為探究羊踟躕提取物對金黃色葡萄糖球菌的作用機制,通過測定菌液電導(dǎo)率、核酸含量變化研究該提取物對細(xì)胞膜通透性的影響,并用掃描電鏡觀察其對菌體形態(tài)的影響。結(jié)果表明,該提取物作用后菌液電導(dǎo)率升高、核酸流出增多,菌體發(fā)生凹陷、破裂。推測羊踟躕提取物可能通過破壞細(xì)菌細(xì)胞膜甚至細(xì)胞完整性,使得細(xì)胞內(nèi)的導(dǎo)電離子及核酸物質(zhì)外流,從而造成細(xì)菌死亡。
【部分圖文】：

按照1.3.4方法,用酶標(biāo)儀測定不同濃度的羊踟躕提取物藥液對金黃色葡萄球菌DNA的吸光度值,結(jié)果見圖1。由圖1可知,不同濃度的羊踟躕提取物對金黃色葡萄球菌存在著不同程度的影響。4*MIC、2*MIC以及最小抑菌濃度下的藥液能明顯地使菌懸液中的DNA增加;加入0.5*MIC的實驗組和不加藥液的對照組中細(xì)菌DNA變化微弱,基本可以忽略不計。表明,一定濃度下的羊踟躕提取物能改變細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性,從而使細(xì)菌細(xì)胞膜內(nèi)的DNA外流。細(xì)菌經(jīng)高濃度藥液作用4小時后,所測得吸光度值有所降低,估計是由于細(xì)菌全部死亡所造成。此外,由于藥液顏色偏深并且與肉湯培養(yǎng)基作用后,溶液中會有沉淀生成,所以造成吸光度值普遍偏大,也對實驗造成了一定誤差。

按照1.3.5方法,羊踟躕提取物作用下金葡菌電導(dǎo)率測定結(jié)果見圖2。隨著藥物作用時間的增加,實驗組溶液中電導(dǎo)率值也隨之增加;對照組電導(dǎo)率值無明顯變化。其可能是由于金黃色葡萄球菌經(jīng)羊踟躕提取物的作用后,導(dǎo)致其細(xì)胞膜通透性增加,使得細(xì)胞內(nèi)K+、Na+等導(dǎo)電離子外流,從而增加了溶液的電導(dǎo)率。2.4 細(xì)菌生長曲線的測定結(jié)果

按照1.3.6方法,測定600nm條件下菌液的吸光度值繪制生長曲線見圖3。對照組的金黃色葡萄球菌對數(shù)生長;0.5*MIC藥液組,前期細(xì)菌數(shù)量有明顯的增加,后期也有增長趨勢,但數(shù)量變化不大,說明該濃度下的羊踟躕提取物對金黃色葡萄球菌有一定的抑制作用,但不能完全抑制其的生長;MIC和2*MIC實驗組中,前期細(xì)菌也有所增長,但后期其生長已完全停止,甚至出現(xiàn)吸光度值變小的情況,說明這兩個濃度的羊踟躕提取物完全達到了抑制金黃色葡萄球菌生長的作用,甚至能使細(xì)菌死亡。2.5 掃描電鏡觀察細(xì)菌形態(tài)的結(jié)果
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