五味子是我國傳統(tǒng)中藥,已有兩千多年的用藥歷史,在許多古籍中均有記載�！吨袊幍洹肥珍浀奈逦蹲影衔逦蹲雍捅蔽逦蹲�。多糖是五味子重要的活性成分,本研究主要對南、北五味子多糖的理化性質、抗氧化活性及免疫作用進行比較研究,區(qū)分其理化性質及活性的差異,以指導臨床合理用藥,進而對五味子資源的利用與開發(fā)提供參考與依據。采用傳統(tǒng)水提醇沉法提取南、北五味子多糖,分別命名為SSP和SCP;接著對二者的理化性質、抗氧化活性和免疫作用進行了體外試驗。理化性質測定結果表明:SSP的糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量、多酚含量分別為51.04%、35.35%、12.81%、3.43%;SCP的分別為78.45%、12.55%、4.78%、3.28%。SSP和SCP除多酚含量無顯著性差異外,糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量均具有顯著性差異。SSP主要由半乳糖(34.6%),阿拉伯糖(22.3%),葡萄糖(15%),半乳糖醛酸(11.5%)組成;SCP中葡萄糖含量最高,達到67.6%,其次為甘露糖(11.7%),半乳糖(8.6%)。SSP和SCP分子量分別分布在1.7×10~5 Da和1.7×10~4 Da,相差較大。紅外光譜圖分析發(fā)現,SSP和SCP均具有多糖的特征吸收峰。活性研究結果表明:SSP對自由基的清除能力、對生物大分子的保護作用(對Cu~(2+)/H_2O_2誘導的BSA蛋白氧化損傷的抑制作用)以及對H_2O_2誘導的人正常肝細胞氧化損傷的保護作用均顯著強于SCP。以RAW264.7細胞為模型,對SSP和SCP處理免疫細胞后,其細胞活力、中性紅吞噬能力、NO分泌量以及酸性磷酸酶活性比較,結果發(fā)現SCP的免疫活性強于SSP。對免疫活性較強的SCP用DEAE-52纖維素柱分離純化,共得到三個組分,分別命名為SCP-I(0.436%)、SCP-II(0.08%)和SCP-III(0.126%);單糖組成測定結果表明:SCP-I只有葡萄糖,SCP-II由葡萄糖和半乳糖組成,SCP-III是一種酸性雜多糖;對得率與純度最高的SCP-I組分GC-MS分析,發(fā)現該組分為1,4-連接的葡萄糖,淀粉碘化鉀實驗鑒定其為淀粉。對SCP去淀粉后測定單糖組成發(fā)現,去淀粉后的北五味子多糖(DS-SCP)中葡萄糖相對摩爾百分比減少了55.9%,而甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖分別增加了19.7%、17%和14.8%。免疫活性結果表明,DS-SCP的免疫作用強于SCP。
【學位單位】：西北大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R284;R285
【部分圖文】：

簡介為我國傳統(tǒng)中藥材，已經有數千年的用藥歷史。據唐朝古籍《新，皮肉甘酸，核中辛苦，因其五味俱全，故名五味子，又稱“五遼五味”等[1]。的分布于木蘭科，全世界共收錄有 50 種，其中屬于我國特有的達 12典》僅記載了北五味子（Schisandra chinensis (turcz) bail），如子）（Schisandrasphenantherarehd.etwils．）也被列入其中。南、地理分布上彼此不同，南五味子（圖 1.1 A）偏棕色，略微在西南、長江流域以南各個省份；北五味子（圖 1.1 B）為紫滿，主要分布在東北三省及內蒙古地區(qū)，日本、朝鮮部分地區(qū)，北五味子比南五味子質量優(yōu)，效果佳。

圖 2.1 南、北五味子多糖的提取流程圖Fig.2.1 Flow chart of Schisandra sphenanthera/S. chinensis polysaccharide extraction2.1.4.2 糖含量測定SSP 和 SCP 的糖含量的測定采用經典的苯酚硫酸法[81]。a. 準確配制 0.12 mg/mL 的葡萄糖溶液作為標準儲備液；b. 按如下加樣進行標準曲線的建立：標準液(mL) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4蒸餾水(mL) 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.680%苯酚(μL) 50濃硫酸(mL) 2.5c. 以上每個濃度設置 3 組平行，在振蕩器上輕輕振蕩后，室溫反應 20 min；d. 同時以 0 管作為空白對照，中間值（0.7mL）作為校準，測定 490nm 處的紫外

圖 2.2 糖含量測定標準曲線2 Standard curve of total sugar content determin準曲線方程為：y=7.3431x-0.0176，R2=0.999線，計算得到 SSP 和 SCP 的糖含量分別的蛋白含量測定0 0.05 0.1 0.15 葡萄糖質量 (mg)y = 0.2654x + 0.0034R2= 0.99610.10.150.20.250.3
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本文編號：2879879