目的:研究黃芩苷(baicalin)對T細胞淋巴瘤Molt4細胞增殖的抑制作用,并探討其可能的作用機制。方法:采用不同質(zhì)量濃度的黃芩苷(2.5、5、10、20、40、80和160 μg/mL)處理T細胞淋巴瘤Molt4細胞,MTT法檢測細胞增殖抑制率并計算半數(shù)抑制濃度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值。用黃芩苷(20 μg/mL)處理Molt4細胞后,采用瑞氏染色法檢測對細胞凋亡形態(tài)的影響,FCM法檢測對Molt4細胞凋亡率的影響,DCFH-DA法檢測Molt4細胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的變化。最后,采用FCM法檢測黃芩苷單藥或聯(lián)合二硫蘇糖醇(dithiothreitol,DTT)對Molt4細胞凋亡的影響。結(jié)果:不同質(zhì)量濃度的黃芩苷(2.5、5、10、20、40、80和160 μg/mL)可明顯抑制Molt4細胞的增殖能力(P值均0.05),黃芩苷對Molt4細胞的IC_(50)值為(19.2±2.2)μg/mL。黃芩苷處理Molt4細胞48和60 h后均出現(xiàn)明顯的凋亡形態(tài);FCM法檢測顯示黃芩苷組細胞的凋亡率為(42.7±5.0)%,明顯高于對照組的(5.0±0.9)%(P0.01);DCFH-DA法檢測結(jié)果顯示黃芩苷處理Molt4細胞6、12和24 h后細胞內(nèi)ROS的水平隨時間的延長而明顯提高,但在36 h后細胞內(nèi)ROS的水平開始降低。黃芩苷聯(lián)合DTT可明顯降低黃芩苷對Molt4細胞凋亡率(P0.01)。結(jié)論:黃芩苷可抑制T淋巴瘤Molt4細胞的生長,并通過刺激ROS生成從而誘導(dǎo)Molt4細胞的凋亡。
【部分圖文】：

為研究ROS是否與黃芩苷誘導(dǎo)的凋亡相關(guān),本研究中采用細胞通透性染料DCFH-DA染色后,上流式細胞儀檢測Molt4細胞中ROS的含量(其作用機制為在ROS存在的情況下,DCFH-DA會被特異地切割,并發(fā)出一定波長的熒光)。DCFH-DA法檢測結(jié)果(圖3)顯示,黃芩苷(20 μg/mL)處理Molt4細胞后,細胞內(nèi)ROS的含量明顯升高,且與作用時間具有相關(guān)性。與對照組相比,黃芩苷處理Molt4細胞 6 h后細胞內(nèi)ROS的含量就出現(xiàn)升高,為對照組中ROS的含量的(1.190±0.017)倍,12 h時為(1.594±0.112)倍,24 h時為(2.054±0.107)倍達到高峰;隨后開始下降,36 h時為(1.065±0.025)倍。已有研究表明,黃芩苷可以氧化蛋白分子的活性巰基,從而使細胞內(nèi)的ROS的含量升高。本研究結(jié)果提示,黃芩苷處理后能夠明顯提高Molt4細胞內(nèi)ROS的含量,說明黃芩苷對Molt4細胞凋亡的影響可能是通過氧化-還原反應(yīng)完成的。2.4 黃芩苷聯(lián)合DTT對Molt4細胞凋亡率的影響

圖2 分別采用瑞氏染色法(A)和FCM法(B)檢測黃芩苷對Molt4細胞凋亡的影響

黃芩苷是一種黃酮類化合物,存在于黃芩中。近年來研究表明,黃芩具有抗腫瘤作用,已在某些腫瘤的治療中作為一種化療的輔助性藥物,被認為可增強化療效果或者減輕化療的不良反應(yīng)[7]。目前研究已證明,黃芩的抗腫瘤作用主要通過其成分中的黃酮類化合物實現(xiàn),這些黃酮類化合物主要有黃芩素、漢黃芩素(wogonin)、漢黃芩甙(wogonoside)和黃芩苷等[8]。這些生物活性成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)中均含有2和3不飽和鍵、4-酮基和5-羥基這3個主要活性基團,通過這些基團的氫原子轉(zhuǎn)移實現(xiàn)其生物活性[9-11]。這些植物化學(xué)物質(zhì)在體內(nèi)外對多種腫瘤(包括乳腺癌和前列腺癌等)細胞有抑制生長作用,且其對人體正常組織細胞無毒副作用[12-15]。黃芩苷可以氧化蛋白分子上的活性巰基,從而促進細胞內(nèi)ROS的生成,提示黃芩苷的生物活性可能與其功能基團的氧化-還原反應(yīng)有關(guān)。隨著時間的推移,黃芩苷上氧化-還原基團被附著完成,可能在24 h達到充分附著,表現(xiàn)為ROS的含量達到高峰;其后,隨著時間推移,有些基團又開始分離,因此在36 h后細胞內(nèi)ROS的含量開始下降。
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3 盧園園;樊榮;黃曉穎;劉瑩;王良興;;黃芩苷抑制低氧性肺動脈平滑肌細胞增殖的機制[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2012年09期

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6 王錦軍;;黃芩苷通過多藥耐藥相關(guān)蛋白2從Caco-2細胞外流[J];國外醫(yī)藥(植物藥分冊);2008年01期

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8 馮蕾;劉旭;楊暉;;黃芩苷鋅穩(wěn)定性影響因素實驗研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年05期

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