發(fā)布時(shí)間：2020-12-06 00:45

　　目的觀察溫陽(yáng)通脈方含藥血清是否通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑保護(hù)心肌細(xì)胞,減輕缺氧/復(fù)氧損傷,抑制心肌細(xì)胞凋亡。方法取33只SD大鼠,隨機(jī)分四組:空白對(duì)照組（15只）;低、中、高劑量溫陽(yáng)通脈方組（各6只）。用生理鹽水和3.24g/kg、6.48g/kg、12.96g/kg劑量的溫陽(yáng)通脈方藥物給大鼠灌胃3天后,頸總動(dòng)脈取血制備空白血清和溫陽(yáng)通脈方含藥血清。將H9C2心肌細(xì)胞分為5組:空白血清對(duì)照組,模型組,低、中、高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組。通過化學(xué)性缺氧劑（CoCl₂）作用于H9C2心肌細(xì)胞22h建立缺氧模型,然后更換新鮮培養(yǎng)基處理2h建立復(fù)氧模型的方法建立缺氧/復(fù)氧模型,四甲基偶氮唑鹽法（MTT）測(cè)得最佳血清添加量（20%）和缺氧/復(fù)氧時(shí)最佳CoCl₂濃度（600μM）。空白血清對(duì)照組和模型組加入20%空白血清,低、中、高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組分別加入20%低、中、高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清。用MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞存活率;比色法檢測(cè)各組半胱氨酸蛋白酶3（Caspase3）酶活性和上清液中乳酸脫氫酶（LDH）活性;Hoechst33342熒光染色觀察各組... 

【文章來(lái)源】：錦州醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

缺氧/復(fù)氧時(shí)不同CoCl2濃度對(duì)H9C2細(xì)胞存活率的影響（x±s，n=5）

圖 1 缺氧/復(fù)氧時(shí)不同 CoCl2濃度對(duì) H9C2 細(xì)胞存活率的影響（ x±s，n=5）注：與空白對(duì)照組（0μM）相比，*P＜0.05，**P＜0.01三、MTT 測(cè)各組細(xì)胞存活率與空白血清對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞存活率顯著降低（P<0.01）；與模型組相比，低、中、高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組細(xì)胞存活率均有明顯改善（均為P<0.01）；與低劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組相比，中、高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組細(xì)胞存活率均有不同程度的改善（分別為 P<0.05、P<0.01）；與中劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組比，高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組細(xì)胞存活率更佳（P<0.05）。（圖 2）

四、各組細(xì)胞上清液中 LDH 活性與空白血清對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞上清液中 LDH 活性顯著升高（P<0.01）；與模型組相比，低、中、高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組 LDH 活性均明顯降低（均為 P<0.01）；與低劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組相比，中、高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組 LDH 活性均有不同程度的降低（分別為 P<0.05、P<0.01）；與中劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組相比，高劑量溫陽(yáng)通脈方含藥血清組 LDH 活性更低（P<0.05）。（圖 3）


本文編號(hào)：2900394