目的研究鹽酸藥根堿（JAT）對NCI-H716細(xì)胞分泌GLP-1的促進(jìn)作用,并初步闡明JAT恢復(fù)內(nèi)源性GLP-1分泌作用與AMPK/PKC信號通路相關(guān)。方法采用CCK-8法檢測不同濃度JAT（6、30、60、90、150、300μmol/L）對NCI-H716細(xì)胞活性的影響,篩選150μmol/L JAT作為本實(shí)驗(yàn)基本濃度。分別選擇JAT低、中、高濃度（100、150、200μmol/L）、150μmol/L JAT+不同濃度抑制劑Dorsomorphin（2、10、50μmol/L）、150μmol/L JAT+不同濃度抑制劑Chelerythrine（2、10μmol/L）對NCI-H716細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),采用CCK-8方法檢測細(xì)胞活性,酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定GLP-1含量,RT-PCR法檢測GLP-1mRNA水平,Western blot法檢測GLP-1蛋白表達(dá)。結(jié)果 JAT可促進(jìn)NCIH716細(xì)胞分泌GLP-1（P<0.05）;AMPK通路抑制劑Dorsomorphin和PKC通路抑制劑Chelerythrine均可抑制JAT的作用（P<0.05）,且抑制劑... 

【文章來源】：中西醫(yī)結(jié)合研究. 2020年03期

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同濃度JAT對細(xì)胞活性的影響

采用CCK-8方法檢測細(xì)胞活性，不同處理間細(xì)胞活性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），可視為同等條件。見圖2。2.3 不同抑制劑對藥根堿促進(jìn)NCI-H716細(xì)胞分泌GLP-1的影響

Western blot法檢測GLP-1蛋白的表達(dá)結(jié)果顯示，藥根堿可明顯促進(jìn)NCI-H716細(xì)胞GLP-1表達(dá)，且150μmol/L的藥根堿效果最好，而Dorsomorphin可抑制藥根堿的作用，且濃度越高，抑制作用越明顯。見圖3及圖4。圖4 藥物對NCI-H716細(xì)胞GLP-1蛋白表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：2931703