發(fā)布時(shí)間：2020-11-04 00:02

　　 目的:優(yōu)化荔枝核多糖的水提醇沉工藝,并評價(jià)其體外降糖的活性。方法:采用苯酚-硫酸比色法測定多糖含量,并計(jì)算多糖提取率。采用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面法,以料液比、提取次數(shù)、提取時(shí)間為因素,多糖提取率為指標(biāo),對水提工藝進(jìn)行優(yōu)化;采用單因素試驗(yàn)對醇沉工藝中水提液的濃縮體積和醇沉濃度進(jìn)行篩選,并進(jìn)行驗(yàn)證。以阿卡波糖為對照,采用4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷法考察荔枝核多糖對α-葡萄糖苷酶的體外抑制活性。結(jié)果:荔枝核多糖水提醇沉的最優(yōu)工藝為料液比1∶19(g/mL),煎煮3次,每次1 h,水提液濃縮至原體積的40%,加乙醇醇沉至含醇量80%,經(jīng)Sevage法除蛋白后得荔枝核粗多糖。3次驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果顯示,多糖提取率分別為7.61%、7.89%、7.99%,平均提取率為7.83%(RSD=2.52%,n=3);多糖含量分別為55.57%、55.83%、56.66%,平均含量為56.02%(RSD=1.81%,n=3)。荔枝核多糖對α-葡萄糖苷酶的抑制活性有隨濃度升高而增強(qiáng)的趨勢,其半數(shù)抑制濃度為0.056 mg/mL,低于陽性對照阿卡波糖的0.196 mg/mL。結(jié)論:優(yōu)化的荔枝核多糖水提醇沉工藝穩(wěn)定、可行。荔枝核多糖對α-葡萄糖苷酶具有明顯的體外抑制作用,且活性強(qiáng)于阿卡波糖。
【部分圖文】：

按“2.3.2”項(xiàng)下最優(yōu)工藝制得荔枝核水提液，均分為4份，分別濃縮至原體積的20%、30%、40%、50%后，均加乙醇醇沉至含醇量80%，靜置，以4 000 r/min離心10 min，取沉淀，干燥，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2”項(xiàng)下方法計(jì)算LP提取率。結(jié)果，當(dāng)濃縮至原體積的30%～40%時(shí)，LP提取率較高，詳見圖3A。綜合考慮乙醇消耗量和LP提取率，本研究最終選擇將水提液濃縮至原體積的40%。圖3 濃縮體積、醇沉濃度對荔枝核水提液LP提取率的影響

濃縮體積、醇沉濃度對荔枝核水提液LP提取率的影響

取荔枝核藥材，粉碎，精密稱取粉末5.0 g，置于燒杯中，采用水煎煮法以不同料液比[1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25,g/mL（下同）]、提取時(shí)間（0.5、1、1.5、2、2.5 h）和提取次數(shù)（1、2、3、4、5次）提取，每次僅變動1個(gè)因素，以LP提取率為指標(biāo)，對各因素進(jìn)行考察。（1）料液比：隨提取液用量的增加，LP提取率逐漸升高；當(dāng)料液比達(dá)1∶15時(shí)，LP提取率趨于穩(wěn)定，詳見圖1A。（2）提取時(shí)間：當(dāng)煎煮時(shí)間為0.5～2.5 h時(shí)，LP提取率呈波浪形變化，并于1.5 h時(shí)達(dá)到最高，詳見圖1B。當(dāng)煎煮時(shí)間超過1.5 h后，LP提取率反而下降，這可能是由于煎煮時(shí)間過長，多糖結(jié)構(gòu)被部分破壞所致。故綜合考慮，本研究選擇提取時(shí)間0.5、1、1.5 h進(jìn)行后續(xù)研究。（3）提取次數(shù)：當(dāng)提取次數(shù)≤3次時(shí)，LP提取率隨著提取次數(shù)的增加而升高；但當(dāng)繼續(xù)增加提取次數(shù)時(shí)，LP提取率反而略有下降，詳見圖1C。故綜合考慮LP提取率和提取效率，本研究選擇提取次數(shù)2、3、4次進(jìn)行后續(xù)研究。故綜合考慮，本研究選擇料液比1∶10、1∶15、1∶20進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。2.3.2 響應(yīng)面試驗(yàn)
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