目的:從枳殼中分離純化枳殼均一多糖CALB-2,并對其進行結構分析、形態(tài)表征及生物活性的研究。方法:采用熱水提取法從中藥枳殼中提取枳殼粗多糖(CALB),經(jīng)陰陽離子交換樹脂、離子交換瓊脂糖凝膠以及丙烯葡聚糖凝膠等分離純化技術得到枳殼均一多糖CALB-2;利用高效液相色譜法(HPLC)測定CALB-2的相對分子質量,采用甲基化分析和Smith降解對CALB-2進行單糖組成分析,通過紅外光譜掃描(IR)分析和電鏡掃描技術(SEM)對CALB-2進行結構分析及形態(tài)表征,并通過H2O2誘導心肌細胞氧化損傷模型對CALB-2抗氧化活性進行研究。結果:經(jīng)HPLC測定CALB-2為均一多糖,其相對分子質量為3. 57×107Da。綜合運用IR光譜分析、甲基化分析和Smith降解得到CALB-2為多支結構的酸性多糖,且主要以1→3,4鍵型存在。分子形態(tài)考察結果顯示CALB-2為非晶態(tài)固體。體外活性結果表明CALB-2可明顯減緩H2O2所致心肌細胞的氧化損傷作用。結論:枳殼多糖CALB-2為多支結構的均一酸性多糖,且具有一定抗心肌細胞氧化損傷的作用,以上發(fā)現(xiàn)為枳殼多糖進一步地深入研究奠定了理論基礎。
【部分圖文】：

CALB-2的紅外光譜中3400 cm-1左右可見1個較強的寬吸收峰，為O-H的伸縮振動，提示CALB-2存在分子內(nèi)或分子間氫鍵；3 000～2 810 cm-1有1個弱吸收峰，為不對稱C-H伸縮振動，是糖類成分的特征性吸收峰；1 620,1 420,1 330 cm-1以及1 240 cm-1處的吸收峰均為-COOH，表明CALB-2中有-COOH存在。另外，有3個強吸收峰出現(xiàn)在1 110～1 010 cm-1，表明為吡喃型的糖環(huán)構型；960～950 cm-1出現(xiàn)的吸收峰可能是呋喃糖的骨架振動；880～900 cm-1處和860 cm-1左右的吸收峰分別為β-端基和α-端基差向異構的C-H變角振動峰；765 cm-1處的吸收峰為D-吡喃環(huán)。以上分析表明CALB-2可能是一種多支鏈結構的酸性多糖。見圖1。3.3 高碘酸氧化和Smith降解結果

經(jīng)H2O2誘導后，H9c2細胞活力減弱至63.85%，與空白組相比出現(xiàn)顯著性差異；與模型組比較，CALB-2高、中劑量組（40,20 mg·L-1）處理后心肌細胞活力分別達到84.61%和77.41%，說明CALB-2能顯著抑制H2O2對心肌細胞的損傷作用（P<0.01),CALB-2低劑量組則無顯著性差異，說明CALB-2可有效減緩H2O2對心肌細胞造成的氧化損傷，并呈劑量依賴性。見表5。4 討論
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