肝纖維化是由各種致病因子導(dǎo)致肝臟內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過度沉積的病理過程,是包括肝硬化在內(nèi)的多種慢性肝病發(fā)展過程中的重要環(huán)節(jié),積極防治肝纖維化具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。研究結(jié)果表明,腸道菌群或是諸多肝臟疾病發(fā)生發(fā)展的推動(dòng)力,但腸道菌群與肝纖維化的關(guān)系有待進(jìn)一步研究。樟芝（Antrodia camphorata）是我國(guó)珍貴的藥食用菌,具有保肝效果。本論文通過建立小鼠肝纖維化模型,運(yùn)用組織病理學(xué)和分子生態(tài)學(xué)等技術(shù)手段對(duì)肝纖維化后腸道菌群的變化進(jìn)行了確認(rèn),并通過肝纖維化小鼠和正常小鼠同籠飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)以及糞菌移植（FMT）實(shí)驗(yàn),證實(shí)腸道菌群是肝纖維化發(fā)展的驅(qū)動(dòng)力。而樟芝發(fā)酵菌絲體粉（AC）整體入藥可有效防治CCl₄誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化,16S rDNA高通量測(cè)序表明其可改變腸道菌群結(jié)構(gòu),并利用肝臟轉(zhuǎn)錄組測(cè)序（RNA-seq）技術(shù)對(duì)AC防治肝纖維化的機(jī)制進(jìn)行解析,隨后利用FMT實(shí)驗(yàn)證明AC能通過調(diào)節(jié)腸道菌群直接防治肝纖維化,并以此為基礎(chǔ),建立腸道微生物體外培養(yǎng)模型發(fā)酵制備微生態(tài)制劑用以防治肝纖維化。本研究為尋找肝纖維化的治療靶點(diǎn)及有效干預(yù)措施提供新的視角。主要結(jié)論如下:1、以肝組織膠原... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

肝纖維化是慢性肝病發(fā)展為肝硬化的中心環(huán)節(jié)Fig.1-1Liverfibrosisisanecessarystageforthedevelopmentofchronicliverdiseaseaslivercirrhosis.

糖（lipopolysaccharide，LPS）激活枯否細(xì)胞中的 Toll 樣受體（toll-like receptor，TLR4 途徑，使核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear transcription factor，NF）-κB/干擾素調(diào)節(jié)因子（interferregulatory factor，IRF）3 信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，激活諸如腫瘤壞死因子（tumor necrosis factorTNF）-α 和干擾素（interferon，IFN）-γ 等促炎細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄[9]。該途徑能導(dǎo)致內(nèi)皮胞功能障礙，鄰近細(xì)胞間溶質(zhì)交換功能受損，肝細(xì)胞功能改變，進(jìn)而導(dǎo)致非實(shí)質(zhì)細(xì)胞傷。在另一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)，與單獨(dú)培養(yǎng) HSCs 相比，HSCs 和枯否細(xì)胞或正常肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)表現(xiàn)出更多的活化表型，增值速率大幅提高且膠原合成水平也有一定的增長(zhǎng)[10此外，枯否細(xì)胞和肝細(xì)胞能釋放 ROS，增加肝細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng)，并進(jìn)一步刺HSCs 的活化[11]。ROS 主要通過線粒體電子傳遞鏈，線粒體損傷或通過激活細(xì)胞色素P450（cytochrome P450，CYP），煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenidinucleotide phosphate，NADPH）氧化酶，黃嘌呤氧化酶催化產(chǎn)生。ROS 的產(chǎn)生主要細(xì)胞中 NADPH 氧化酶（HSCs、巨噬細(xì)胞、肝細(xì)胞）和一氧化氮（nitricoxide，NO）量（枯否細(xì)胞）有關(guān)[12]。臨床上，酒精性肝病的發(fā)病機(jī)制主要涉及乙醇類飲品攝入CYP2E1 表達(dá)增多，肝臟中 ROS 水平急劇升高，引起肝小葉 III 區(qū)（中心區(qū)）損傷NADPH 氧化酶則通過產(chǎn)生氧化應(yīng)激來介導(dǎo)肝損傷和肝纖維化發(fā)生[13]。

圖 1-3 影響肝纖維化的外部因素[36]Fig. 1-3 Extrahepatic factors that affect liver fibrosis..1.1.3 細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)（1）自噬自噬是一種存在于真核細(xì)胞中的細(xì)胞降解過程。其主要通過激活 HSCs 參與肝纖，也可以通過影響其他纖維細(xì)胞來參與纖維化進(jìn)程。靜息狀態(tài)的 HSCs 中充滿了含黃酯的細(xì)胞質(zhì)脂滴（lipiddroplets，LDs），當(dāng)靜息狀態(tài)的 HSCs 轉(zhuǎn)化為成 MFB 后，L少，自噬增加。自噬可以通過脂類自噬途徑（lipophagy）將 LDs 中的甘油三酯等運(yùn)溶酶體中降解來為 HSCs 提供能量[37-39]。（2）激活 TGF-β 或 PDGF 信號(hào)通路肝臟中 TGF-β 有重要的功能，它可以促進(jìn)肝細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡，發(fā)疫調(diào)節(jié)和誘導(dǎo)肝纖維化的發(fā)生等。MFB 分泌的 TGF-β 還可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡[40]。纖維化形成過程中，肝組織和血液中的 TGF-β1 水平升高，TGF-β1 的過度表達(dá)可以步促進(jìn)肝纖維化進(jìn)程。TGF-β1 通過泛素蛋白酶體途徑激活 Smad2 和 Smad3，同時(shí) Smad7。Smad2 和 Smad3 都是促纖維化因子，Smad3 基因敲除小鼠可以抵御二甲

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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