中國美味蘑菇馴化栽培及抗宮頸癌活性研究

發(fā)布時間：2020-11-18 10:42

　　宮頸癌不僅是全球第四大常見的惡性腫瘤,而且是女性癌癥死亡的主要原因之一。許多欠發(fā)達國家宮頸癌的3年至5年生存率50%。雖然化療或新輔助化療已用于宮頸癌治療,但化療對人體的毒性和耐藥性是顯而易見的。長期以來,人們已經確定來自食用和藥用真菌的抗氧化劑和其他活性化合物可能有助于預防癌癥,來自食用和藥用真菌的天然化合物可被視為宮頸癌治療中的補充藥物。近年來,部分蘑菇屬的新品種被不斷發(fā)現(xiàn)和報道,中國美味蘑菇(Agaricus sinodeliciosus)是蘑菇屬中近年來報道的一個新物種,是一種體型巨大的蘑菇,且已馴化栽培成功,若能從中找到抗腫瘤的活性物質,則可以在很大程度上解決藥物原材料不足的問題。本研究的實驗材料是采集于新疆的一種個體巨大的野生蘑菇-“中國美味蘑菇”。本文首先以中國美味蘑菇菌絲體為研究材料,對中國美味蘑菇菌絲體生物學特性,馴化栽培以及營養(yǎng)成分進行研究;其次,以中國美味蘑菇野生子實體的粗提物為材料,通過細胞遷移、克隆、細胞增殖、細胞凋亡、ROS的釋放、PARP的表達以及凋亡相關蛋白的表達等檢測來評價石油醚提取物和氯仿提取物的抗宮頸癌Hela細胞活性,并進一步探究中國美味蘑菇提取物作用機制,研究發(fā)現(xiàn)中國美味蘑菇野生子實體的提取物對Hela細胞有較好的抑制作用。然而,中國美味蘑菇提取物是混合物,具有許多成分不明的活性物質,且發(fā)揮主要活性作用單體物質很難找到。因此,后續(xù)對石油醚提取物進行分離鑒定,并從中分離得到一種單體化合物麥角甾醇,并對其進行抗宮頸癌活性評價。主要結果如下:1.葡萄糖為中國美味蘑菇菌絲生長的最適碳源,大豆蛋白胨為中國美味蘑菇菌絲生長最適的氮源;而最適合中國美味蘑菇菌絲生長的溫度是25℃,中國美味蘑菇菌絲生長最適pH值為6。初步馴化顯示,蘆葦栽培基質第一潮菇平均每棒產量為0.245kg,生物學效率達38.5%;中國美味蘑菇不僅高蛋白質、低脂肪,膳食纖維和礦物質豐富,還具有較高的保健價值,是一種不可多得的藥食兩用菌。2.石油醚提取物和氯仿提取物均能抑制Hela細胞的遷移,克隆形成,細胞的增值,促進細胞凋亡并且可促進PARP蛋白表達和ROS釋放。其抑制宮頸癌Hela細胞增殖的作用機制主要是通過上調Bax,Bad,P53,AIF和cleaved-caspase-3蛋白的表達和下調Bcl2,pro-capase-3蛋白的表達來實現(xiàn)的。3.采用HPLC和NMR方法,來鑒定中國美味蘑菇石油醚提取物和氯仿提取物中起抗腫瘤作用的活性成分。經鑒定石油醚提取物中的組分A為麥角甾醇。細胞增殖實驗表明石油醚提取物和麥角甾醇對Hela細胞均具有很強的抑制作用,并且石油醚提取物對Hela細胞的抑制作用大于麥角甾醇。本研究掌握了中國美味蘑菇的生物學特性,并且將其馴化栽培成功;同時對中國美味蘑菇野生子實體提取物進行抗腫瘤活性研究,發(fā)現(xiàn)石油醚提取物和氯仿提取物對Hela有較好的抑制作用,其作用機制主要是通過促進細胞凋亡來調控的。從石油醚提取物中分離鑒定出一種活性物質為麥角甾醇,并且麥角甾醇也可以抑制Hela細胞增值。由此可見,此研究可為中國美味蘑菇今后商業(yè)化栽培提供科學依據(jù),并為中國美味蘑菇提取物抗腫瘤活性研究提供了理論依據(jù),中國美味蘑菇活性成分有可能發(fā)展成為潛在的抗宮頸癌治療的化療藥物。
【學位單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：S646.11;R285
【部分圖文】：

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