發(fā)布時間：2020-11-12 04:09

　　 目的:該研究旨在初步探討二至丸(Erzhi Pills)對1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)所致帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠的防治作用及可能的作用機制。方法:選取30只C57/BL健康雄性小鼠隨機分成正常組、模型組、給藥組,每組10只。給藥組小鼠預先灌胃二至丸(2.5 g·kg~(-1),0.1 ml·10g~(-1))10天,正常組和模型組均等體積生理鹽水灌胃;第11-18 d,模型組和給藥組均腹腔注射MPTP(30 mg·kg~(-1),0.1 ml·10g~(-1)),正常組同等體積生理鹽水處理;第19-25 d,給藥組二至丸灌胃給藥,正常組和模型組均等體積生理鹽水灌胃;第26-28 d,進行Morris水迷宮(Morris water maze,MWM)定位航行實驗,第30 d進行空間探索實驗。期間給藥組持續(xù)灌胃二至丸直至實驗結(jié)束。行為學方面,爬桿實驗、懸掛實驗、游泳實驗檢測小鼠肢體運動協(xié)調(diào)能力,Morris水迷宮實驗檢測小鼠空間學習記憶能力;血清學指標檢測小鼠血清中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)活性及丙二醛(Malondialdehyde,DA)含量;Western Blot檢測腦組織中酪氨酸羥化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)、單胺氧化酶B(Monoamine oxidase B,MAO-B)及凋亡相關(guān)因子CHOP、Caspase-12的蛋白表達水平;免疫組化法檢測小鼠腦組織切片TH陽性細胞的數(shù)目,觀察黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元損傷情況。結(jié)果:在行為學檢測方面,與正常組小鼠相比,模型組小鼠肢體運動得分、空間學習記憶能力有顯著性降低(P0.05或P0.01),與模型組小鼠相比,給藥組小鼠肢體運動得分、空間學習記憶能力有顯著性升高(P0.05或P0.01);血清學指標方面,與正常組小鼠相比,模型組小鼠SOD和GSH-PX活性均明顯下降,MDA則相反,含量明顯升高(P0.05或P0.01),與模型組小鼠相比,給藥組小鼠血清的SOD、GSH-PX活性均明顯升高(P0.05或P0.01),MDA則相反,含量明顯下降;Western Blot結(jié)果顯示,與正常組小鼠相比,模型組小鼠腦組織中TH的蛋白表達水平顯著下調(diào)(P0.05或P0.01),MAO-B及凋亡相關(guān)因子CHOP、Caspase-12的蛋白表達水平均顯著下調(diào)(P0.05或P0.01),與模型組小鼠相比,給藥組小鼠腦組織中TH的蛋白表達水平顯著上調(diào),MAO-B及凋亡相關(guān)因子CHOP、Caspase-12的蛋白表達水平均顯著下調(diào)(P0.05或P0.01);免疫組織切片結(jié)果顯示,與正常組相比,模型組小鼠腦組織TH陽性細胞數(shù)目顯著下降(P0.05或P0.01),與模型組相比,給藥組小鼠腦組織TH陽性細胞數(shù)目顯著增加(P0.05或P0.01)。結(jié)論:這些研究表明二至丸在一定程度上對MPTP誘導的PD小鼠有防治作用。二至丸可顯著改善PD小鼠肢體運動協(xié)調(diào)能力、空間學習記憶能力,這可能與其抑制氧化應激,并下調(diào)凋亡相關(guān)因子CHOP、Caspase-12的表達,減輕多巴胺能神經(jīng)元的損傷,抑制多巴胺能神經(jīng)凋亡有關(guān)。
【學位單位】：河南科技大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 帕金森病的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 帕金森病簡介
        1.1.2 帕金森病模型的建立
        1.1.3 帕金森病的治療
    1.2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激
        1.2.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激簡介
        1.2.2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導的細胞凋亡信號通路
    1.3 二至丸的研究進展
        1.3.1 二至丸簡介
        1.3.2 二至丸的藥理作用
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物來源
        2.1.2 藥品
        2.1.3 試劑
        2.1.4 實驗儀器
        2.1.5 試劑配制
    2.2 二至丸對MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用
        2.2.1 分組與給藥
        2.2.2 行為學檢測
        2.2.3 Morris水迷宮
        2.2.4 動物處理與取材
        2.2.5 小鼠血清指標檢測
        2.2.6 Western blot檢測相關(guān)蛋白的表達情況
        2.2.7 免疫組織化學檢測
    2.3 統(tǒng)計學處理
第3章 結(jié)果
    3.1 爬桿實驗
    3.2 懸掛實驗
    3.3 游泳實驗
    3.4 Morris水迷宮結(jié)果
    3.5 小鼠血清指標檢測
    3.6 Western blot檢測相關(guān)蛋白的表達情況
    3.7 免疫組織化學檢測
第4章 討論
    4.1 二至丸對MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用
        4.1.1 二至丸對MPTP所致帕金森病小鼠行為學的影響
        4.1.2 二至丸對MPTP所致帕金森病小鼠氧化應激的影響
        4.1.3 二至丸對MPTP所致帕金森病小鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的影響
    4.2 問題和展望
第5章 結(jié)論
參考文獻
縮略語詞匯表
附錄
致謝
攻讀學位期間的研究成果

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本文編號：2880224