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基于胰島保護(hù)與逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗的家蠶抗糖尿病作用研究

發(fā)布時間:2020-12-10 12:01
  本文主要從家蠶提取物對MIN6細(xì)胞存活率影響、對小鼠胰島功能的保護(hù)作用及改善胰島素抵抗作用三個方面進(jìn)行研究,探討了家蠶提取物對胰島β細(xì)胞的作用及對胰島素信號與炎癥信號通路的影響,揭示其對糖尿病的作用機(jī)制,明確降糖的有效成分,為臨床中抗糖尿病新藥的開發(fā)奠定研究基礎(chǔ)。采用凍干技術(shù)將活體家蠶制成家蠶凍干粉后,經(jīng)由正丁醇和70%乙醇溶液提取,得到正丁醇部位(Silkwormn-butyl alcohol,SB)和 70%乙醇部位(Silkworm ethanol,SA)以0.4mol·L-1H2O2培養(yǎng)MIN6細(xì)胞,制備細(xì)胞損傷模型,MTT法檢測家蠶提取物對MIN6細(xì)胞存活率的影響。與空白對照組比,家蠶提取物能增加正常MIN6細(xì)胞存活率(P<0.05);與模型組比,家蠶提取物能增加H202誘導(dǎo)的MIN6細(xì)胞存活率(P<0.05),表明家蠶提取物具有增強(qiáng)正常MIN6細(xì)胞的活性,促進(jìn)細(xì)胞增殖,對H202誘導(dǎo)的MIN6細(xì)胞損傷有保護(hù)作用,且呈劑量依賴性。以15 mg·100g-1劑量腹腔注射STZ溶液,制備1型糖尿病小鼠模型,取成模小鼠隨機(jī)分為模型組、二甲雙胍組和SA低、中、高劑量組(1... 

