Osteoarthritis,OA）,是一種由軟骨下骨破壞和軟骨退變引起的關(guān)節(jié)疾病,其中軟骨退變是OA的根本病變。促炎因子如白細胞介素-1β（IL-1β）在OA發(fā)展中起著重要的作用。羥基積雪草苷（Madecassoside,MA）是一種源于積雪草（Centella asiatica）的三萜類成分,具有抗氧化和抗炎等多種藥理活性作用。本研究中,我們通過在體外和體內(nèi)的實驗探討了羥基積雪草苷（MA）對軟骨細胞的保護和抗骨性關(guān)節(jié)炎（OA）的作用,以及相關(guān)的作用機制。實驗方法在體外實驗中,我們提取了大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細胞進行培養(yǎng)。首先CCK-8被用來測定羥基積雪草苷對大鼠軟骨細胞的毒性作用。其次,我們利用IL-1β建立了大鼠軟骨細胞骨性關(guān)節(jié)炎模型,經(jīng)過不同濃度的羥基積雪草苷干預(yù),通過聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測實驗組與對照組中的COX-2,iNOS,MMP-3及MMP-13的mRNA表達情況;蛋白印跡技術(shù)（Western Blotting）被用來檢測COX-2,iNOS,MMP-3,MMP-13,Ⅱ型膠原（Co12）,sox-9 及 NF-KB pp65/p65的蛋白... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＣＣＫ－８結(jié)果圖，ＭＡ對軟骨細胞活性的影響

及ＭＭＰ－１３蛋白表達明顯增加（；？?＜０．０５），且隨著羥基積雪草苷濃度的增高??ＣＯＸ－２，?ｉＮＯＳ，?ＭＭＰ－３和ＭＭＰ－１３蛋白表達降低。此部分結(jié)果與ＰＣＲ結(jié)果??一致，并有明顯的差異（圖３）。??１７??

Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ實驗結(jié)果顯示，ＩＬ－１（３?（１０ｎｇ／ｍｌ）刺激后，Ｃｏｌ２和Ｓｏｘ９的蛋??白表達顯著降低（ｐ＜〇．〇５），而５（＾Ｍ濃度的ＭＡ恢復(fù)了?Ｃｏｌ２和Ｓｏｘ９的蛋白水平??（圖４）。此外，ＭＡ恢復(fù)了由ＩＬ－１Ｊ３誘導(dǎo)的軟骨細胞中ＳａｆｒａｎｉｎＯ染色的下降（圖??５）?〇??１８??


本文編號：2992368