脂肪組織特異性nSREBP1c表達(dá)下小腸糖吸收功能研究及FTZ干預(yù)
發(fā)布時(shí)間:2021-01-12 13:54
目的:1、觀察非肥胖性糖脂紊亂的aP2-nSREBP1c轉(zhuǎn)基因小鼠模型小腸病理形態(tài)及腸道糖吸收功能特點(diǎn)。2、探討aP2-nSREBP1c小鼠脂肪萎縮狀態(tài)下腸系膜脂肪病理形態(tài),其與腸道功能的相關(guān)性,以及SREBPs與腸糖吸收功能的可能性關(guān)系。3、從腸道糖吸收的角度出發(fā),觀察復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方(FTZ)對(duì)aP2-nSREBP1c脂肪萎縮模型小鼠糖代謝改善下,對(duì)腸道形態(tài)功能的影響,探討FTZ改善糖脂代謝病的機(jī)制。方法:1、脂肪組織特異性nSREBP1c表達(dá)下小腸糖吸收功能研究。具體內(nèi)容包括:1.1將雄性aP2-nSREBP1c小鼠確認(rèn)基因型后隨機(jī)分組,每周測(cè)量進(jìn)食量和體質(zhì)量,每3周檢測(cè)禁食血和隨機(jī)血血漿中GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C等血液指標(biāo);1.2小鼠14周齡時(shí),進(jìn)行口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT)和腹腔注射葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(IPGTT);1.3小鼠16周齡時(shí),進(jìn)行尿D-木糖實(shí)驗(yàn);1.4取18周齡小鼠進(jìn)行活體BrdU標(biāo)記,1小時(shí)后頸椎脫臼處死,取材,量取腸管長(zhǎng)度及重量;通過(guò)抗BrdU抗體特異性結(jié)合,免疫組化染色觀察空腸增殖情況;1.5通過(guò)蘇木素-伊紅(HE)染色觀察十二指腸、空腸、回...
【文章來(lái)源】:廣東藥科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
鈣離子及味覺(jué)受體對(duì)頂膜GLUT2的調(diào)控[65]
2 影響腸道糖吸收功能的因素胃腸激素:減肥手術(shù)明顯提高循環(huán)血中腸道激素水平,在體重下降前快速緩解M,腸道激素可調(diào)節(jié)食物的攝取和代謝。腸道來(lái)源的激素包括:胰高血糖素樣肽GLP-1)、YY 肽(PYY)、葡萄糖依賴性促胰島素多肽(GIP)和胃泌酸調(diào)節(jié)素LP-1/胰高血糖素雙重激動(dòng)劑),這些腸道激素,在進(jìn)食后過(guò)性升高,聯(lián)合作用促島素分泌,控制血糖。GLP-1 通過(guò)刺激胰島 β 細(xì)胞的胰島素分泌而起到降低血糖降血糖素的作用。給予 GLP-1 可降低 2 型糖尿病受試者的血糖,并減少食物攝GLP-2 可通過(guò)刺激隱窩細(xì)胞增殖和抑制小腸細(xì)胞凋亡,通過(guò)粘膜上皮細(xì)胞的擴(kuò)張營(yíng)養(yǎng)吸收。GLP-2 迅速促進(jìn)頂端 GLUT2 插入,上調(diào)空腸果糖運(yùn)輸;管腔內(nèi)葡萄有與 GLP-2 體內(nèi)相似的作用,葡萄糖可能對(duì)腸上皮細(xì)胞產(chǎn)生直接影響,上調(diào)頂端T2[70]。GLP-2 也可增加 SGLT1 的頂端水平,但這個(gè)過(guò)程比調(diào)節(jié) GLUT2 慢的多膽囊收縮素-8(CCK-8)通過(guò)減少其在頂膜上的豐度而迅速抑制 SGLT1,但不參膜的 GLUT2 易位[72]。腸道糖吸收的內(nèi)分泌和旁分泌調(diào)節(jié)具體見圖 1-2。
圖 2-1 小腸在體單向糖灌流模型示意圖Fig.2-1 The sketch map of the single-pass perfused mouse intestine model 蘇木素-伊紅染色(HE)實(shí)驗(yàn)小鼠解剖后取材,截取十二指腸、空腸、回腸、腸系膜脂肪等組織分好后置于包埋盒中,浸泡于 4%多聚甲醛,24 小時(shí)后取出于自動(dòng)脫水機(jī)進(jìn),組織完成石蠟包埋后,放置于-20℃冰箱中以備用,制作 5μm 厚的石蠟 HE 染色。① 烤片:將石蠟切片放入染色架中,于 55℃烘箱中烤片 30min。② 脫蠟:將染色家依次浸泡在染色盒中,透明劑(ⅠⅡ)各 30min;無(wú)水乙Ⅱ)各 15min;95%乙醇 10min;85%乙醇 5min;75%乙醇 5min;③ 染色:蘇木素 7min;流水 7min;伊紅 25s;純水 5s;④ 脫水:75%乙醇 1min;85%乙醇 2min;95%乙醇 2min;無(wú)水乙醇(Ⅰ5min;透明劑(ⅠⅡ)各 5min;⑤ 封片
