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醒腦靜對(duì)SAH大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞自噬的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-12-27 14:52
  目的 研究醒腦靜注射液對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血(Subarachnoid Hemorrhage,SAH)大鼠模型海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞自噬的影響。方法 實(shí)驗(yàn)第一部分、選取36只健康清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley大鼠(350±30g),依次編號(hào)后使用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠等分為假手術(shù)組(Sham組)、蛛網(wǎng)膜下腔出血組(SAH組)、SAH+醒腦靜注射液治療組(藥物組)三個(gè)組。Sham組僅將纖芯插入頸內(nèi)動(dòng)脈而不刺破血管,SAH模型參考文獻(xiàn)采用頸內(nèi)動(dòng)脈刺破法制備,藥物組在造模成功后給予醒腦靜注射液腹腔內(nèi)注射干預(yù),選取造模成功后24小時(shí)為時(shí)間節(jié)點(diǎn)。穿梭箱實(shí)驗(yàn)觀察各組模型大鼠逃到安全區(qū)的時(shí)間(ERT)以及逃到安全區(qū)的次數(shù)(ERN),對(duì)比各組大鼠學(xué)習(xí)記憶等行為學(xué)功能的改變;HE染色觀察各組模型大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化;免疫組織化學(xué)染色及Western Blot實(shí)驗(yàn)分析Beclin-1和LC3-II蛋白在大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)第二部分、選取40只健康清潔級(jí)雄性Sprague-Dawley大鼠(350±30g),依次編號(hào)后使用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠等分為3-MA(3-甲基腺嘌呤)組、3-MA+醒腦靜注... 

【文章來源】:華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】:59 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

醒腦靜對(duì)SAH大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞自噬的影響


頸部血管及神經(jīng)解剖

頸內(nèi)動(dòng)脈,翼腭


破血管后大鼠出現(xiàn)呼吸節(jié)律改變及肢體輕微抽搐;3、大鼠的瞳孔表現(xiàn)出暫時(shí)性的擴(kuò)大;4、解剖腦組織后可見蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)血凝塊,尤其是在基底池和環(huán)池比較明顯[30],這是金標(biāo)準(zhǔn)。(見圖 7)模型制備過程中的注意事項(xiàng):1、大鼠在受到刺激后具有很強(qiáng)的攻擊性,在麻醉及腹腔注射的過程中一定要注意防護(hù),要避免被其咬傷、抓傷;2、手術(shù)過程盡量在顯微鏡下操作并使用顯微手術(shù)器械,嚴(yán)格沿肌肉間隙分離,注意避免損傷神經(jīng)血管;3、游離頸叢神經(jīng)時(shí)動(dòng)作要輕柔,避免拉斷頸叢神經(jīng)纖維;4、頸內(nèi)動(dòng)脈的分離盡量要到達(dá)其進(jìn)入顱內(nèi)的入口處,這樣就可以完全暴露頸內(nèi)動(dòng)脈于入顱前發(fā)出的分支翼腭支,當(dāng)纖芯穿入時(shí)就能夠使用針式顯微神經(jīng)剝離子協(xié)助纖芯順利進(jìn)入顱內(nèi),避免盲穿時(shí)穿入翼腭支或因反復(fù)穿刺而刺穿血管,從而提高模型的成功率。要避免結(jié)扎翼腭支,而增大模型大鼠的死亡風(fēng)險(xiǎn);5、穿刺的時(shí)間一定要盡量縮短,頸總動(dòng)脈的阻斷時(shí)間最好在 2-3 分鐘內(nèi)[31],以防出現(xiàn)腦缺血及缺血再灌注損傷,而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。6、造模后一定要充分復(fù)蘇后再送回飼養(yǎng)室,以防大鼠因體溫過低、呼吸抑制等死亡。

頸外動(dòng)脈結(jié)扎,頸外動(dòng)脈


圖 3 頸外動(dòng)脈結(jié)扎 圖 4 剪斷的頸外動(dòng)脈Fig.3 ligation of external carotid artery Fig.4 The external carotid artery is severed

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的相關(guān)性研究[J]. 齊文濤,曹德茂,彭愛軍,王友偉,武永康.  醫(yī)學(xué)研究雜志. 2018(08)
[3]天麻鉤藤飲對(duì)帕金森病模型大鼠紋狀體α-突觸核蛋白含量及自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3B表達(dá)的影響[J]. 彭偉,張立娟,張倩,王康鋒,李思毅,楊潔,王海燕.  中醫(yī)雜志. 2018(14)
[4]動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣的研究進(jìn)展[J]. 孫悅?cè)A,韓金濤.  中國(guó)微創(chuàng)外科雜志. 2018(06)
[5]醒腦靜注射液對(duì)顱腦外傷大鼠腦細(xì)胞凋亡及相關(guān)凋亡蛋白影響的研究[J]. 趙軍蒼,王獻(xiàn)明,張瑩瑩,郭宏盛.  現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2018(16)
[6]蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的研究進(jìn)展[J]. 單宏寬,劉剛.  分子影像學(xué)雜志. 2018(01)
[7]雷帕霉素對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠早期腦損傷的保護(hù)作用[J]. 馬仁政,曹守明,賽因巴雅爾,李建民.  腦與神經(jīng)疾病雜志. 2018(02)
[8]大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后海馬區(qū)磷酸化細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2表達(dá)與細(xì)胞自噬的關(guān)系[J]. 安朝旺,劉瑤,任藝藝,李建民,孫竹梅,趙雅寧.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(06)
[9]頸內(nèi)動(dòng)脈刺破法制作大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型[J]. 劉振剛,高建亮,孫林林,郭鑫,王萌,龐智寅,付愛軍,李建民,田景瑞.  中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2017(06)
[10]ERK1/2和PI3-K通路在蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠海馬區(qū)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞自噬的調(diào)控作用[J]. 趙雅寧,孫竹梅,趙旭,劉俊杰,李建民,薛承景.  神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2017(02)

博士論文
[1]硫化氫對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的影響及其機(jī)制的研究[D]. 崔永華.蘇州大學(xué) 2016

碩士論文
[1]蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠海馬區(qū)ROCK2信號(hào)通路對(duì)自噬的影響[D]. 孫林林.華北理工大學(xué) 2018
[2]mTOR信號(hào)通路在蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的作用及機(jī)制研究[D]. 徐祥.蘇州大學(xué) 2015



本文編號(hào):2941940

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