白術(shù)(Atractylodes macrocephala Koidz.)傳統(tǒng)加工方法有烘干、曬干兩種。但此方法需要較長(zhǎng)時(shí)間,效率低。硫磺熏蒸(簡(jiǎn)稱硫熏)具有干燥、漂白、殺菌防腐的作用,可在一定程度上延長(zhǎng)藥材的保質(zhì)期,因此近年來(lái)過(guò)度硫熏的情況普遍存在,嚴(yán)重影響藥材飲片的質(zhì)量,已引起國(guó)家相關(guān)部門高度重視。目前,國(guó)家已出臺(tái)相關(guān)措施控制中藥材硫熏,但檢控手段仍有待完善。本論文以白術(shù)為研究對(duì)象,建立其水提、醇提部位的指紋圖譜;在此基礎(chǔ)上,系統(tǒng)考察硫熏對(duì)白術(shù)藥材品質(zhì)的影響,對(duì)硫熏前后白術(shù)化學(xué)輪廓組成進(jìn)行了液質(zhì)聯(lián)用分析,揭示硫熏引起白術(shù)藥材化學(xué)成分的變化規(guī)律,初步篩選出8個(gè)以特征含硫衍生物及內(nèi)酯脫水結(jié)合物作為特征質(zhì)量標(biāo)志物(Q-marker),創(chuàng)建白術(shù)過(guò)度硫熏的快速篩查方法;對(duì)硫熏前后白術(shù)藥材中內(nèi)酯、多糖以及低分子糖的含量進(jìn)行了測(cè)定;同時(shí),以唾液淀粉酶及D-木糖排泄率活性為指標(biāo)評(píng)價(jià)硫熏對(duì)白術(shù)健脾活性的影響,發(fā)現(xiàn)硫熏會(huì)顯著影響白術(shù)的整體質(zhì)量。本文為尋找并逐步建立更為科學(xué)、簡(jiǎn)便、易行的白術(shù)質(zhì)量評(píng)價(jià)方法,制定其量化標(biāo)準(zhǔn),實(shí)現(xiàn)白術(shù)質(zhì)量的安全、有效、穩(wěn)定和可控奠定良好基礎(chǔ),為硫熏白術(shù)檢控標(biāo)準(zhǔn)的修訂提供科學(xué)依據(jù),也為藥材硫熏工藝的標(biāo)準(zhǔn)化研究提供新思路。全文研究主要包括以下5個(gè)部分:一、文獻(xiàn)研究對(duì)白術(shù)的化學(xué)成分、產(chǎn)地加工現(xiàn)狀研究進(jìn)展進(jìn)行綜述;對(duì)硫熏導(dǎo)致不同藥材化學(xué)成分組成和含量改變,潛在藥效和毒性變化,以及硫熏藥材多種檢控方法進(jìn)行了系統(tǒng)綜述和評(píng)價(jià)。在此基礎(chǔ)上提出必須應(yīng)用現(xiàn)代分析技術(shù)加強(qiáng)硫熏對(duì)藥材整體質(zhì)量的影響研究,在硫熏藥材藥效和毒性評(píng)估不完善的情況下需建立專屬性強(qiáng)的硫熏藥材檢控方法,加強(qiáng)硫熏藥材的檢控。二、白術(shù)的指紋圖譜研究白術(shù)藥材的HPLC指紋圖譜研究得到醇提部位具有6個(gè)特征峰;在此基礎(chǔ)上,針對(duì)其水提部位做了深入研究,建立了具有24個(gè)特征峰的白術(shù)水提部位特征圖譜,所得的兩張指紋圖譜均與其自動(dòng)生成的對(duì)照?qǐng)D譜進(jìn)行相似度擬合,評(píng)價(jià)結(jié)果均大于0.90,所建立的水提、醇提部位HPLC指紋圖譜可以有效鑒別白術(shù)藥材,為全面控制白術(shù)藥材質(zhì)量,確保臨產(chǎn)用藥安全、有效提供參考。三、硫磺熏蒸前后白術(shù)定性比較在文獻(xiàn)與實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上,對(duì)白術(shù)有效部位的化學(xué)成分進(jìn)行了較系統(tǒng)的定性分析,建立白術(shù)相應(yīng)的化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)。首先采用UFLC-QTOF-MS化學(xué)輪廓表征方法揭示硫熏對(duì)白術(shù)藥材成分的影響。在正、負(fù)離子模式下,從檢測(cè)到的80個(gè)峰中鑒別出59個(gè)化合物,主要為萜類、炔醇類、有機(jī)酸類、黃酮類等成分。采用化學(xué)輪廓表征結(jié)合特征離子提取手段,運(yùn)用多元統(tǒng)計(jì)分析方法,發(fā)現(xiàn)硫熏白術(shù)中潛在特征標(biāo)志物并半定量地探討了特征含硫衍生物及其脫水結(jié)合內(nèi)酯類化合物的變化規(guī)律。結(jié)果發(fā)現(xiàn),52個(gè)化合物來(lái)源于非硫熏白術(shù)藥材,硫熏后新產(chǎn)生28個(gè)成分;20個(gè)化合物含量明顯下降,37個(gè)化合物明顯上升,說(shuō)明硫熏會(huì)顯著影響白術(shù)的整體質(zhì)量;探索了硫熏前后萜類潛在的結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化機(jī)制,嘗試解釋成分組成變化的關(guān)聯(lián)性。