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南、北五味子多糖的理化性質(zhì)及生物活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-11-11 23:02
   五味子是我國(guó)傳統(tǒng)中藥,已有兩千多年的用藥歷史,在許多古籍中均有記載!吨袊(guó)藥典》收錄的五味子包括南五味子和北五味子。多糖是五味子重要的活性成分,本研究主要對(duì)南、北五味子多糖的理化性質(zhì)、抗氧化活性及免疫作用進(jìn)行比較研究,區(qū)分其理化性質(zhì)及活性的差異,以指導(dǎo)臨床合理用藥,進(jìn)而對(duì)五味子資源的利用與開(kāi)發(fā)提供參考與依據(jù)。采用傳統(tǒng)水提醇沉法提取南、北五味子多糖,分別命名為SSP和SCP;接著對(duì)二者的理化性質(zhì)、抗氧化活性和免疫作用進(jìn)行了體外試驗(yàn)。理化性質(zhì)測(cè)定結(jié)果表明:SSP的糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量、多酚含量分別為51.04%、35.35%、12.81%、3.43%;SCP的分別為78.45%、12.55%、4.78%、3.28%。SSP和SCP除多酚含量無(wú)顯著性差異外,糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量均具有顯著性差異。SSP主要由半乳糖(34.6%),阿拉伯糖(22.3%),葡萄糖(15%),半乳糖醛酸(11.5%)組成;SCP中葡萄糖含量最高,達(dá)到67.6%,其次為甘露糖(11.7%),半乳糖(8.6%)。SSP和SCP分子量分別分布在1.7×10~5 Da和1.7×10~4 Da,相差較大。紅外光譜圖分析發(fā)現(xiàn),SSP和SCP均具有多糖的特征吸收峰;钚匝芯拷Y(jié)果表明:SSP對(duì)自由基的清除能力、對(duì)生物大分子的保護(hù)作用(對(duì)Cu~(2+)/H_2O_2誘導(dǎo)的BSA蛋白氧化損傷的抑制作用)以及對(duì)H_2O_2誘導(dǎo)的人正常肝細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用均顯著強(qiáng)于SCP。以RAW264.7細(xì)胞為模型,對(duì)SSP和SCP處理免疫細(xì)胞后,其細(xì)胞活力、中性紅吞噬能力、NO分泌量以及酸性磷酸酶活性比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)SCP的免疫活性強(qiáng)于SSP。對(duì)免疫活性較強(qiáng)的SCP用DEAE-52纖維素柱分離純化,共得到三個(gè)組分,分別命名為SCP-I(0.436%)、SCP-II(0.08%)和SCP-III(0.126%);單糖組成測(cè)定結(jié)果表明:SCP-I只有葡萄糖,SCP-II由葡萄糖和半乳糖組成,SCP-III是一種酸性雜多糖;對(duì)得率與純度最高的SCP-I組分GC-MS分析,發(fā)現(xiàn)該組分為1,4-連接的葡萄糖,淀粉碘化鉀實(shí)驗(yàn)鑒定其為淀粉。對(duì)SCP去淀粉后測(cè)定單糖組成發(fā)現(xiàn),去淀粉后的北五味子多糖(DS-SCP)中葡萄糖相對(duì)摩爾百分比減少了55.9%,而甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖分別增加了19.7%、17%和14.8%。免疫活性結(jié)果表明,DS-SCP的免疫作用強(qiáng)于SCP。
【學(xué)位單位】:西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R284;R285
【部分圖文】:

北五味子,圖片,南五味子


簡(jiǎn)介為我國(guó)傳統(tǒng)中藥材,已經(jīng)有數(shù)千年的用藥歷史。據(jù)唐朝古籍《新,皮肉甘酸,核中辛苦,因其五味俱全,故名五味子,又稱“五遼五味”等[1]。的分布于木蘭科,全世界共收錄有 50 種,其中屬于我國(guó)特有的達(dá) 12典》僅記載了北五味子(Schisandra chinensis (turcz) bail),如子)(Schisandrasphenantherarehd.etwils.)也被列入其中。南、地理分布上彼此不同,南五味子(圖 1.1 A)偏棕色,略微在西南、長(zhǎng)江流域以南各個(gè)省份;北五味子(圖 1.1 B)為紫滿,主要分布在東北三省及內(nèi)蒙古地區(qū),日本、朝鮮部分地區(qū),北五味子比南五味子質(zhì)量?jī)?yōu),效果佳。

流程圖,北五味子,流程圖,糖含量測(cè)定


圖 2.1 南、北五味子多糖的提取流程圖Fig.2.1 Flow chart of Schisandra sphenanthera/S. chinensis polysaccharide extraction2.1.4.2 糖含量測(cè)定SSP 和 SCP 的糖含量的測(cè)定采用經(jīng)典的苯酚硫酸法[81]。a. 準(zhǔn)確配制 0.12 mg/mL 的葡萄糖溶液作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液;b. 按如下加樣進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:標(biāo)準(zhǔn)液(mL) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4蒸餾水(mL) 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.680%苯酚(μL) 50濃硫酸(mL) 2.5c. 以上每個(gè)濃度設(shè)置 3 組平行,在振蕩器上輕輕振蕩后,室溫反應(yīng) 20 min;d. 同時(shí)以 0 管作為空白對(duì)照,中間值(0.7mL)作為校準(zhǔn),測(cè)定 490nm 處的紫外

標(biāo)準(zhǔn)曲線,糖含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)曲線,準(zhǔn)曲線


圖 2.2 糖含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線2 Standard curve of total sugar content determin準(zhǔn)曲線方程為:y=7.3431x-0.0176,R2=0.999線,計(jì)算得到 SSP 和 SCP 的糖含量分別的蛋白含量測(cè)定0 0.05 0.1 0.15 葡萄糖質(zhì)量 (mg)y = 0.2654x + 0.0034R2= 0.99610.10.150.20.250.3
【相似文獻(xiàn)】

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