由于人們生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)的改變,非酒精性脂肪肝（NAFLD）的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)。NAFLD是除外酒精和其他明確因素所致肝損傷的一種臨床病理綜合征,以肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過度沉積和脂肪變性為主要特征。NAFLD嚴(yán)重者可發(fā)生肝纖維化,肝硬化等,嚴(yán)重危及生命健康。到目前為止,NAFLD還沒有批準(zhǔn)的治療藥物。本實(shí)驗(yàn)通過高脂飲食的方法建立NAFLD小鼠模型和棕櫚酸誘導(dǎo)L-02細(xì)胞的非酒精性脂肪變性經(jīng)典模型,通過體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)探討芹菜素抗非酒精性脂肪肝作用及機(jī)制。目的通過離體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究芹菜素抗非酒精性脂肪肝的作用及機(jī)制。方法細(xì)胞實(shí)驗(yàn):人正常肝細(xì)胞系L-02細(xì)胞,常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)胞的復(fù)蘇、消化、傳代和凍存。選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行造模及用藥,觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積情況,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯（TG）含量;蛋白免疫印跡法檢測(cè)JAK2/STAT3介導(dǎo)的信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá);動(dòng)物實(shí)驗(yàn):隨機(jī)將60只健康的雄性C57小鼠分為正常組、模型組、芹菜素組,每組各20只。其中正常組小鼠給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng),模型組和芹菜素組給予高脂飲食建立小鼠非酒精性脂肪肝模型。飼養(yǎng)8周后,每天對(duì)各組小鼠給予相應(yīng)的藥物灌胃,連續(xù)給藥1... 

【文章來(lái)源】：河南科技大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 非酒精性脂肪肝概述
    1.2 非酒精性脂肪肝的流行病學(xué)及發(fā)病機(jī)制
        1.2.1 非酒精性脂肪肝的流行病學(xué)
        1.2.2 非酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制
        1.2.3 非酒精性脂肪肝的治療
    1.3 芹菜素
        1.3.1 芹菜素藥理學(xué)作用
        1.3.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
    1.4 JAK2/STAT3 介導(dǎo)的炎癥通路與非酒精性脂肪肝
第2章 芹菜素改善棕櫚酸誘導(dǎo)的L-02細(xì)胞非酒精性脂肪變性作用及機(jī)制
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 細(xì)胞株
        2.2.2 試劑
        2.2.3 藥品
        2.2.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.5 試劑配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 PA誘導(dǎo)的L-02 細(xì)胞高脂模型的建立
        2.3.3 油紅O檢測(cè)PA誘導(dǎo)的L-02 細(xì)胞脂質(zhì)沉積
        2.3.4 PA誘導(dǎo)的L-02 細(xì)胞甘油三酯的檢測(cè)
        2.3.5 Western Blot檢測(cè)JAK2/STAT3 通路相關(guān)因子蛋白的表達(dá)情況
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.5.1 芹菜素改善L-02 細(xì)胞脂質(zhì)的貯存
        2.5.2 芹菜素改善L-02 細(xì)胞TG的貯存
        2.5.3 芹菜素抑制JAK2/STAT3 介導(dǎo)的信號(hào)通路
第3章 芹菜素改善高脂飲食誘導(dǎo)小鼠非酒精性脂肪肝作用及機(jī)制..
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.4 試劑配方
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 非酒精性脂肪肝小鼠模型的建立、分組及藥物治療
        3.3.2 血清樣品制備
        3.3.3 血清生化指標(biāo)檢測(cè)
        3.3.4 口服葡萄糖耐量檢測(cè)（Oral glucose tolerance,OGTT）
        3.3.5 肝指數(shù)的計(jì)算
        3.3.6 蠟塊包埋組織切片制作
        3.3.7 HE染色觀察肝組織病理學(xué)變化
        3.3.8 油紅O染色觀察肝組織脂滴
        3.3.9 酶標(biāo)法檢測(cè)肝組織甘油三酯
        3.3.10 qRT-PCR法檢測(cè)肝組織IL-6,TNF-α、Fas、srebf-1 mRNA轉(zhuǎn)錄水平
        3.3.11 蛋白免疫印跡法檢測(cè)肝組織P-Jak2/Jak2、P-stat3/stat3 蛋白的表達(dá)
    3.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.5 結(jié)果
        3.5.1 芹菜素改善小鼠糖脂代謝
        3.5.2 芹菜素改善小鼠口服糖耐量
        3.5.3 芹菜素降低小鼠肝臟指數(shù)
        3.5.4 芹菜素改善肝臟病變
        3.5.5 芹菜素降低肝臟組織TG含量
        3.5.6 芹菜素改善小鼠肝功能
        3.5.7 芹菜素降低小鼠肝組織炎癥因子IL-6,TNF-α和脂代謝因子Fas、srebf-1 mRNA的表達(dá)
        3.5.8 芹菜素對(duì)JAK2/STAT3 通路的抑制作用
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略語(yǔ)詞匯表
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Nonalcoholic fatty liver disease: Evolving paradigms[J]. Amedeo Lonardo,Fabio Nascimbeni,Mauro Maurantonio,Alessandra Marrazzo,Luca Rinaldi,Luigi Elio Adinolfi.  World Journal of Gastroenterology. 2017(36)
[2]非酒精性脂肪肝C57BL/6小鼠模型的建立[J]. 潘磊,張金彪,崔榮崗,趙保輝,李華,張忠勇,王旭初.  中國(guó)組織工程研究. 2016(40)
[3]芹菜素的研究進(jìn)展[J]. 黃佳穎,楊悅,李玉榮,王星.  江蘇科技信息. 2015(04)
[4]芹菜素對(duì)非酒精性脂肪肝大鼠的保護(hù)作用研究[J]. 席建軍,莊讓笑,王福根,潘紅英,柯云玲,方紅英,蔡兆斌.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2013(11)
[5]芹菜素藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 林麗文,辛勤.  中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué). 2012(08)
[6]同等劑量槲皮素、芹菜素對(duì)高尿酸血癥大鼠的影響及其機(jī)制研究[J]. 姚芳芳,張銳,傅瑞娟,陳姜,何偉.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2012(06)
[7]非酒精性脂肪肝流行病學(xué)的研究進(jìn)展[J]. 朱科倫,朱郇憫,曾文鋌,梁建新.  廣州醫(yī)藥. 2011(04)
[8]芹菜素抗氧化作用研究進(jìn)展[J]. 孫秀琴,李榮華,唐濤.  中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生. 2009(27)
[9]Nonalcoholic fatty liver disease: An overview of current insights in pathogenesis, diagnosis and treatment[J]. Tim CMA Schreuder,Bart J Verwer,Carin MJ van Nieuwkerk,Chris JJ Mulder.  World Journal of Gastroenterology. 2008(16)

博士論文
[1]芹菜素調(diào)控IKK-β介導(dǎo)的NF-κB活化并抑制胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)[D]. 吳定國(guó).第三軍醫(yī)大學(xué) 2016

碩士論文
[1]化合物P7C3-A20在非酒精性脂肪肝中的治療作用及機(jī)制[D]. 華夏.中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué) 2018
[2]護(hù)肝清脂片治療非酒精性脂肪肝病的藥效學(xué)研究及機(jī)制探討[D]. 唐外姣.南方醫(yī)科大學(xué) 2013



本文編號(hào)：2908947