Hippo信號通路是細(xì)胞抑制性生長通路,通過抑制細(xì)胞過度增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡來調(diào)節(jié)組織再生和器官的大小,對早期胚胎發(fā)育、器官大小控制及再生、組織穩(wěn)定性維持均起到關(guān)鍵作用。過去二十年中,眾多研究發(fā)現(xiàn)Hippo信號通路的異常與包括惡性腫瘤在內(nèi)的等多種疾病密切相關(guān)。YAP蛋白是該通路中最核心的效應(yīng)分子,在Hippo通路異常時,YAP進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與TEADs形成異源二聚體復(fù)合物激活下游基因轉(zhuǎn)錄。己有報道的TEAD-YAP抑制劑存在分子機(jī)制不明確、活性弱、成藥性差等劣勢,都處于臨床前研究階段。因此,靶向TEAD-YAP的小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)與設(shè)計仍是亟待解決的熱點(diǎn)研究方向。論文第二、三章,我們首先建立并優(yōu)化基于熒光偏振技術(shù)的靶向TEAD1-YAP相互作用抑制劑高通量篩選平臺,在此基礎(chǔ)上對實(shí)驗(yàn)室自建的天然產(chǎn)物庫進(jìn)行篩選。接著利用AlphaScreen、核磁共振、表面等離子共振等技術(shù),對篩選得到活性較好的化合物進(jìn)行了假陽性排除與結(jié)合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,最終選擇非共價苗頭化合物DC_TEF 1進(jìn)行進(jìn)一步表征。我們發(fā)現(xiàn)DC_TEF 1結(jié)合在TEAD1棕櫚酸底物口袋,并抑制TEA... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２?ＹＡＰ和ＴＥＡＤ１蛋白序列示意圖??

圖１．６藥物共價結(jié)合歷程

度ＥＣ５Ｇ等參數(shù)，難以真正體現(xiàn)其真實(shí)效應(yīng)和安全性，因此采用傳統(tǒng)的指標(biāo)評價??共價型藥物可能會引起錯誤判斷。??圖１．６藥物共價結(jié)合歷程。Ｎｕ：?ＯＨ、ＳＨ等親核基團(tuán)；Ｅ：親電基團(tuán)??大多數(shù)藥物靶點(diǎn)是蛋白質(zhì)，其結(jié)構(gòu)中的羥基、巰基等官能團(tuán)本質(zhì)上作為親核??反應(yīng)基團(tuán)。共價結(jié)合藥物在化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有親電官能團(tuán)，如Ｍｉｃｈａｅｌ受體（丙烯??酰胺、炔烴、磺酰胺、氰基丙烯酰胺等）、鹵素、環(huán)氧、羰基、異氰基等結(jié)構(gòu)，可??作為親電“彈頭”，與蛋白中親核基團(tuán)相互反應(yīng)形成共價鍵，常見的藥物與蛋白??共價反應(yīng)類型主要有：�；磻�(yīng)、燒基化反應(yīng)、Ｍｉｃｈａｅｌ加成、二硫鍵化、Ｐｉｎｎｅｒ??反應(yīng)等。根據(jù)靶點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)的特殊性質(zhì)，藥物與反應(yīng)位點(diǎn)形成不同的共價鍵，在??設(shè)計共價型彈頭時，有諸多可供選擇的親電反應(yīng)基團(tuán)［９？。??Ｒ?人々、、Ｒ：Ｓｖ＾、、?ｒ＾／Ｎ°２?Ｒ?人產(chǎn)??ＣＮ??ｒＡ＾ｘ?ｒＡ?ｒ?為Ｚｎ?ｒ』、ＬＧ??Ｘ：Ｆ?ｏｒ?Ｃｌ?ＬＧ：Ｓ－，Ｓｅ－??圖１．７常見活性反應(yīng)官能團(tuán)——“彈頭”??１３??


本文編號：2943008