白術(Atractylodes macrocephala Koidz.)傳統(tǒng)加工方法有烘干、曬干兩種。但此方法需要較長時間,效率低。硫磺熏蒸(簡稱硫熏)具有干燥、漂白、殺菌防腐的作用,可在一定程度上延長藥材的保質期,因此近年來過度硫熏的情況普遍存在,嚴重影響藥材飲片的質量,已引起國家相關部門高度重視。目前,國家已出臺相關措施控制中藥材硫熏,但檢控手段仍有待完善。本論文以白術為研究對象,建立其水提、醇提部位的指紋圖譜;在此基礎上,系統(tǒng)考察硫熏對白術藥材品質的影響,對硫熏前后白術化學輪廓組成進行了液質聯(lián)用分析,揭示硫熏引起白術藥材化學成分的變化規(guī)律,初步篩選出8個以特征含硫衍生物及內酯脫水結合物作為特征質量標志物(Q-marker),創(chuàng)建白術過度硫熏的快速篩查方法;對硫熏前后白術藥材中內酯、多糖以及低分子糖的含量進行了測定;同時,以唾液淀粉酶及D-木糖排泄率活性為指標評價硫熏對白術健脾活性的影響,發(fā)現(xiàn)硫熏會顯著影響白術的整體質量。本文為尋找并逐步建立更為科學、簡便、易行的白術質量評價方法,制定其量化標準,實現(xiàn)白術質量的安全、有效、穩(wěn)定和可控奠定良好基礎,為硫熏白術檢控標準的修訂提供科學依據,也為藥材硫熏工藝的標準化研究提供新思路。全文研究主要包括以下5個部分:一、文獻研究對白術的化學成分、產地加工現(xiàn)狀研究進展進行綜述;對硫熏導致不同藥材化學成分組成和含量改變,潛在藥效和毒性變化,以及硫熏藥材多種檢控方法進行了系統(tǒng)綜述和評價。在此基礎上提出必須應用現(xiàn)代分析技術加強硫熏對藥材整體質量的影響研究,在硫熏藥材藥效和毒性評估不完善的情況下需建立專屬性強的硫熏藥材檢控方法,加強硫熏藥材的檢控。二、白術的指紋圖譜研究白術藥材的HPLC指紋圖譜研究得到醇提部位具有6個特征峰;在此基礎上,針對其水提部位做了深入研究,建立了具有24個特征峰的白術水提部位特征圖譜,所得的兩張指紋圖譜均與其自動生成的對照圖譜進行相似度擬合,評價結果均大于0.90,所建立的水提、醇提部位HPLC指紋圖譜可以有效鑒別白術藥材,為全面控制白術藥材質量,確保臨產用藥安全、有效提供參考。三、硫磺熏蒸前后白術定性比較在文獻與實驗研究的基礎上,對白術有效部位的化學成分進行了較系統(tǒng)的定性分析,建立白術相應的化學成分數據庫。首先采用UFLC-QTOF-MS化學輪廓表征方法揭示硫熏對白術藥材成分的影響。在正、負離子模式下,從檢測到的80個峰中鑒別出59個化合物,主要為萜類、炔醇類、有機酸類、黃酮類等成分。采用化學輪廓表征結合特征離子提取手段,運用多元統(tǒng)計分析方法,發(fā)現(xiàn)硫熏白術中潛在特征標志物并半定量地探討了特征含硫衍生物及其脫水結合內酯類化合物的變化規(guī)律。結果發(fā)現(xiàn),52個化合物來源于非硫熏白術藥材,硫熏后新產生28個成分;20個化合物含量明顯下降,37個化合物明顯上升,說明硫熏會顯著影響白術的整體質量;探索了硫熏前后萜類潛在的結構轉化機制,嘗試解釋成分組成變化的關聯(lián)性。6個從非硫熏白術演變而來的含硫衍生物(白術內酯Ⅲ硫酸酯;表白術內酯Ⅰ亞硫酸酯;6-羥基白術內酯Ⅰ硫酸酯;白術內酯Ⅲ與6-羥基-3,3a-二氫白術內酯Ⅲ-9a,9a-脫水結合物亞硫酸酯;白術內酯Ⅲ與6-羥基-3,3a-二氫白術內酯Ⅲ-9a,6-脫水結合物硫酸酯;白術內酯Ⅲ與6-羥基-3,3a-二氫白術內酯Ⅲ-9a,9a-脫水結合物硫酸酯)及2個脫水結合內酯類化合物(白術內酰胺與6-羥基-3,3a-二氫白術內酯Ⅲ-1,6-脫水結合物;白術內酯Ⅲ與蒼術酮-9a,2-脫水結合物)被篩選作為潛在的特異性質量標志物,用于快速檢測過度硫熏,統(tǒng)一白術整體質量。四、硫熏對白術活性成分含量的影響本課題對不同道地產區(qū)及硫磺熏制的白術中多糖及低分子糖(D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖)含量進行對比研究,結果發(fā)現(xiàn),硫熏后各產地白術中糖類成分均有明顯降低的趨勢;采用HPLC-PDA法探索不同溫度烘干法和硫熏干燥法對白術中白術內酯Ⅰ和內酯Ⅲ的影響,測定硫熏前后白術中白術內酯Ⅰ及內酯Ⅲ含量,結果發(fā)現(xiàn),硫熏后內酯含量都顯著下降,可能是因為在熏制過程中,白術內酯Ⅲ與白術內酯Ⅰ會與殘留的S03和SO2生成相應的白術內酯Ⅲ硫酸酯及表白術內酯Ⅰ亞硫酸酯。五、硫熏白術對脾虛大鼠唾液淀粉酶及D-木糖排泄率活性的影響針對白術的不同加工方法,觀察白術在硫磺熏蒸、不同溫度鼓風烘制的加工方式下,樣品對脾虛大鼠的唾液淀粉酶及尿中D-木糖排泄率的影響。采用淀粉酶比色測量法和鄰甲苯胺法測定大鼠唾液淀粉酶活性和尿D-木糖排泄率。白術能改善脾虛大鼠對D-木糖吸收功能和唾液淀粉酶活性,且尿中D-木糖排泄率的改變與唾液淀粉酶活性呈正相關。不同溫度鼓風烘制加工的白術對脾虛大鼠唾液淀粉酶活性和尿中D-木糖排泄率的影響較小,而硫磺熏蒸對脾虛大鼠唾液淀粉酶活性和尿中D-木糖排泄率的影響較大,使健脾活性下降。
【學位單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2017
【中圖分類】：R284.1
【部分圖文】：

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南京中醫(yī)藥大學碩士學位論文，再稱定重量，用相應溶劑補足減失的重量。將１００％甲醇和５０％甲醇提取液醇復溶至ｌ〇ｍｌ；將水提取液轉移至分液漏斗中，加入無水乙醚２０ｍｌ萃�。裁褜雍喜�、旋蒸，用甲醇復溶至１０ｍｌ。取適量，高速離心（１２０００ｒ／ｍｉｎ）?５ｍｉ３．２提取方式的選擇”中的洗脫梯度，�。保�?０注入液相色譜儀測定。??
【參考文獻】

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本文編號：2874028