發(fā)布時(shí)間：2020-12-08 11:13

　　蕨類植物在中草藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。一段時(shí)期以來(lái),全球各地對(duì)新藥的開發(fā)工作越來(lái)越得到眾人的重視,對(duì)藥用蕨類植物更是青睞有加。在眾多的蕨類植物中,猴腿蹄蓋蕨作為生長(zhǎng)在長(zhǎng)白山地區(qū)的中草藥,是能夠同時(shí)滿足藥用和食用兩方面需求的重要蕨類植物。相關(guān)研究顯示,該種藥用蕨類植物能夠起到抗氧化以及抑制細(xì)菌增長(zhǎng)等作用,然而國(guó)內(nèi)外尚無(wú)有關(guān)蕨類植物-猴腿蹄蓋蕨抗炎作用及其機(jī)制的系統(tǒng)研究。本文為探討猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對(duì)LPS刺激誘導(dǎo)的小鼠肺損傷的抗炎功效和對(duì)LPS刺激的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的影響,借助信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路平臺(tái),探析其對(duì)相關(guān)的關(guān)鍵蛋白分子以及炎性因子蛋白表達(dá)的作用,研究猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對(duì)小鼠體內(nèi)外抗炎作用,對(duì)猴腿蹄蓋蕨的抗炎免疫功效給出科學(xué)合理的解釋,為猴腿蹄蓋蕨的開發(fā)與利用提供可靠的理論參考。本文采用MTT方法,深入分析猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的毒害影響;借助ELISA方法,探討猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對(duì)LPS引發(fā)的TNF-α以及IL-6分泌情況的作用;結(jié)合Western blot方法,研究炎癥信號(hào)通路中相關(guān)的關(guān)鍵蛋白分子的影響。通過(guò)仔細(xì)的研究發(fā)現(xiàn):當(dāng)猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物的濃度處于0-200.0... 

【文章來(lái)源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２．?ＡＭ提取物對(duì)于經(jīng)ＬＰＳ所刺激之后的ＮＯ小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分泌的具體??影響??

的ＰＧＥ２究竟有無(wú)相應(yīng)的抑制作用加以明確，使用ＬＰＳ刺激細(xì)胞并用不同濃度??ＡＭ提取物分別處理細(xì)胞２４?ｈ，采納ＥＬＩＳＡ法來(lái)針對(duì)細(xì)胞上清液之中所具的??ＰＧＥ２含量加以檢測(cè)，詳情見(jiàn)圖３。一經(jīng)ＬＰＳ的具體處理之后，在細(xì)胞上清液之??中的ＰＧＥ２其具體含量顯著攀升（６０ｐｇ／ｍＬ），在己被ＡＭ提取物經(jīng)正式處理之??后，其實(shí)際含量顯見(jiàn)地降低且具特定程度的濃度依賴性，ＰＧＥ２受到來(lái)自于最高??劑量組之中的ＡＭ提取物所施以的抑制，而此抑制率具體達(dá)５９％。??８０－．??ｌｌｉｌｌ??ＬＰＳ?（０．１?＾ｉｇ／ｍＬ）?－?＋?？?＋?＋?＋??ＡＭ?（＾ｉｇ／ｍＬ）?０?０?１００?２５?５０?１００??圖３．經(jīng)ＬＰＳ的刺激之后小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的ＰＧＥ２分泌受ＡＭ提取物的影響的??不意圖??注：和?ｌｐｓ?組加以比較，＊＊＊／７＜０．洲／??Ｆｉｇ?３．?Ａｔｈｙｒｉｕｍ?ｍｕｌｔｉｄｅｎｔａｔｕｍ?ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ?ｔｈｅ?ｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆ?ＰＧＥ２ｉｎ?ＬＰＳ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ?ｍｏｕ??ｅ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ??Ｎｏｔｅ：?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?ｇｒｏｕｐ，?＊ｐ＜０．０５ｙ?＊＊ｐ＜０．０１，?＊＊＊ｐ＜０．００１??３．２．２ＡＭ提取物對(duì)ＬＰＳ刺激誘導(dǎo)ｉＮＯＳ、ＣＯＸ－２蛋白表達(dá)的影??響??見(jiàn)下圖（圖４）可知，較之于正常的細(xì)胞來(lái)講，ＬＰＳ給了?ＰＭ細(xì)胞以特定的??刺激后這顯見(jiàn)地加大了?ｉＮＯＳ的分泌量，并且對(duì)細(xì)胞的總的活力并未有影響。但??是用ＡＭ提取物加以處理之后

Ｎｏｔｅ：＊ｐ＜０．０５，?０１，?＾＾＜０．００１??３．３．２人１＾提取物對(duì)￡１１１＜：、卩－￡１１１＜蛋白表達(dá)的影響??如圖９所示，經(jīng)ＬＰＳ誘導(dǎo)后，ＰＭ細(xì)胞的ＥＲＫ磷酸化明顯增加。但是經(jīng)ＡＭ??提取物的事先預(yù)處理之后，相較與單純的ＬＰＳ組而言，這種ＥＲＫ磷酸化水平明??顯增加的現(xiàn)象發(fā)生顯見(jiàn)地減弱，并且還表現(xiàn)出一定程度的劑量依賴性。所說(shuō)明的??是ＡＭ提取物對(duì)ＬＰＳ效應(yīng)中的ＥＲＫ途徑有抑制作用。Ｉｍａｇｅｎ?Ｊ軟件分析結(jié)果也??提示，ＡＭ在抑制ＬＰＳ的至炎作用中，對(duì)ｐ－ＥＲＫ蛋白的表達(dá)抑制作用在高劑量??組甚至可以達(dá)到６５％。??４６??

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