發(fā)布時間：2020-11-08 13:28

　　 神農(nóng)香菊(Dendranthema indicum var.aromaticum)系菊科菊屬的一個新變種植物,其花、葉有清熱解毒之療效,常用于治療感冒、咽喉腫痛、目赤腫痛等。國內(nèi)外學(xué)者已從其花、莖、葉中分離出揮發(fā)油類、黃酮類、萜類等有效成分,有抗菌、抗氧化和抗炎等活性。然而,對神農(nóng)香菊莖中多糖的相關(guān)研究報道甚少。本文以恩施神農(nóng)架地區(qū)神農(nóng)香菊莖為原料,對神農(nóng)香菊莖多糖的提取、純化、結(jié)構(gòu)及體外抗氧化性進行研究,以期為我國神農(nóng)香菊莖資源的綜合利用提供新的方向和參考依據(jù),主要研究內(nèi)容如下:(1)比較熱水浸提和超聲輔助提取法提取神農(nóng)香菊莖多糖的提取率。熱水浸提法最佳工藝條件:料液比1∶40(g/mL),浸提溫度90℃,浸提時間2h,多糖的提取率為5.735%;超聲輔助提取法最佳工藝條件:料液比1∶40(g/mL),超聲時間60min,醇沉濃度70%,多糖的提取率為11.385%,較熱水浸提法提高了1.99倍。超聲提取法的優(yōu)點是提高產(chǎn)率,明顯縮短提取時間,設(shè)備條件較簡單。(2)以多糖脫色率和回收率為評價指標(biāo),比較活性炭、大孔樹脂和DEAE-52纖維素3種方法對超聲制得神農(nóng)香菊莖粗多糖的脫色效果。結(jié)果顯示:當(dāng)使用的活性炭量為4%、脫色溫度為60℃、脫色時間為45min時,多糖的脫色率達到最大為81.586%,但多糖回收率僅有20.445%。靜態(tài)實驗篩選7種大孔吸附樹脂,D301樹脂其脫色率為91.736%,多糖回收率僅有34.759%。通過DEAE-52纖維素使用不同洗脫劑對粗多糖液進行洗脫,其中A_(450)nm(蒸餾水)0.002,無色素吸收,該段脫色率較高;A_(490)nm(蒸餾水)5.5,多糖含量較高,多糖的回收率較高。故DEAE-52對神農(nóng)香菊莖多糖的脫色效果最佳。神農(nóng)香菊莖粗多糖固體呈灰褐色,經(jīng)DEAE-52脫色后的多糖為白色海綿狀固體。(3)利用離子交換層析技術(shù)對神農(nóng)香菊莖多糖進一步分離純化,比較不同離子型(OH~-、Cl~-、HCO_3~-)的DEAE-52對多糖的純化效果。結(jié)果表明HCO_3~-型的純化效果最好,分辨率較高,洗脫峰數(shù)量最多。經(jīng)HCO_3~-型DEAE-52層析得到四個級分:DILP-1、DILP-2、DILP-3、DILP-4。(4)HPLC對四個組分的均一性進行測定,確定以DILP-1為檢測對象。進一步采用紫外掃描、HPLC、~1H-NMR、~(13)C-NMR等現(xiàn)代分析手段對神農(nóng)香菊莖純化多糖DILP-1的結(jié)構(gòu)進行了初步分析。UV檢測結(jié)果顯示,DILP-1不含蛋白質(zhì)及核酸。多角度激光散射測定,DILP-1重均分子量為2.182*10~4Da。DILP-1的單糖組成分析結(jié)果表明DILP-1由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、果糖4種單糖組成,其摩爾比為1∶1.992∶1.577∶2.379。通過~1H-NMR、~(13)C-NMR圖譜分析,進一步確定DILP-1為多糖。(5)研究熱水浸提法與超聲提取法得到的神農(nóng)香菊莖多糖(DILWP、DILUP)對DPPH和ABTS自由基清除能力及總還原能力,結(jié)果表明,DILWP、DILUP均有體外抗氧化活性,在一定濃度范圍內(nèi),呈劑量依賴性。DILUP的抗氧化能力強于DILWP。
【學(xué)位單位】：武漢輕工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R284.2
【部分圖文】：

圖 2.1 葡萄糖標(biāo)準曲線Fig.2.1 The standard curve of glucose密度試驗果可知，RSD 值為 0.940%，符合相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準要求，說明實。表 2.5 精密度試驗數(shù)據(jù)（n=6）Tab.2.5 Data of the precision test（n=6）1 2 3 4 5 6 RS0.459 0.465 0.457 0.461 0.453 0.465 定性試驗果可知，RSD 值為 1.197%，小于 2%，符合相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準要莖多糖溶液的測定在 150min 內(nèi)穩(wěn)定性良好。表 2.6 穩(wěn)定性試驗數(shù)據(jù)Tab.2.6 Data of the stability test1 2 3 4 5 6 RS

圖 2.2 料液比對多糖得率的影響g.2.2 Effect of the ratio of material to liquid on the yield of polysacchar時間對多糖得率的影響見圖 2.3。浸提時間在 0.5~2h 內(nèi)隨著浸提時間的延長神農(nóng)持續(xù)遞增，在浸提時間 2h 時多糖的提取率達 5.452%。多h 后增長較為緩慢。處理時間太短，多糖不能充分溶解；、黃酮等物質(zhì)會被提取出來，另外因糖苷鍵斷裂而轉(zhuǎn)變成寡糖，醇沉?xí)r有所損失，皆導(dǎo)致提取率降低。故選取浸提

圖 2.2 料液比對多糖得率的影響Fig.2.2 Effect of the ratio of material to liquid on the yield of polysaccharide提時間對多糖得率的影響結(jié)果見圖 2.3。浸提時間在 0.5~2h 內(nèi)隨著浸提時間的延長神農(nóng)香取率持續(xù)遞增，在浸提時間 2h 時多糖的提取率達 5.452%。多糖取 2h 后增長較為緩慢。處理時間太短，多糖不能充分溶解；時間白質(zhì)、黃酮等物質(zhì)會被提取出來，另外因糖苷鍵斷裂而轉(zhuǎn)變成可糖、寡糖，醇沉?xí)r有所損失，皆導(dǎo)致提取率降低。故選取浸提時
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本文編號：2874849