6個(gè)從非硫熏白術(shù)演變而來(lái)的含硫衍生物(白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ硫酸酯;表白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ亞硫酸酯;6-羥基白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ硫酸酯;白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與6-羥基-3,3a-二氫白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ-9a,9a-脫水結(jié)合物亞硫酸酯;白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與6-羥基-3,3a-二氫白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ-9a,6-脫水結(jié)合物硫酸酯;白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與6-羥基-3,3a-二氫白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ-9a,9a-脫水結(jié)合物硫酸酯)及2個(gè)脫水結(jié)合內(nèi)酯類化合物(白術(shù)內(nèi)酰胺與6-羥基-3,3a-二氫白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ-1,6-脫水結(jié)合物;白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與蒼術(shù)酮-9a,2-脫水結(jié)合物)被篩選作為潛在的特異性質(zhì)量標(biāo)志物,用于快速檢測(cè)過(guò)度硫熏,統(tǒng)一白術(shù)整體質(zhì)量。四、硫熏對(duì)白術(shù)活性成分含量的影響本課題對(duì)不同道地產(chǎn)區(qū)及硫磺熏制的白術(shù)中多糖及低分子糖(D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖)含量進(jìn)行對(duì)比研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),硫熏后各產(chǎn)地白術(shù)中糖類成分均有明顯降低的趨勢(shì);采用HPLC-PDA法探索不同溫度烘干法和硫熏干燥法對(duì)白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和內(nèi)酯Ⅲ的影響,測(cè)定硫熏前后白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ及內(nèi)酯Ⅲ含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn),硫熏后內(nèi)酯含量都顯著下降,可能是因?yàn)樵谘七^(guò)程中,白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ會(huì)與殘留的S03和SO2生成相應(yīng)的白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ硫酸酯及表白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ亞硫酸酯。五、硫熏白術(shù)對(duì)脾虛大鼠唾液淀粉酶及D-木糖排泄率活性的影響針對(duì)白術(shù)的不同加工方法,觀察白術(shù)在硫磺熏蒸、不同溫度鼓風(fēng)烘制的加工方式下,樣品對(duì)脾虛大鼠的唾液淀粉酶及尿中D-木糖排泄率的影響。采用淀粉酶比色測(cè)量法和鄰甲苯胺法測(cè)定大鼠唾液淀粉酶活性和尿D-木糖排泄率。白術(shù)能改善脾虛大鼠對(duì)D-木糖吸收功能和唾液淀粉酶活性,且尿中D-木糖排泄率的改變與唾液淀粉酶活性呈正相關(guān)。不同溫度鼓風(fēng)烘制加工的白術(shù)對(duì)脾虛大鼠唾液淀粉酶活性和尿中D-木糖排泄率的影響較小,而硫磺熏蒸對(duì)脾虛大鼠唾液淀粉酶活性和尿中D-木糖排泄率的影響較大,使健脾活性下降。
【學(xué)位單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284.1
【部分圖文】：

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南京中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文，再稱定重量，用相應(yīng)溶劑補(bǔ)足減失的重量。將１００％甲醇和５０％甲醇提取液醇復(fù)溶至ｌ〇ｍｌ；將水提取液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加入無(wú)水乙醚２０ｍｌ萃�。裁褜雍喜�、旋蒸，用甲醇復(fù)溶至１０ｍｌ。取適量，高速離心（１２０００ｒ／ｍｉｎ）?５ｍｉ３．２提取方式的選擇”中的洗脫梯度，�。保�?０注入液相色譜儀測(cè)定。??
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2874028