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二氫姜黃素體外處理BRL-3A細胞對細胞凋亡通路的影響

發(fā)布時間:2020-11-09 17:56
   目的研究二氫姜黃素(DHC)對棕櫚酸(PA)誘導的大鼠肝BRL-3A細胞線粒體凋亡通路的影響。方法建立PA誘導的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)細胞模型,將細胞分為對照組(正常培養(yǎng)基)、模型組(0.25 m M PA處理)和DHC處理組(16、32和64μM DHC處理),檢測細胞培養(yǎng)上清乳酸脫氫酶(LDH)含量,采用流式細胞儀檢測細胞凋亡,檢測細胞線粒體膜電位、凋亡相關蛋白酶Caspase-3和Caspase-9活性,采用Western blotting法檢測線粒體凋亡相關蛋白Bcl-2和Bax蛋白表達量。結果模型組細胞上清LDH、Caspase-3和Caspase-9活性分別為(100.1±4.2)%、(1.0±0.2)%和(1.0±0.1)%,均顯著高于對照組[分別為(65.2±3.5)%、(0.3±0.1)%和(0.5±0.1)%,P0.05],而線粒體膜電位為(0.5±0.1)%,顯著低于對照組[(0.7±0.1)%,P0.05]; 32μM DHC處理組LDH、Caspase-3和Caspase-9活性分別為(84.4±2.4)%、(0.8±0.1)%和(0.7±0.1)%,均顯著低于模型組(P0.05),而線粒體膜電位為[(0.6±0.1)%,顯著高于模型組(P0.05);與對照組比,模型組細胞凋亡率顯著增加,而經DHC處理組,細胞凋亡率比模型組顯著降低;模型組Bcl-2蛋白相對表達量為(1.0±0.1),顯著低于對照組[(2.2±0.5),P0.05],而Bax蛋白相對表達量為(1.1±0.1),顯著高于對照組[(0.8±0.1),P0.05]; 32μM DHC處理組和64μM DHC處理組Bcl-2蛋白相對表達量分別為(1.3±0.1)和(1.9±0.2),均顯著高于模型組(P0.05),而Bax蛋白相對表達量分別為(0.7±0.1)和(0.6±0.1),均顯著低于模型組(P0.05)。結論 DHC可能通過抑制線粒體介導的凋亡通路,緩解由PA誘導的BRL-3A細胞凋亡。
【部分圖文】:

細胞凋亡,凋亡細胞,處理組,蛋白


各組細胞凋亡率比較

細胞,蛋白,凋亡,細胞膜


關于NASH的流行病學研究表明,NASH患者的發(fā)病率逐年在增加,在未來十年可能成為肝移植的主要原因。因此,關于NASH的防治研究已成為研究的熱點。細胞凋亡與有絲分裂的過程在正常情況下處于平衡狀態(tài),維持機體細胞的平衡。但在NASH模型中凋亡占主導地位,凋亡過度會進一步導致肝損傷和氧化應激紊亂等。因此,能否改善肝細胞的凋亡對于NASH的治療具有重要意義。用脂肪酸刺激肝細胞建立NASH的體外模型較為成熟,為研究藥物對NASH的作用機制奠定了良好的基礎。在PA誘導的BRL-3A細胞,我們首先觀察到DHC對PA引起細胞LDH的釋放有緩解作用。LDH一般存在于細胞質中,當細胞膜受損的時候會被釋放到培養(yǎng)上清,因此培養(yǎng)上清LDH越多,代表細胞膜受損越嚴重[11]。我們的結果顯示DHC可以減少細胞LDH的釋放,說明DHC可以改善PA引起的細胞膜的損傷。然后,我們用流式細胞儀檢測了凋亡細胞情況,結果發(fā)現(xiàn)DHC可以減少由PA引起的細胞早期凋亡、晚期凋亡和壞死數(shù)量。通過這部分的研究結果,我們推測DHC可以改善脂肪變情況下的細胞凋亡。
【相似文獻】

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