胰島素抵抗是由于胰島β細(xì)胞所分泌的胰島素不能發(fā)揮正常作用而引起的代謝紊亂。胰島素信號通路是調(diào)節(jié)胰島素代謝的直接途徑。研究表明,通過自噬清除受損的細(xì)胞器以及錯誤折疊的蛋白質(zhì)等,對調(diào)節(jié)β細(xì)胞的數(shù)量及結(jié)構(gòu)起到關(guān)鍵性作用。因此,由于饑餓應(yīng)激條件下造成的代謝紊亂以及細(xì)胞自噬之間的關(guān)系成為研究熱點(diǎn)。果蠅的胰島素信號通路通過營養(yǎng)條件調(diào)控細(xì)胞的增殖與生長,并最終實(shí)現(xiàn)細(xì)胞代謝和細(xì)胞大小的相互統(tǒng)一,營養(yǎng)均衡吸收會促進(jìn)合成代謝、細(xì)胞生長、細(xì)胞循環(huán);反之,饑餓則會引起相反的作用。中藥具有來源廣泛、歷史悠久、作用范圍較大、價格較低廉等優(yōu)點(diǎn)。為了探究中藥對饑餓誘導(dǎo)的果蠅胰島素信號的影響,本實(shí)驗(yàn)通過對果蠅的爬行能力、生長速度以及饑餓生存率分析,從150種中藥中篩選了五味子、元胡、茵陳、竹茹、降香、菖蒲、杜仲、山慈菇、女貞子、白鮮皮10種效果明顯的中藥。為了進(jìn)一步探究這10種中藥對胰島素信號通路以及細(xì)胞自噬的影響,分析了喂食中藥后饑餓條件下的脂滴大小、細(xì)胞核面積、p62的積累水平、mCherry-Atg8a的表達(dá)量、PH3+細(xì)胞數(shù)量以及Chico~1/CyO、Akt1/Q/TM3.Sb兩種胰島素通路突變體的生存率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在饑餓誘導(dǎo)的條件下,五味子、元胡、茵陳、降香、竹茹、菖蒲能夠顯著增加脂肪油滴面積;五味子、元胡、茵陳、竹茹、降香、菖蒲、山慈菇、白鮮皮增加p62的積累并降低mCherry-Atg8a表達(dá)量;五味子、元胡、茵陳、竹茹、杜仲增加PH3陽性細(xì)胞的數(shù)量。另外,五味子、元胡、茵陳、降香、竹茹、菖蒲、杜仲、山慈菇、女貞子、白鮮皮能夠顯著提高Chico~1/CyO和Akt_1Q/TM3.Sb胰島素通路突變體果蠅饑餓后的生存率。因此,我們篩選的10種中藥在一定程度上能夠緩解饑餓誘導(dǎo)果蠅的胰島素代謝紊亂和細(xì)胞自噬的影響,此結(jié)果能夠?yàn)橹兴幍木C合開發(fā)與利用提供理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

草、白蘞、艾葉、郁金、海金沙、地骨皮、白茅根、仙鶴草、夏枯草、枸杞子、紫苑、??紫花地丁、荔枝核、遠(yuǎn)志、玉竹、訶子、黃芩、薤白、桂枝、百部、黃連、馬齒莧、決??明子、敗醬草、白花蛇舌草、通草、桃仁、玄參（圖３－１）。??Ａ??１００?，…??▲?＊?▲?■對照??絜?８０．?＾?，，?Ａ?－?＾——，▲中藥??Ｓ６０／?ｄ，?＊．＊?４?＊?、七‘??爿?▲、?Ｖ?‘?＊?▲?▲??益?４０?＊?＊?＊?＊?４?＼??Ｓ?？?＂?▲?▲?＊??２０?＊?＊?▲?▲??＿?▲?▲??０????????１?＊?４??０?３０?６０?９０?１２０?１５０??中藥編號??圖３－１?１５０種中藥對果蠅的爬行能力的影響??Ｆｉｇ．３－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?１５０?ｋｉｎｄｓ?ｏｆ?Ｃｈｉｎｅｓｅ?ｈｅｒｂａｌ?ｏｎ?ｃｌｉｍｂｉｎｇ?ａｂｉｌｉｔｙ．??３．２對生存率的影響??野生型果蠅ｗ／／／ｓ分別喂食１５０種中藥，羽化后的果蠅進(jìn)行饑餓處理，分別檢測饑??餓后果蠅的生存率。對照組果蠅饑餓６４ｈ后的生存率大約是１０％

照組早２４ｈ－４８ｈ的中藥共有２１種，分別是杜仲、元胡、女貞子、降香、瞿麥、紅花、??連翹、厚樸、地骨皮、桃仁、菟絲子、豆蔻、何首烏、生地、荊芥、草烏、龍膽草、豬??苓、土茯苓、蒲公英、川牛膝（圖３－３）。??－１１－??

此為進(jìn)一步探索在饑餓條件下脂肪體中脂肪的積累情況以及喂食中藥后對機(jī)體脂肪的貯??存的影響，本實(shí)驗(yàn)對果蠅的三齡幼蟲的脂肪油滴面積進(jìn)行了?ＢＯＤＩＰＹ染色分析。??結(jié)果如圖３－４?（Ａ－Ａ”）所示，在ｍ／＾果蠅喂食正常培養(yǎng)基的條件下，與饑餓Ｏｈ相??比較，饑餓２４ｈ后，脂肪油滴幾乎沒有變化（Ｐ＞（？．０５）；和正常喂食和饑餓２４ｈ相比，??在饑餓４８ｈ后，脂肪油滴面積顯著減�。常常矗�。結(jié)果表明：在饑餓時間延長的情況下，??機(jī)體會消耗體內(nèi)的脂肪來維持自身的穩(wěn)態(tài)。??結(jié)果如圖３－４?（Ａ－Ｋ）所示，與饑餓０ｈ、喂食正常培養(yǎng)基相比，喂食五味子后脂肪??油滴面積顯著增加５９．６％?洲／），竹茹稍有增加１３．４％?（戶＜０．〇７），喂食白鮮皮后??脂肪油滴面積顯著減�。矗埃福常�?杜仲、山慈菇稍微減�。ǎ校迹裕埃�，其余??中藥沒有顯著變化（Ｚ５＞０．０５）；結(jié)果如圖３－４?（Ａ＇－Ｋ＇）所示，與對照組饑餓２４ｈ相比，??喂食五味子、茵陳后脂肪油滴面積顯著增加４３．１％、３２．３％，喂食白鮮皮后脂肪油滴面??積顯著減小４０．８２％
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 李朝暉;馬曉鸝;吳萬征;;枸杞多糖降血糖作用的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究[J];中藥材;2012年01期

2 李穎;于鋒;戴德哉;戴茵;;糖尿病加重中風(fēng)的可能機(jī)制及相關(guān)藥物作用靶點(diǎn)[J];藥學(xué)進(jìn)展;2010年10期

3 竇存芳;;糖尿病初發(fā)急性心肌梗死發(fā)病特點(diǎn)分析[J];中國誤診學(xué)雜志;2010年02期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 肖夢云;自噬在糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞損傷中的作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

本文編號：2889069