目的心肌缺血/再灌注損傷（MIRI）涉及鈣超載、炎癥反應(yīng)、線粒體損傷、細(xì)胞凋亡與細(xì)胞自噬等多種分子機(jī)制,其中自噬是近年來抗MIRI的研究熱點(diǎn)。自噬是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過程,自噬這一完整的動(dòng)態(tài)變化過程被稱為自噬流。白藜蘆醇是一種多酚類化合物,近年研究發(fā)現(xiàn)其可緩解MIRI。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),白藜蘆醇可抑制缺氧心肌細(xì)胞內(nèi)乳酸脫氫酶的漏出,增加抗氧化酶GSH-Px的表達(dá)水平,減輕心肌細(xì)胞缺氧損傷;進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),白藜蘆醇緩解心肌細(xì)胞/缺氧復(fù)氧損傷可能與調(diào)控自噬有關(guān)。在此基礎(chǔ)上,本研究以自噬流為切入點(diǎn),探尋缺氧/復(fù)氧損傷心肌細(xì)胞內(nèi)自噬流的狀態(tài),考察白藜蘆醇對(duì)缺氧/復(fù)氧損傷心肌細(xì)胞的藥效,探究其藥效與調(diào)控自噬流的關(guān)系,為白藜蘆醇防治MIRI的研究提供依據(jù)。方法和結(jié)果首先通過體外實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)大鼠乳鼠心肌細(xì)胞,分別于三氣培養(yǎng)箱與CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行缺氧12 h、復(fù)氧12 h的造模處理,復(fù)制心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型。1.缺氧/復(fù)氧損傷心肌細(xì)胞內(nèi)的自噬流的研究借助自噬流抑制劑氯喹（Chloroquine,CQ）考察心肌細(xì)胞自噬流狀態(tài),細(xì)胞融合率達(dá)到80%后,將其分為如下4組:正常對(duì)照組（Control組）、正... 

【文章來源】：中央民族大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

"1自噬流示意由fuel

停留在０噻溶酶體形成前，在自噬抑制劑有或無的情況卜，通過檢，可以評(píng)價(jià)細(xì)胞內(nèi)自嗤流狀態(tài)。氯喹（ｃｈｊｏｒｏｑｕｉｎｅ．?ＣＱ）、巴弗洛霉素］．?ｂａｆＡｌ）、Ｅ６４ｄ以及胃酶抑素Ａ均為溶＿體阻斷齊ＩＪ，可抑制自噬溶體降解，它們是常用的檢測(cè)自嘍流的工具藥｜２８＃Ｍ｜。例如，考察藥物（流的影響，選�。猓幔妫粒熳鳛樽允闪饕种苿�，通過Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ法測(cè)ＬＣ圖１－２所示的結(jié)果，則分析如下：Ｃｏｍｐｏｕｎｄ＋ｂａｆＡｌ組－１；；?Ｃｏｎｔｒｏｌ＋ｂａｆＡｌ，表明藥物可促進(jìn)自哩體形成，激活自哩：Ｃｏｍｐｏｕｏｎｄ組與Ｃｏｎｔｒｏｌ則只有可能是自噬體被降解，自噬流活化，因此我們可以得到如下結(jié)自嘍，活化自噬流。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｃｏｍｐｏｕｎｄ??

第三節(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果??一、大鼠乳鼠心肌細(xì)胞免疫熒光鑒定結(jié)果??由抗橫紋肌肌動(dòng)蛋白多克隆抗體免疫熒光染色后，于倒置熒光顯微鏡下觀察，其中橫??紋肌肌動(dòng)蛋白呈綠色，細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞形態(tài)和輪廓較清晰，可觀察到呈三角形或梭形??的心肌細(xì)胞，如圖２－１所示。橫紋肌肌動(dòng)蛋白多克隆抗體的陽性表達(dá)細(xì)胞的比率可達(dá)９５％，??表明心肌細(xì)胞純度較高，可用于下一步實(shí)驗(yàn)。??ＦＩＴＣ?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]自噬流的檢測(cè)方法[J]. 呂曉希,胡卓偉.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2016(01)
[2]白藜蘆醇對(duì)心肌細(xì)胞缺氧性損傷的作用[J]. 周秋蘭,劉丹妮,古麗麗,朱丹,黃秀蘭.  中央民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(01)
[3]白藜蘆醇對(duì)缺氧誘導(dǎo)大鼠乳鼠心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J]. 黃秀蘭,周秋蘭,古麗麗,劉丹妮,李志勇,劉慶山,朱丹.  中國中藥雜志. 2010(01)



本文編號(hào)：2952083