【文章來源】:福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】:57 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
Abstract
引言
第一章 家蠶提取物對胰島功能保護(hù)作用研究
    實驗一 家蠶提取物對損傷MIN6細(xì)胞的保護(hù)作用
        1 實驗材料
            1.1 實驗儀器
            1.2 實驗試劑
            1.3 實驗家蠶與細(xì)胞
        2 實驗方法
            2.1 主要溶液配制
            2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3 正常MIN6細(xì)胞活性檢測
2O2)誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷濃度考察">            2.4 過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷濃度考察
            2.5 MIN6細(xì)胞損傷模型活性檢測
            2.6 統(tǒng)計學(xué)分析
        3 實驗結(jié)果
            3.1 SA對正常MIN6細(xì)胞的存活率的影響
            3.2 SB對正常MIN6細(xì)胞存活率的影響
2O2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷濃度的確定">            3.3 H2O2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷濃度的確定
2O2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷保護(hù)作用">            3.4 SA對H2O2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷保護(hù)作用
2O2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷保護(hù)作用">            3.5 SB對H2O2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷保護(hù)作用
        4 小結(jié)與討論
    實驗二 家蠶提取物對小鼠胰島功能的保護(hù)作用
        1 實驗材料
            1.1 實驗儀器
            1.2 實驗試劑
            1.3 實驗動物
        2 實驗方法
            2.1 主要溶液配制
            2.2 模型復(fù)制與評價標(biāo)準(zhǔn)
            2.3 實驗動物分組及處理
            2.4 檢測指標(biāo)
            2.5 統(tǒng)計學(xué)處理
        3 結(jié)果
            3.1 小鼠的一般狀態(tài)
            3.2 SA對糖尿病小鼠體重的影響
            3.3 SA對糖尿病小鼠血糖的影響
            3.4 SA對糖尿病小鼠胰島素的影響
            3.5 對糖尿病小鼠胰島形態(tài)的影響
        4 小結(jié)與討論
第二章 家蠶提取物改善胰島素抵抗作用研究
    1 實驗材料
        1.1 實驗儀器
        1.2 實驗試劑
        1.3 實驗細(xì)胞
    2 實驗方法
        2.1 主要試劑的配制
        2.2 3T3-L1前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
        2.3 油紅O染色
        2.4 胰島素抵抗模型復(fù)制
        2.5 正常脂肪細(xì)胞糖攝取檢測
        2.6 胰島素抵抗模型糖攝取檢測
        2.7 目的蛋白樣品的制備和Western blot測定
        2.8 統(tǒng)計方法
    3 結(jié)果
        3.1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
        3.2 油紅O染色
        3.3 TNF-α誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞胰島素抵抗的濃度考察
        3.4 SA對正常3T3-L1細(xì)胞葡萄糖的影響
        3.5 SA對胰島素抵抗模型糖攝取的影響
        3.6 SA對3T3-L1胰島素抵抗脂肪細(xì)胞IRS-1、p-IRS-1蛋白表達(dá)的影響
        3.7 SA對3T3-L1胰島素抵抗脂肪細(xì)胞Akt、P-Akt蛋白表達(dá)的影響
        3.8 SA對3T3-L1胰島素抵抗脂肪細(xì)胞NF-κB蛋白表達(dá)的影響
    4 小結(jié)與討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2型糖尿病糖尿病痛苦現(xiàn)狀與相關(guān)性研究[J]. 任伶俐,任曉虹,李淼,王雨慧,汪淼芹.  四川醫(yī)學(xué). 2017(10)
[2]降糖類保健食品配方及功效成分研究現(xiàn)狀與展望[J]. 賈福懷,許璐云,王彩霞,袁媛,熊菲菲,雷蕾.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2017(10)
[3]中醫(yī)治療糖尿病臨床研究[J]. 舒湘岑.  亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥. 2017(12)
[4]家蠶突變體相關(guān)研究進(jìn)展[J]. 楊建華,徐安英.  中國蠶業(yè). 2017(02)
[5]家蠶藥用功效及糖尿病臨床應(yīng)用探析[J]. 莊媛,黃亦琦,許光輝,周霈.  海峽藥學(xué). 2017(03)
[6]家蠶幼蟲全蠶粉的營養(yǎng)成分差異性分析[J]. 張友洪,肖文福,黃世群,周安蓮,鄒邦興,肖金樹.  陜西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(03)
[7]2型糖尿病的藥物治療研究進(jìn)展[J]. 徐慶海.  醫(yī)療裝備. 2017(04)
[8]2型糖尿病的胰島β細(xì)胞衰竭新機(jī)制——胰島β細(xì)胞去分化[J]. 譚明紅,魏平.  中國糖尿病雜志. 2017(01)
[9]胰高血糖素樣肽1治療2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的研究進(jìn)展[J]. 劉瑩,項瑩.  中國醫(yī)藥. 2016 (08)
[10]糖尿病的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展[J]. 錢虹,陸銳明.  醫(yī)學(xué)綜述. 2015(13)

博士論文
[1]家蠶表達(dá)的綠色熒光蛋白標(biāo)記的霍亂毒素B亞基與人胰島素融合蛋白抗1型糖尿病的研究[D]. 孟巧紅.浙江大學(xué) 2011
[2]滇桑、蠶沙化學(xué)成分及生物活性的研究[D]. 崔錫強(qiáng).中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2008

碩士論文
[1]Betatrophin對1型糖尿病幼鼠胰島β細(xì)胞的作用及其機(jī)制的研究[D]. 俞燕娟.青島大學(xué) 2016
[2]H2O2誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞氧化應(yīng)激對脫碘酶活性的影響及α-硫辛酸干預(yù)作用的機(jī)制探究[D]. 王菲.江南大學(xué) 2016
[3]桑枝降糖活性成分及協(xié)同作用研究[D]. 張波.西南大學(xué) 2013
[4]蠶蛹活性多肽的制備及降血壓、降血糖活性研究[D]. 張海娜.西南大學(xué) 2013
[5]家蠶表達(dá)CTB-APSL融合蛋白及其抗2型糖尿病的研究[D]. 劉云龍.浙江理工大學(xué) 2012
[6]全蠶粉及復(fù)方全蠶粉膠囊對2型糖尿病大鼠胰島素抵抗和信號通路的影響[D]. 曹育.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2011
[7]蠶沙總黃酮的提取工藝研究[D]. 張紅俊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[8]全蠶粉DNJ含量與降血糖效果的關(guān)系及富集DNJ動植物資源的研究[D]. 孫波.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號:2908661

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