目的探討糖腎寧對(duì)KK-Ay小鼠足細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)分化的影響。方法采用KK-Ay小鼠建立糖尿病腎病小鼠模型,隨機(jī)分為模型組、糖腎寧組及纈沙坦組,每組10只,并將10只C57BL/6J小鼠作為正常對(duì)照組。各組小鼠干預(yù)給藥12周后處死,心尖取血、摘取雙側(cè)腎臟,進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)檢測(cè)。使用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清肌酐及尿素氮水平,PAS染色觀察各組小鼠腎組織細(xì)胞外基質(zhì)增生情況,免疫組化檢測(cè)各組小鼠腎組織Collagen I及FN蛋白表達(dá),WB及RT-PCR檢測(cè)各組小鼠足細(xì)胞P-cadherin和FSP-1的蛋白及mRNA表達(dá)。結(jié)果 (1)與正常對(duì)照組相比,模型組小鼠血清肌酐、尿素氮水平明顯升高(P0.05);與模型組相比,糖腎寧組及纈沙坦組小鼠血清肌酐、尿素氮水平明顯降低(P0.05)。(2)與正常對(duì)照組相比,模型組小鼠腎小球細(xì)胞外基質(zhì)明顯增生,基質(zhì)蛋白Collagen I及FN表達(dá)上調(diào)(P0.05);與模型組相比,糖腎寧組及纈沙坦組小鼠腎小球細(xì)胞外基質(zhì)增生減輕,基質(zhì)蛋白Collagen I及FN表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05)。(3)與正常對(duì)照組相比,模型組小鼠足細(xì)胞P-cadherin蛋白及mRNA表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05);與模型組相比,糖腎寧組及纈沙坦組小鼠足細(xì)胞P-cadherin蛋白及mRNA表達(dá)明顯上調(diào)(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論糖腎寧能夠抑制糖尿病腎病小鼠足細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)分化,可能是其減輕腎小球細(xì)胞外基質(zhì)增生、延緩疾病進(jìn)展的分子機(jī)制。
【部分圖文】：

使用PAS染色觀察各組小鼠腎組織細(xì)胞外基質(zhì)增生情況。與正常對(duì)照組相比，模型組小鼠腎小球肥大，細(xì)胞外基質(zhì)出現(xiàn)增生;與模型組相比，糖腎寧組及纈沙坦組小鼠腎小球減小，細(xì)胞外基質(zhì)增生減輕。提示糖腎寧能夠減輕KK-Ay小鼠腎小球細(xì)胞外基質(zhì)增生。見(jiàn)圖1。2.3 糖腎寧對(duì)KK-Ay小鼠腎小球細(xì)胞外基質(zhì)蛋白Collagen I及FN蛋白表達(dá)的影響

應(yīng)用免疫組化檢測(cè)各組小鼠腎組織細(xì)胞外基質(zhì)蛋白Collagen I及FN蛋白表達(dá)情況。與正常對(duì)照組相比，模型組小鼠腎小球細(xì)胞外基質(zhì)蛋白Collagen I及FN蛋白表達(dá)明顯增加;與模型組相比，糖腎寧組及纈沙坦組小鼠Collagen I及FN蛋白表達(dá)明顯減少。提示糖腎寧能夠減少KK-Ay小鼠腎小球細(xì)胞外基質(zhì)蛋白Collagen I及FN蛋白表達(dá)。見(jiàn)圖2、表3。2.4 糖腎寧對(duì)KK-Ay小鼠足細(xì)胞EMT標(biāo)志蛋白P-cadherin及FSP-1蛋白表達(dá)的影響

應(yīng)用WB檢測(cè)各組小鼠腎組織P-cadherin蛋白及FSP-1蛋白表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，模型組小鼠腎組織P-cadherin蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05),FSP-1蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05);與模型組相比，糖腎寧組及纈沙坦組小鼠腎組織P-cadherin蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05),FSP-1蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，糖腎寧能夠上調(diào)KK-Ay小鼠足細(xì)胞表型標(biāo)志蛋白P-cadherin表達(dá)，下調(diào)間充質(zhì)表型標(biāo)志蛋白FSP-1蛋白表達(dá)。見(jiàn)圖3、表4。2.5 糖腎寧對(duì)KK-Ay小鼠足細(xì)胞EMT標(biāo)志蛋白P-cadherin及FSP-1基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響
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