發(fā)布時間：2020-11-08 16:05

　　 目的:對帕金森病(PD)轉(zhuǎn)基因模型小鼠腦內(nèi)多巴胺和大腦病理樣本進(jìn)行檢測,探討拜顫停復(fù)方對PD模型腦功能異常的治療作用及神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。方法:運(yùn)用爬桿和自主活動實(shí)驗(yàn)分析轉(zhuǎn)基因模型小鼠行為學(xué)改變,UPLC-MS串聯(lián)三重四級桿方法檢測腦內(nèi)多巴胺含量,TUNEL法檢測大腦黑質(zhì)區(qū)病理變化,運(yùn)用方差分析進(jìn)行組間比較。結(jié)果:與正常對照組比較,模型對照組爬桿時間顯著增加(P0.05),自主活動次數(shù)顯著減少(P0.05),多巴胺含量顯著降低(P0.05),細(xì)胞呈典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變,如細(xì)胞變小、變圓、核固縮,細(xì)胞凋亡率顯著升高(P0.05);與模型對照組比較,拜顫停復(fù)方95.8 mg/kg組多巴胺含量明顯升高(P0.05);拜顫停復(fù)方181.5 mg/kg組爬桿時間明顯減少(P0.05),多巴胺含量明顯升高(P0.05),細(xì)胞凋亡率明顯下降(P0.05);拜顫停復(fù)方363 mg/kg組爬桿時間明顯減少(P0.05),自主活動次數(shù)明顯增加(P0.05),多巴胺含量明顯升高(P0.05),細(xì)胞凋亡率明顯下降(P0.05)。結(jié)論:拜顫停復(fù)方通過改善轉(zhuǎn)基因PD模型小鼠腦功能,如減少爬桿時間、增加自主活動次數(shù)和腦內(nèi)多巴胺含量,同時改善腦細(xì)胞病理變化治療PD。
【部分圖文】：

精密量取對照品溶液,按3.2項(xiàng)下“色譜條件”和“質(zhì)譜條件”進(jìn)行檢測,得到各多巴胺色譜峰的保留時間一致,無雜質(zhì)干擾,峰型良好,如圖1。1.5.3.4 線性關(guān)系考察與定量下限

標(biāo)準(zhǔn)曲線平行做5條,每條標(biāo)準(zhǔn)曲線選取6個濃度點(diǎn),不包括原點(diǎn)。采用加權(quán)的(W=1/x2)最小二乘法進(jìn)行線性回歸。最低定量限為S/N≥10,精密度和準(zhǔn)確度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均應(yīng)在±20%內(nèi)。取多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇溶液溶解,分別配制濃度為1.28、2.56、6.4、32、160、800 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液,以進(jìn)樣濃度為基準(zhǔn),橫坐標(biāo)為時間,縱坐標(biāo)為峰面積,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,如圖2。1.5.3.5 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)

結(jié)果如圖3,正常對照組藍(lán)色著染較淺,模型對照組藍(lán)色著染細(xì)胞數(shù)量增多,同時被染上藍(lán)色的細(xì)胞呈典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變,如細(xì)胞變小、變圓、核固縮。與模型對照組比較,隨拜顫停復(fù)方濃度升高,各給藥組藍(lán)色著染變淺,尤以拜顫停復(fù)方181.5 mg/kg組、拜顫停復(fù)方363 mg/kg組染色最淺,同時細(xì)胞形態(tài)趨于正常。凋亡率結(jié)果如表4,與正常對照組比較,模型對照組凋亡率明顯升高(P<0.05);與模型對照組比較,拜顫停復(fù)方181.5 mg/kg、363 mg/kg組細(xì)胞凋亡率明顯下降(P<0.05)。表4 拜顫停復(fù)方對帕金森病轉(zhuǎn)基因小鼠模型黑質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡的影響 ( x ˉ ±s,n=5) 組別 劑量/(mg/kg) 凋亡率(%) 正常對照 8.6±1.4* 模型對照 34.6±8.1 拜顫停復(fù)方 95.8 30.6±3.1 拜顫停復(fù)方 181.5 23.0±4.6* 拜顫停復(fù)方 363 19.2±4.5*
【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：2875009