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清肺化痰湯通過抑制EGFR通路下調MUC5AC的表達治療COPD的研究

發(fā)布時間:2020-12-25 23:44
  目的:研究清肺化痰湯治療慢性阻塞性肺疾。–OPD)可能的機制。方法:應用煙霧吸入聯(lián)合脂多糖(LPS)灌肺復合因素的方法,建立COPD大鼠模型,造模成功后將大鼠隨機分為6組,分別為模型對照組,清肺化痰湯7.5、15、30 g/kg組和氨溴索35 mg/kg組,另設正常對照組。造模28 d后開始給藥,連續(xù)給藥14 d。末次藥后測定大鼠呼吸功能,觀察肺的大體外觀并觀察大鼠肺組織粘液增生的AB-PAS染色情況。應用LPS誘導NCI-H292細胞建立粘液高分泌模型,將NCI-H292細胞分為8組分別是正常對照組、模型對照組(LPS 10μg/mL)、胎牛血清組、AG1478組(10μg/mL AG1478)、清肺化痰湯7.5 g/kg含藥血清5%、10%、20%組、清肺化痰湯7.5 g/kg 10%含藥血清+A1478組。用免疫細胞化學法和Real-time RT-PCR法觀察MUC5AC的表達情況,用Western Blot法檢測EGFR蛋白的表達情況。結果:與正常對照組比較,模型對照組大鼠肺功能明顯降低,肺組織體積明顯增大,質地變硬,AB-PAS染色結果顯示模型對照組大鼠氣道有較多杯狀細胞... 

【文章來源】:中藥藥理與臨床. 2020年04期 北大核心

【文章頁數】:7 頁

【部分圖文】:

清肺化痰湯通過抑制EGFR通路下調MUC5AC的表達治療COPD的研究


清肺化痰湯對大鼠COPD模型肺大體外觀的影響

模型圖,粘液,模型,黏液


AB-PAS染后圖中酸性黏液物質或細胞呈藍色,中性黏液物質或細胞呈紅色,混合黏液物質或細胞呈紫紅色。由圖2可知,正常對照組大鼠的氣管見到極其少量的杯狀細胞存在,并且氣道內無明顯黏液分泌;模型對照組大鼠氣道可見到較多杯狀細胞增生,并且有大量黏液形成,堵塞氣道;氨溴索35 mg/kg治療后大鼠較模型對照組大鼠氣道黏液分泌有所減少,杯狀細胞增生減輕;相較模型對照組清肺化痰湯7.5、15、30 g/kg治療后大鼠氣道黏液分泌隨著劑量的升高明顯減少,杯狀細胞增生也有所減輕。表明清肺化痰湯3個劑量對減輕COPD病癥中氣道黏液高分泌療效顯著,并呈現出劑量依賴性,見表2。表2 清肺化痰湯對大鼠COPD模型粘液量的影響 ( x ˉ ±s,n=10) 組別 劑量/(g/kg) PAS陽性表達/IOD值 正常對照 - 0.17±0.04** 模型對照 - 0.64±0.17 氨溴索 35×10-3 0.23±0.07** 清肺化痰湯 7.5 0.42±0.13** 清肺化痰湯 15 0.34±0.09** 清肺化痰湯 30 0.29±0.08**

含藥血清,蛋白,細胞,藍色


免疫細胞化學法結果顯示:MUC5AC蛋白陽性顆粒表現為紫藍色,細胞核為淡紅色。我們觀察每張細胞片時,隨機選取 5 個400 倍高倍視野,計算每個高倍視野的陽性細胞數占細胞總數的百分比。如圖3所示:正常對照組呈弱陽性表達,表現為胞漿呈現紫藍色的染色極少。在模型對照組可見強陽性MUC5AC的表達,表現為胞漿和細胞間隙內出現大量的紫藍色染色。清肺化痰湯7.5 g/kg含藥血清5%、10%、20%組治療后胞漿和內紫藍色染色變淺,與模型對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表3。表3 清肺化痰湯7.5 g/kg含藥血清對LPS刺激后的NCI-H292細胞中MUC5AC蛋白表達的影響 ( x ˉ ±s,n=6) 組別 含藥血清濃度 MUC5AC陽性細胞率/% 正常對照 19.1±1.3** 模型對照 78.5±3.4 胎牛血清 74.6±3.6 清肺化痰湯 5 45.5±2.7** 清肺化痰湯 10 36.1±3.2** 清肺化痰湯 20 40.2±2.9** 與模型對照組比較**P<0.01(下同)。

【參考文獻】:
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本文編號:2938608

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