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]從《內(nèi)經(jīng)》“五臟皆柔弱,善病消癉”理論探討2型糖尿病防治策略[J]. 鄧小敏,陳蘭,陳思華,郭超峰,羅劉軍,蘇紅光,單亮亮,羅彪. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(03)
[2]內(nèi)臟脂肪指數(shù)與糖脂代謝病的相關(guān)性研究[J]. 余雪,李敏謙,郭姣. 世界中醫(yī)藥. 2019(01)
[3]過(guò)食肥甘與糖尿病關(guān)系的歷史沿革[J]. 田佳星,李敏,仝小林. 中醫(yī)雜志. 2018(12)
[4]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方治療老齡脂肪萎縮小鼠脂肪肝的藥理研究[J]. 寇天順,王露莎,吳琪,陳遠(yuǎn)云,榮向路. 今日藥學(xué). 2018(05)
[5]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊對(duì)兔腹主動(dòng)脈再狹窄模型血脂及炎癥因子的影響[J]. 張仁丹,黎土娣,王加偉,鄧惠堅(jiān),曾智桓. 中國(guó)病理生理雜志. 2018(02)
[6]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊調(diào)控MEKK2-Wnt偶聯(lián)拮抗β-catenin泛素化改善大鼠糖皮質(zhì)激素骨質(zhì)疏松癥[J]. 洪郭駒,陳鵬,韓曉蕊,何偉,孫平. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2018(01)
[7]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方對(duì)非酒精性脂肪肝的肝PPARα及其下游基因的影響[J]. 付蓉,榮向路,郭姣. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(06)
[8]糖脂代謝病與精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)[J]. 郭姣,肖雪,榮向路,葉得偉,嚴(yán)詩(shī)楷. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2017(01)
[9]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激防治小鼠NAFLD研究[J]. 陳智權(quán),葉碧嫻,榮向路,郭姣. 中藥材. 2016(05)
[10]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方對(duì)高脂血癥小鼠甘油三酯代謝的影響[J]. 詹會(huì)霞,葉碧嫻,榮向路,郭姣. 中藥新藥與臨床藥理. 2015(06)
碩士論文
[1]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化改善脂肪萎縮狀態(tài)胰島素抵抗的研究[D]. 王露莎.廣東藥科大學(xué) 2018
本文編號(hào):2972967
【文章來(lái)源】:廣東藥科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
鈣離子及味覺(jué)受體對(duì)頂膜GLUT2的調(diào)控[65]
2 影響腸道糖吸收功能的因素胃腸激素:減肥手術(shù)明顯提高循環(huán)血中腸道激素水平,在體重下降前快速緩解M,腸道激素可調(diào)節(jié)食物的攝取和代謝。腸道來(lái)源的激素包括:胰高血糖素樣肽GLP-1)、YY 肽(PYY)、葡萄糖依賴性促胰島素多肽(GIP)和胃泌酸調(diào)節(jié)素LP-1/胰高血糖素雙重激動(dòng)劑),這些腸道激素,在進(jìn)食后過(guò)性升高,聯(lián)合作用促島素分泌,控制血糖。GLP-1 通過(guò)刺激胰島 β 細(xì)胞的胰島素分泌而起到降低血糖降血糖素的作用。給予 GLP-1 可降低 2 型糖尿病受試者的血糖,并減少食物攝GLP-2 可通過(guò)刺激隱窩細(xì)胞增殖和抑制小腸細(xì)胞凋亡,通過(guò)粘膜上皮細(xì)胞的擴(kuò)張營(yíng)養(yǎng)吸收。GLP-2 迅速促進(jìn)頂端 GLUT2 插入,上調(diào)空腸果糖運(yùn)輸;管腔內(nèi)葡萄有與 GLP-2 體內(nèi)相似的作用,葡萄糖可能對(duì)腸上皮細(xì)胞產(chǎn)生直接影響,上調(diào)頂端T2[70]。GLP-2 也可增加 SGLT1 的頂端水平,但這個(gè)過(guò)程比調(diào)節(jié) GLUT2 慢的多膽囊收縮素-8(CCK-8)通過(guò)減少其在頂膜上的豐度而迅速抑制 SGLT1,但不參膜的 GLUT2 易位[72]。腸道糖吸收的內(nèi)分泌和旁分泌調(diào)節(jié)具體見圖 1-2。
