根據(jù)中醫(yī)辨證,功能性消化不良(FD)多由肝胃不和引起。柴胡疏肝散作為調(diào)和肝脾的經(jīng)典方代表之一,在臨床中常用于治療功能性消化不良,方中陳皮枳殼藥對(duì)因其理氣健脾功效,在治療功能性消化不良時(shí)起到重要作用,再配上疏肝解郁的柴胡,共同起到調(diào)和肝脾的作用。如何用現(xiàn)代語(yǔ)言解釋其配伍的科學(xué)內(nèi)涵及作用機(jī)制?這是本論文的出發(fā)點(diǎn)。目的:(1)復(fù)制與臨床癥狀相似的FD小鼠模型,并進(jìn)行模型評(píng)價(jià)。(2)對(duì)比陳皮枳殼藥對(duì)和陳皮枳殼藥對(duì)配伍柴胡對(duì)FD小鼠的作用效果。(3)研究陳皮枳殼藥對(duì)配伍柴胡后胃動(dòng)力增強(qiáng)與Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)的關(guān)系。(4)研究陳皮枳殼藥對(duì)配伍柴胡后胃動(dòng)力增強(qiáng)與5-HT系統(tǒng)的關(guān)系。(5)研究陳皮枳殼藥對(duì)配伍柴胡后通過(guò)5-HT系統(tǒng)促進(jìn)胃動(dòng)力的作用機(jī)制。方法:(1)采用三聯(lián)一復(fù)合應(yīng)激法復(fù)制FD小鼠模型,具體操作為每天給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物束縛6h、過(guò)度疲勞游泳、電擊三種固定刺激并隨機(jī)結(jié)合慢性不可預(yù)知刺激中的一種刺激,造模30天。造模期間定期記錄體重、日均進(jìn)食量和飲水量、糖水偏好百分率以及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)行為學(xué)活動(dòng)評(píng)分,造模結(jié)束后采用苯酚紅法測(cè)定兩組小鼠胃殘留率和小腸推進(jìn)率,用酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)血清中p物質(zhì)(SP)和胃動(dòng)素(MTL)含量,采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肝、胃、結(jié)腸組織作病理切片分析。(2)造模30天后對(duì)FD小鼠灌胃給藥,連續(xù)給藥12天,給藥組分為陳皮枳殼藥對(duì)組(CZ組)和陳皮枳殼藥對(duì)配伍柴胡組(CCZ組)。給藥結(jié)束后,測(cè)量小鼠體重、日均進(jìn)食量和飲水量,進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),測(cè)定胃殘留率,檢測(cè)血清中p物質(zhì)(SP)和胃動(dòng)素(MTL)含量。(3)以GAPDH作為內(nèi)參對(duì)照,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和Westren Blot法測(cè)定胃竇組織中c-kit的基因和蛋白表達(dá)水平。(4)以GAPDH作為內(nèi)參對(duì)照,用酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)血清和腦組織中5-HT含量,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和Westren Blot法測(cè)定十二指腸中5-HT_4R的基因和蛋白表達(dá)水平。(5)通過(guò)血清藥理學(xué)方法分別制備CZ組和CCZ組的含藥血清,采用酶解法提取分離、純化大鼠胃竇平滑肌細(xì)胞,細(xì)胞免疫熒光技術(shù)鑒定平滑肌細(xì)胞,采用CCK-8法繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn)和測(cè)定各組含藥血清對(duì)平滑肌細(xì)胞的影響的活性。應(yīng)用Fluo-3-am作為Ca~(2+)熒光探針,激光共聚焦顯微鏡技術(shù)測(cè)定各組平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)熒光強(qiáng)度的變化。結(jié)果:(1)與正常組小鼠比較,本實(shí)驗(yàn)建立的FD小鼠體重降低、日均進(jìn)食量和飲水量下降、糖水偏好百分率和自主活動(dòng)評(píng)分均減少,出現(xiàn)大便便溏和抑郁樣癥狀,胃殘留率上升,血清MTL、SP含量水平均下降,病理切片顯示胃腸組織無(wú)器質(zhì)性病變,與臨床因肝胃不和引起功能性消化不良的患者癥狀相似,說(shuō)明FD小鼠模型復(fù)制成功。(2)FD小鼠經(jīng)過(guò)中藥處理后,CZ組和CCZ組體重均有不同程度地增加,糖水偏好百分率和自主活動(dòng)均明顯改善(P0.05,P0.05),胃殘留顯著下降(P0.01,P0.01)血清中MTL、SP水平明顯上升(P0.01,P0.01)。兩個(gè)給藥組相比,CCZ組比CZ組的胃殘留率更低(P0.05),p物質(zhì)水平更高(P0.05)。(3)與正常組比較,FD模型小鼠胃竇組織中c-kit基因和蛋白表達(dá)水平下調(diào)(P0.01)。與模型組相比,CZ組和CCZ組的c-kit表達(dá)均明顯上升(P0.01,P0.01),CCZ組與CZ組相比沒(méi)有優(yōu)勢(shì)。(4)與正常組比較,FD模型組小鼠同時(shí)在血清和腦組織中5-HT含量顯著下降(P0.01),十二指腸中5-HT_4R基因和蛋白表達(dá)水平下調(diào)(P0.01)。與模型組相比,兩個(gè)給藥組均能明顯提高5-HT含量和5-HT_4R表達(dá)水平(P0.01,P0.05),并且,CCZ組比CZ組提高更多(P0.05)。(5)成功分離、純化和培養(yǎng)大鼠胃竇平滑肌細(xì)胞后,測(cè)定其對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為3-4天。通過(guò)對(duì)比各組含藥血清作用,與正常含藥血清組相比,10%多潘立酮組、10%CZ組、10%CCZ組的平滑肌細(xì)胞活性和胞內(nèi)Ca~(2+)熒光強(qiáng)度均顯著增強(qiáng)(P0.01,P0.01,P0.01),并且10%CCZ組比10%CZ組Ca~(2+)熒光強(qiáng)度更強(qiáng)(P0.01)。結(jié)論:三聯(lián)一復(fù)合應(yīng)激處理小鼠后產(chǎn)生與臨床中由肝胃不和引起的功能性消化不良相似的癥狀,說(shuō)明心理應(yīng)激是功能性消化不良的重要致病因素。柴胡疏肝散方中的陳皮枳殼藥對(duì)具有減少胃殘留、增加胃動(dòng)力、改善FD癥狀的作用,藥對(duì)配伍柴胡后藥效作用更強(qiáng),增強(qiáng)的機(jī)制與直接的胃腸道因素(MTL、ICC)無(wú)關(guān),而是通過(guò)增強(qiáng)5-HT系統(tǒng)(5-HT、5-HT_4R、p物質(zhì))促進(jìn)胃平滑肌細(xì)胞Ca~(2+)內(nèi)流,實(shí)現(xiàn)胃動(dòng)力增強(qiáng)。
【學(xué)位單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1-1 ICC 概況1.1.4 功能性消化不良與 5-羥色胺（5-HT）5-羥色胺（5-Hydroxytryptamine，5-HT）是眾多腦腸肽中研究的熱點(diǎn)，它不僅能 CNS 中可檢測(cè)到，在 ENS 中也廣泛分布[52]。基礎(chǔ)研究表明 5-HT 在中樞神經(jīng)系統(tǒng)可通過(guò)神經(jīng)遞質(zhì)的方式來(lái)參與機(jī)體的感知、情緒、心理變化等生理過(guò)程；在胃腸道

