龍膽瀉肝湯氯仿提取物對(duì)白念珠菌VVC臨床株侵襲力的干預(yù)作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-06 00:56
目的:探討龍膽瀉肝湯氯仿提取物對(duì)白念珠菌VVC臨床株侵襲力的干預(yù)作用及機(jī)制方法:1.龍膽瀉肝湯不同極性部位的提取:80%的乙醇水溶液冷凝回流提取龍膽瀉肝湯總成分后,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,并將相應(yīng)的提取液旋轉(zhuǎn)蒸干得到固體粉末,得到龍膽瀉肝湯不同極性部位的提取物。2.通過(guò)比較提取物對(duì)15株白念珠菌VVC臨床株最小抑菌濃度的比較,確定龍膽瀉肝湯的有效提取部位。3.體內(nèi)實(shí)驗(yàn):成功構(gòu)建小鼠外陰陰道念珠病(VVC)模型后,分別給予(20、32、64)mg/kg龍膽瀉肝湯氯仿提取物(chloroform extracts of Longdan xiegan decoction,CELX)進(jìn)行灌胃治療,氟康唑陽(yáng)性藥治療組以20 mg/kg灌胃,正常組和模型組生理鹽水灌胃,連續(xù)治療7天后,觀察小鼠臨床表現(xiàn)、真菌鏡檢、真菌載荷量測(cè)定以及組織病理學(xué)檢查4.體外實(shí)驗(yàn):(1)藥物CELX干預(yù)后,觀察固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基中菌落形態(tài)及菌絲侵襲能力、熒光顯微鏡下菌絲代謝活力、掃描電鏡下菌絲形態(tài);XTT還原法評(píng)價(jià)白念珠菌菌絲活性;平板法計(jì)數(shù)6h內(nèi)藥物對(duì)白念珠菌CFU的影響;實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q...
【文章來(lái)源】:安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
CELX干預(yù)下小鼠陰道灌洗液中白念珠菌CFU的變化
19圖 2 CELX 干預(yù)下 VVC 小鼠陰道灌洗液中白念珠菌形態(tài)變化(×200)Fig.2 Morphological changes of Candida albicans in vaginal lavage fluid of VVC miwith CELX interventionA:正常對(duì)照組;B:VVC 模型組;C:20mg/kg CELX 治療組;D:32mg/kg CEL治療組; E:64mg/kg CELX 治療組; F:氟康唑陽(yáng)性藥治療組3.4 VVC 小鼠陰道組織病理學(xué)檢查VVC 小鼠陰道組織經(jīng)過(guò) HE 染色后顯微鏡下拍照得不同組別的病理圖片,下圖 3。圖 A 正常對(duì)照組中小鼠陰道黏膜結(jié)構(gòu)完整并覆蓋于排列緊密的陰道扁
第二部分 龍膽瀉肝湯氯仿提取物對(duì)外陰陰道念珠菌病治療作用的研究皮細(xì)胞上;圖 B 模型組中小鼠陰道上皮組織破壞嚴(yán)重,陰道黏膜層幾乎被膜層覆蓋下的陰道復(fù)層扁平上皮受到破壞并形成孔洞,結(jié)締組織出現(xiàn)炎癥 C 低劑量 CELX 治療組中陰道黏膜層依然嚴(yán)重被侵蝕,陰道扁平上皮及中炎癥水腫較模型組有所改善;圖 D 中劑量 CELX 治療組中陰道復(fù)層扁及結(jié)締組織未見明顯破壞,僅僅黏膜層受到中度損傷。圖 E 高劑量 CEL中與圖 F 氟康唑陽(yáng)性藥組治療效果類似,復(fù)層扁平上皮以及結(jié)締組織均壞且最易受到損傷的陰道黏膜層均恢復(fù)至空白組水平。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]龍膽瀉肝湯聯(lián)合克霉唑栓治療外陰陰道假絲酵母菌感染50例[J]. 曹俏春. 中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育. 2015(08)
[2]龍膽瀉肝湯聯(lián)合克霉唑栓治療濕熱型復(fù)發(fā)性外陰陰道假絲酵母菌病臨床觀察[J]. 邱優(yōu)麗,楊慧珍. 新中醫(yī). 2015(02)
[3]龍膽瀉肝湯加減治療濕熱型室女外陰陰道念珠菌病78例[J]. 賴雙玲,馬嫻. 北京中醫(yī)藥. 2014(08)
[4]龍膽瀉肝湯不同提取部位對(duì)白念珠菌生物膜的抑制作用研究[J]. 俞麗華,陸克喬,施高翔,嚴(yán)園園,何亮,邵菁,汪天明,汪長(zhǎng)中. 中國(guó)中藥雜志. 2014(07)
[5]龍膽瀉肝湯治療婦科疾病的應(yīng)用[J]. 鄭玲,謝靳. 陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(02)
[6]龍膽瀉肝湯配合西藥治療老年性陰道炎[J]. 江曉婧. 內(nèi)蒙古中醫(yī)藥. 2014(02)
