宮頸癌不僅是全球第四大常見的惡性腫瘤,而且是女性癌癥死亡的主要原因之一。許多欠發(fā)達(dá)國(guó)家宮頸癌的3年至5年生存率50%。雖然化療或新輔助化療已用于宮頸癌治療,但化療對(duì)人體的毒性和耐藥性是顯而易見的。長(zhǎng)期以來(lái),人們已經(jīng)確定來(lái)自食用和藥用真菌的抗氧化劑和其他活性化合物可能有助于預(yù)防癌癥,來(lái)自食用和藥用真菌的天然化合物可被視為宮頸癌治療中的補(bǔ)充藥物。近年來(lái),部分蘑菇屬的新品種被不斷發(fā)現(xiàn)和報(bào)道,中國(guó)美味蘑菇(Agaricus sinodeliciosus)是蘑菇屬中近年來(lái)報(bào)道的一個(gè)新物種,是一種體型巨大的蘑菇,且已馴化栽培成功,若能從中找到抗腫瘤的活性物質(zhì),則可以在很大程度上解決藥物原材料不足的問題。本研究的實(shí)驗(yàn)材料是采集于新疆的一種個(gè)體巨大的野生蘑菇-“中國(guó)美味蘑菇”。本文首先以中國(guó)美味蘑菇菌絲體為研究材料,對(duì)中國(guó)美味蘑菇菌絲體生物學(xué)特性,馴化栽培以及營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行研究;其次,以中國(guó)美味蘑菇野生子實(shí)體的粗提物為材料,通過細(xì)胞遷移、克隆、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、ROS的釋放、PARP的表達(dá)以及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)等檢測(cè)來(lái)評(píng)價(jià)石油醚提取物和氯仿提取物的抗宮頸癌Hela細(xì)胞活性,并進(jìn)一步探究中國(guó)美味蘑菇提取物作用機(jī)制,研究發(fā)現(xiàn)中國(guó)美味蘑菇野生子實(shí)體的提取物對(duì)Hela細(xì)胞有較好的抑制作用。然而,中國(guó)美味蘑菇提取物是混合物,具有許多成分不明的活性物質(zhì),且發(fā)揮主要活性作用單體物質(zhì)很難找到。因此,后續(xù)對(duì)石油醚提取物進(jìn)行分離鑒定,并從中分離得到一種單體化合物麥角甾醇,并對(duì)其進(jìn)行抗宮頸癌活性評(píng)價(jià)。主要結(jié)果如下:1.葡萄糖為中國(guó)美味蘑菇菌絲生長(zhǎng)的最適碳源,大豆蛋白胨為中國(guó)美味蘑菇菌絲生長(zhǎng)最適的氮源;而最適合中國(guó)美味蘑菇菌絲生長(zhǎng)的溫度是25℃,中國(guó)美味蘑菇菌絲生長(zhǎng)最適pH值為6。初步馴化顯示,蘆葦栽培基質(zhì)第一潮菇平均每棒產(chǎn)量為0.245kg,生物學(xué)效率達(dá)38.5%;中國(guó)美味蘑菇不僅高蛋白質(zhì)、低脂肪,膳食纖維和礦物質(zhì)豐富,還具有較高的保健價(jià)值,是一種不可多得的藥食兩用菌。2.石油醚提取物和氯仿提取物均能抑制Hela細(xì)胞的遷移,克隆形成,細(xì)胞的增值,促進(jìn)細(xì)胞凋亡并且可促進(jìn)PARP蛋白表達(dá)和ROS釋放。其抑制宮頸癌Hela細(xì)胞增殖的作用機(jī)制主要是通過上調(diào)Bax,Bad,P53,AIF和cleaved-caspase-3蛋白的表達(dá)和下調(diào)Bcl2,pro-capase-3蛋白的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。3.采用HPLC和NMR方法,來(lái)鑒定中國(guó)美味蘑菇石油醚提取物和氯仿提取物中起抗腫瘤作用的活性成分。經(jīng)鑒定石油醚提取物中的組分A為麥角甾醇。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)表明石油醚提取物和麥角甾醇對(duì)Hela細(xì)胞均具有很強(qiáng)的抑制作用,并且石油醚提取物對(duì)Hela細(xì)胞的抑制作用大于麥角甾醇。本研究掌握了中國(guó)美味蘑菇的生物學(xué)特性,并且將其馴化栽培成功;同時(shí)對(duì)中國(guó)美味蘑菇野生子實(shí)體提取物進(jìn)行抗腫瘤活性研究,發(fā)現(xiàn)石油醚提取物和氯仿提取物對(duì)Hela有較好的抑制作用,其作用機(jī)制主要是通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡來(lái)調(diào)控的。從石油醚提取物中分離鑒定出一種活性物質(zhì)為麥角甾醇,并且麥角甾醇也可以抑制Hela細(xì)胞增值。由此可見,此研究可為中國(guó)美味蘑菇今后商業(yè)化栽培提供科學(xué)依據(jù),并為中國(guó)美味蘑菇提取物抗腫瘤活性研究提供了理論依據(jù),中國(guó)美味蘑菇活性成分有可能發(fā)展成為潛在的抗宮頸癌治療的化療藥物。
【學(xué)位單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S646.11;R285
【部分圖文】：

不同溫度對(duì)中國(guó)美味蘑菇菌絲體形態(tài)特征影響

不同pH對(duì)中國(guó)美味蘑菇菌絲體形態(tài)特征影響

不同碳源培養(yǎng)基上中國(guó)美味蘑菇菌落形態(tài)特征
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2888628