圖 1-2 5-HT4R 與胃腸動(dòng)力1.1.5 功能性消化不良與胃動(dòng)素（MTL）胃動(dòng)素（MTL）是屬于興奮型腦腸肽，其受體主要分布在胃竇、十二指腸和部分小腸粘膜中。MTL與特異性受體結(jié)合后，在消化期Ⅲ相時(shí)可提高胃腸道平滑肌、膽道

圖 2-1 小鼠自制束縛管價(jià)過(guò)程中，每隔 2-3 天測(cè)量一次小鼠的體重，日均食量好實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，此外觀(guān)察小鼠的精神狀態(tài)和排便。末次給藥結(jié)束后，進(jìn)行胃殘留率和小腸推進(jìn)率檢測(cè)
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳彩霞;陳安琪;;手術(shù)后胃殘留縫線(xiàn)的診治體會(huì)[J];福建醫(yī)藥雜志;1988年01期

2 陳興愛(ài);;危重癥患者腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)測(cè)定胃殘留量研究進(jìn)展[J];齊魯護(hù)理雜志;2015年19期

3 余玲莉;方傲華;周金蔓;;監(jiān)測(cè)危重癥病人胃殘留量的研究現(xiàn)狀[J];腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng);2013年03期

4 童敏;李寶香;方靜;吳雅利;;老年認(rèn)知功能障礙病人鼻飼誤吸與胃殘留量的相關(guān)性研究[J];全科護(hù)理;2015年32期

5 曾靜;杜嫻;方圓文;陶小紅;李小莉;;危重病人胃殘留量與誤吸的相關(guān)性研究[J];護(hù)理研究;2012年31期

6 鄧春梅;余玲莉;宋瑤;;穴位注射對(duì)重癥腦卒中患者胃殘留量的影響[J];中國(guó)臨床護(hù)理;2016年01期

7 盧梅兆;李清香;;腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)液輸注方式對(duì)胃殘留量的影響[J];蛇志;2014年03期

8 卜凡莉;梁楓;王珂;黃騫;彭南海;;對(duì)ICU行腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)支持患者胃殘留量監(jiān)測(cè)相關(guān)系統(tǒng)評(píng)價(jià)的再評(píng)價(jià)[J];護(hù)理學(xué)報(bào);2019年05期

9 李寶香;童敏;方靜;吳雅利;;老年認(rèn)知功能障礙患者鼻飼誤吸與胃殘留量的相關(guān)性研究[J];現(xiàn)代診斷與治療;2015年15期

10 馮麗梅;沈梅芬;陶云娜;蔣鳳芝;施海建;;不同喂養(yǎng)狀態(tài)及體位下注射器抽吸與超聲測(cè)量胃殘留量一致性評(píng)價(jià)[J];護(hù)理學(xué)雜志;2019年18期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前7條

1 龔彥溶;陳皮枳殼配伍柴胡對(duì)應(yīng)激法致小鼠功能性消化不良的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2018年

2 王曉玲;姜黃素對(duì)順鉑所致的小鼠胃腸道損傷的影響[D];青島大學(xué);2011年

3 徐希紅;集束干預(yù)策略在綜合ICU中預(yù)防VAP感染的臨床分析[D];吉林大學(xué);2014年

4 王明將;蘇州地區(qū)重癥患者營(yíng)養(yǎng)支持現(xiàn)狀調(diào)查[D];蘇州大學(xué);2016年

5 王秀杰;半夏瀉心湯對(duì)胃腸動(dòng)力作用拆方研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2002年

6 何麗蘭;極低出生體重兒喂養(yǎng)不耐受與胃液pH值的相關(guān)性研究[D];暨南大學(xué);2014年

7 魏華;試論劑量、煎藥方法及劑型對(duì)方劑功效的影響[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2008年

本文編號(hào)：2885022