[7]龍膽瀉肝顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 劉穎,胡琴,陶志國(guó). 中成藥. 2013(12)
[8]外陰陰道念珠菌病致病機(jī)制及中藥治療研究[J]. 王慧,徐春燕,左文,葛艷. 中國(guó)醫(yī)藥指南. 2012(36)
[9]白念珠菌致病相關(guān)的水解酶[J]. 馬虎,崔凡,林昭春. 中國(guó)真菌學(xué)雜志. 2012(04)
[10]HPLC同時(shí)測(cè)定龍膽瀉肝制劑中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量[J]. 李春紅,梅志強(qiáng),何兵,田吉. 生物學(xué)通報(bào). 2012(04)
本文編號(hào):2900409
【文章來(lái)源】:安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
CELX干預(yù)下小鼠陰道灌洗液中白念珠菌CFU的變化
19圖 2 CELX 干預(yù)下 VVC 小鼠陰道灌洗液中白念珠菌形態(tài)變化(×200)Fig.2 Morphological changes of Candida albicans in vaginal lavage fluid of VVC miwith CELX interventionA:正常對(duì)照組;B:VVC 模型組;C:20mg/kg CELX 治療組;D:32mg/kg CEL治療組; E:64mg/kg CELX 治療組; F:氟康唑陽(yáng)性藥治療組3.4 VVC 小鼠陰道組織病理學(xué)檢查VVC 小鼠陰道組織經(jīng)過(guò) HE 染色后顯微鏡下拍照得不同組別的病理圖片,下圖 3。圖 A 正常對(duì)照組中小鼠陰道黏膜結(jié)構(gòu)完整并覆蓋于排列緊密的陰道扁
第二部分 龍膽瀉肝湯氯仿提取物對(duì)外陰陰道念珠菌病治療作用的研究皮細(xì)胞上;圖 B 模型組中小鼠陰道上皮組織破壞嚴(yán)重,陰道黏膜層幾乎被膜層覆蓋下的陰道復(fù)層扁平上皮受到破壞并形成孔洞,結(jié)締組織出現(xiàn)炎癥 C 低劑量 CELX 治療組中陰道黏膜層依然嚴(yán)重被侵蝕,陰道扁平上皮及中炎癥水腫較模型組有所改善;圖 D 中劑量 CELX 治療組中陰道復(fù)層扁及結(jié)締組織未見明顯破壞,僅僅黏膜層受到中度損傷。圖 E 高劑量 CEL中與圖 F 氟康唑陽(yáng)性藥組治療效果類似,復(fù)層扁平上皮以及結(jié)締組織均壞且最易受到損傷的陰道黏膜層均恢復(fù)至空白組水平。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]龍膽瀉肝湯聯(lián)合克霉唑栓治療外陰陰道假絲酵母菌感染50例[J]. 曹俏春. 中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育. 2015(08)
[2]龍膽瀉肝湯聯(lián)合克霉唑栓治療濕熱型復(fù)發(fā)性外陰陰道假絲酵母菌病臨床觀察[J]. 邱優(yōu)麗,楊慧珍. 新中醫(yī). 2015(02)
[3]龍膽瀉肝湯加減治療濕熱型室女外陰陰道念珠菌病78例[J]. 賴雙玲,馬嫻. 北京中醫(yī)藥. 2014(08)
[4]龍膽瀉肝湯不同提取部位對(duì)白念珠菌生物膜的抑制作用研究[J]. 俞麗華,陸克喬,施高翔,嚴(yán)園園,何亮,邵菁,汪天明,汪長(zhǎng)中. 中國(guó)中藥雜志. 2014(07)
[5]龍膽瀉肝湯治療婦科疾病的應(yīng)用[J]. 鄭玲,謝靳. 陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(02)
[6]龍膽瀉肝湯配合西藥治療老年性陰道炎[J]. 江曉婧. 內(nèi)蒙古中醫(yī)藥. 2014(02)
[7]龍膽瀉肝顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 劉穎,胡琴,陶志國(guó). 中成藥. 2013(12)
[8]外陰陰道念珠菌病致病機(jī)制及中藥治療研究[J]. 王慧,徐春燕,左文,葛艷. 中國(guó)醫(yī)藥指南. 2012(36)
[9]白念珠菌致病相關(guān)的水解酶[J]. 馬虎,崔凡,林昭春. 中國(guó)真菌學(xué)雜志. 2012(04)
[10]HPLC同時(shí)測(cè)定龍膽瀉肝制劑中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量[J]. 李春紅,梅志強(qiáng),何兵,田吉. 生物學(xué)通報(bào). 2012(04)
本文編號(hào):2900409
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