圖 2-1 小腸在體單向糖灌流模型示意圖Fig.2-1 The sketch map of the single-pass perfused mouse intestine model 蘇木素-伊紅染色(HE)實(shí)驗(yàn)小鼠解剖后取材,截取十二指腸、空腸、回腸、腸系膜脂肪等組織分好后置于包埋盒中,浸泡于 4%多聚甲醛,24 小時(shí)后取出于自動(dòng)脫水機(jī)進(jìn),組織完成石蠟包埋后,放置于-20℃冰箱中以備用,制作 5μm 厚的石蠟 HE 染色。① 烤片:將石蠟切片放入染色架中,于 55℃烘箱中烤片 30min。② 脫蠟:將染色家依次浸泡在染色盒中,透明劑(ⅠⅡ)各 30min;無(wú)水乙Ⅱ)各 15min;95%乙醇 10min;85%乙醇 5min;75%乙醇 5min;③ 染色:蘇木素 7min;流水 7min;伊紅 25s;純水 5s;④ 脫水:75%乙醇 1min;85%乙醇 2min;95%乙醇 2min;無(wú)水乙醇(Ⅰ5min;透明劑(ⅠⅡ)各 5min;⑤ 封片
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]從《內(nèi)經(jīng)》“五臟皆柔弱,善病消癉”理論探討2型糖尿病防治策略[J]. 鄧小敏,陳蘭,陳思華,郭超峰,羅劉軍,蘇紅光,單亮亮,羅彪. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(03)
[2]內(nèi)臟脂肪指數(shù)與糖脂代謝病的相關(guān)性研究[J]. 余雪,李敏謙,郭姣. 世界中醫(yī)藥. 2019(01)
[3]過(guò)食肥甘與糖尿病關(guān)系的歷史沿革[J]. 田佳星,李敏,仝小林. 中醫(yī)雜志. 2018(12)
[4]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方治療老齡脂肪萎縮小鼠脂肪肝的藥理研究[J]. 寇天順,王露莎,吳琪,陳遠(yuǎn)云,榮向路. 今日藥學(xué). 2018(05)
[5]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊對(duì)兔腹主動(dòng)脈再狹窄模型血脂及炎癥因子的影響[J]. 張仁丹,黎土娣,王加偉,鄧惠堅(jiān),曾智桓. 中國(guó)病理生理雜志. 2018(02)
[6]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊調(diào)控MEKK2-Wnt偶聯(lián)拮抗β-catenin泛素化改善大鼠糖皮質(zhì)激素骨質(zhì)疏松癥[J]. 洪郭駒,陳鵬,韓曉蕊,何偉,孫平. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2018(01)
[7]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方對(duì)非酒精性脂肪肝的肝PPARα及其下游基因的影響[J]. 付蓉,榮向路,郭姣. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(06)
[8]糖脂代謝病與精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)[J]. 郭姣,肖雪,榮向路,葉得偉,嚴(yán)詩(shī)楷. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2017(01)
[9]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激防治小鼠NAFLD研究[J]. 陳智權(quán),葉碧嫻,榮向路,郭姣. 中藥材. 2016(05)
[10]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方對(duì)高脂血癥小鼠甘油三酯代謝的影響[J]. 詹會(huì)霞,葉碧嫻,榮向路,郭姣. 中藥新藥與臨床藥理. 2015(06)
碩士論文
[1]復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化改善脂肪萎縮狀態(tài)胰島素抵抗的研究[D]. 王露莎.廣東藥科大學(xué) 2018
本文編號(hào):2972967
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