目的:研究白芍總苷（total glucosides of paeony,TGP）對(duì)小鼠T淋巴細(xì)胞體外增殖及活化誘導(dǎo)細(xì)胞死亡（AICD）的影響,并初探其免疫抑制機(jī)制。方法:1.富集小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞:利用免疫磁珠分選技術(shù),無(wú)菌分離C57BL/6小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)T淋巴細(xì)胞純度。2.TGP對(duì)活化誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞死亡（AICD）的影響:將純化后的T淋巴細(xì)胞懸液接種到24孔板中,7.5×l0⁵個(gè)/孔,按照TGP溶液終濃度（0ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml）設(shè)為空白組、TGP低中高劑量組,anti-CD3/CD28刺激T淋巴細(xì)胞活化,培養(yǎng)24h或48h后采用AnnexinV/7AAD染色檢測(cè)細(xì)胞活性。3.TGP對(duì)小鼠T淋巴細(xì)胞增殖的影響:利用CFSE標(biāo)記T淋巴細(xì)胞,然后將CFSE標(biāo)記的T淋巴細(xì)胞接種到24孔板中,7.5×10⁵個(gè)/孔,按照TGP溶液終濃度（0ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200 ug/ml）設(shè)為空白組、TGP低中高劑量組,anti-CD3/CD28刺激T淋巴細(xì)胞增殖,培養(yǎng)4... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．２?ＴＧＰ對(duì)Ｔ淋巴細(xì)胞活化的影響??２１??

ＣＤ３／ＣＤ２８刺激細(xì)胞活化增殖，４８小時(shí)后，鏡下觀察ＴＧＰ處理組細(xì)胞集落明顯??減少。流式細(xì)胞計(jì)數(shù)也提示：與空白對(duì)照組相比，ＴＧＰ低、中、高處理組ＣＤ４＋??或ＣＤ８＋Ｔ淋巴細(xì)胞活細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)顯著降低（圖２．３）。提示：ＴＧＰ高、中、低??劑量組均可抑制ＣＤ４或ＣＤ８陽(yáng)性Ｔ淋巴細(xì)胞克隆增殖，且ＴＧＰ濃度越高抑制??作用越顯著。??２．２．４?ＴＧＰ對(duì)小鼠Ｔ淋巴細(xì)胞ＡＩＣＤ的影響（２４小時(shí)＞??將Ｔ淋巴細(xì)胞與不同濃度的ＴＧＰ溶液共培養(yǎng)，藥物最終濃度分別為０?ｕｇ／ｍｌ、??５０ｕｇ／ｍｌ、１００ｕｇ／ｍｌ、２００ｕｇ／ｍｌ，ａｎｔｉ－ＣＤ３／ＣＤ２８?刺激?Ｔ?淋巴細(xì)胞活化，２４?小時(shí)??后采用ＡｎｎｅｘｍＶ／７ＡＡＤ染色檢測(cè)Ｔ淋巴細(xì)胞存活情況。流式結(jié)果提示：共培養(yǎng)??２４小時(shí)后，高劑量組活細(xì)胞比例較空白組下降明顯，提示高濃度（２００ｕｇ／ｍｌ）??ＴＧＰ可促進(jìn)Ｔ淋巴細(xì)胞Ａ１ＣＤ，此外ＣＤ８＋Ｔ淋巴細(xì)胞活細(xì)胞比例下降更明顯，??提示ＣＤ８叮淋巴細(xì)胞可能對(duì)藥物更敏感（圖２．４）。??２．２．５?ＴＧＰ對(duì)小鼠Ｔ淋巴細(xì)胞ＡＩＣＤ的影響（４８小時(shí)）??流式結(jié)果顯示：ＴＧＰ處理活化Ｔ淋巴細(xì)胞４８小時(shí)后，與空白組相比，中劑??２２??

２?…圖吻．ＩＩ?吻?Ｅｌ?２００ｕｇ／ｍｌ??ｉ?＂ｉ?Ｉ?■?１?ｉ．??－ＨＢｌ?１１１?Ｂｌ?ｌｉｒｎ??圖２．５?ＴＧＰ對(duì)活化誘導(dǎo)Ｔ淋巴細(xì)胞死亡的影響（４８小時(shí)）??２３??


本文編號(hào)：2942810