發(fā)布時(shí)間：2021-01-08 22:53

　　目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察中藥復(fù)方真武湯對(duì)擴(kuò)張型心肌病小鼠的影響,從多個(gè)層次探討其對(duì)轉(zhuǎn)基因擴(kuò)張型心肌病小鼠作用機(jī)制的研究,為治療擴(kuò)張型心肌病提供新的思路和理論依據(jù)。材料與方法:選用cTnT^R141W轉(zhuǎn)基因擴(kuò)張型心肌病小鼠60只和C57BL/6J正常小鼠15只,均購(gòu)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所,飼養(yǎng)于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。4個(gè)月齡C57BL/6J正常小鼠15只作為正常組,4個(gè)月齡cTnT^R141W轉(zhuǎn)基因擴(kuò)張型心肌病小鼠60只,按照體重隨機(jī)分為4組,模型組、卡托普利組、真武湯高劑量組及真武湯中劑量組,每組各15只。正常組及模型組給予等量生理鹽水灌胃,按人和小鼠之間等效劑量換算方法,計(jì)算出小鼠灌胃劑量分別是:中藥組予真武湯灌胃,真武湯中劑量組用藥量為18.2g/kg/d（生藥）;真武湯高劑量組用藥量為36.4g/kg/d（生藥）;卡托普利組予卡托普利灌胃,卡托普利用藥量為10mg/kg/d。每日2次灌胃,每次0.3ml,連續(xù)給藥1個(gè)月。實(shí)驗(yàn)一采用切片掃描及光鏡下觀察心臟病理改變;透射電鏡下觀察心肌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu);HpaII酶切和RT-PCR鑒定各... 

【文章來(lái)源】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

掃描光鏡下5個(gè)月齡小鼠全心縱切面：A、正常組；B、模型組；C、真武湯中劑量組ABC

1、切片掃描及光鏡下觀察心臟病理改變對(duì) 5 月齡野生型（正常組）、cTnTR141W轉(zhuǎn)基因小鼠（模型組）和真武湯組小鼠取出心臟進(jìn)行觀察：掃描切片觀察顯示，模型組 cTnTR141W轉(zhuǎn)基因小鼠的心臟與正常鼠心臟相比較，明顯增大，左心室明顯擴(kuò)張，室壁變��；真武湯給藥后小鼠的心臟左心室腔較模型組減小，室壁相對(duì)厚度變大（圖 1.1）；光鏡下左心室心肌 HE 染色模型組小鼠心肌與正常組小鼠心肌相比排列紊亂，真武湯給藥后心肌細(xì)胞排列較（圖 1.2）。圖 1.1 掃描光鏡下 5 個(gè)月齡小鼠全心縱切面：A、正常組；B、模型組；C、真武量組A BC

A B C D圖 1.3 透射電鏡下心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu):A、正常組；B、模型組；C、真武湯中劑量組；D、卡托普利組3、HpaII 酶切和 RT-PCR 鑒定轉(zhuǎn)基因小鼠 cTnTR141W的表達(dá)水平：因?yàn)?cTnTR141WmRNA 與內(nèi)源性 cTnTmRNA 分子量接近，所以利用 RT-PCR 和 HpaII 酶切驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因的表達(dá)水平。正常組經(jīng)酶切后未檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因cTnTR141W，模型組轉(zhuǎn)基因cTnTR141W是內(nèi)源性 cTnT 的 1.13 倍（圖 1.4）。圖 1.4 cTnTR141W轉(zhuǎn)基因小鼠基因的表達(dá)4、RT-PCR 和 HpaII 酶切鑒定真武湯給藥后心肌組織中 cTnTR141W的表達(dá)水平：內(nèi)源性 cTnT轉(zhuǎn)基因 cTnT


本文編號(hào)：2965460