目的:通過體外實(shí)驗(yàn)研究臭椿酮對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期分布及凋亡的影響,并初步探討其可能的抗腫瘤機(jī)制,為臨床鼻咽癌的治療提供新的候選藥物。方法:（1）采用MTT法檢測臭椿酮對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞體外生長的抑制作用:體外培養(yǎng)人低分化鼻咽癌CNE-2細(xì)胞,分別用不同濃度的臭椿酮（0、0.2、0.4、0.8、1.6和3.2μM）處理細(xì)胞24、48和72小時(shí)后,分別測定不同濃度梯度及不同時(shí)間梯度時(shí)的光密度值（Optical density,OD）,并根據(jù)此OD值計(jì)算細(xì)胞存活率及不同時(shí)間（24、48和72小時(shí)）的半數(shù)抑制濃度(IC₅₀);（2）采用Hoechst 33342熒光染色法觀察臭椿酮對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞凋亡形態(tài)的影響:根據(jù)MTT法檢測結(jié)果,選取合適的藥物濃度（0、1.6、3.2和6.4μM）分別處理人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞48小時(shí),并進(jìn)行熒光染色,于熒光倒置顯微鏡下觀察并拍照記錄藥物干預(yù)后細(xì)胞凋亡形態(tài)的變化;（3）采用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry,FCM）檢測不同濃度臭椿酮對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞周期分布及細(xì)胞凋亡的影響:以上述藥物濃度... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

臭椿酮的分子結(jié)構(gòu)式Figure1-1Molecularformulaofailanthone

制備好的 5 組蛋白樣品（尚未加入 5×SDS-PAGE 4 l 置于相應(yīng)的酶標(biāo)板孔中，并各加入 16μl PBS 20μl；根據(jù)蛋白濃度測定說明書，在酶標(biāo)板標(biāo)準(zhǔn) 0、1、2、4、8、12、16、20μl 的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，并液將總體積補(bǔ)足至 20μl，即各孔標(biāo)準(zhǔn)品的終濃度0.1、0.2、0.3、0.4 及 0.5mg/ml；并以每孔 200μl 入到標(biāo)準(zhǔn)品孔和蛋白樣品孔的各孔中，蓋上蓋子勻；于二氧化碳培養(yǎng)箱中 37℃避光孵育 30 分鐘； 波長處的吸光度值（A490nm）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖（如圖 2-1 所示），再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲的總蛋白吸光度值計(jì)算出各個(gè)樣品的總蛋白濃度。

CNE-2 細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及凋亡影響的研究 時(shí)間、不同濃度的臭椿酮對(duì)人鼻咽癌 CNE-2 細(xì)胞存活率的影響（ n作用時(shí)間24h 48h 5 100.00±0.00 100.00±0.00 5 61.70±2.22a60.28±1.23a5 49.08±0.60a44.93±0.71ab5 45.95±0.83a39.87±3.16ab5 44.36±0.92a38.02±0.55ab5 42.62±2.62a37.98±0.60ab同濃度的比較：與 control 組比較，aP<0.05；同一濃度不同時(shí)間的 48h 組比較，cP<0.001。

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