研究背景:腦卒中是一種神經(jīng)功能缺損的常見(jiàn)腦血管疾病,患者常伴有認(rèn)知功能障礙等腦缺血慢性損傷,若不加以控制容易發(fā)展為老年癡呆。目前臨床上,對(duì)于腦缺血慢性損傷尚無(wú)有效的治療藥物,因此,研究和尋找改善腦缺血認(rèn)知功能障礙的藥物具有十分重要的意義。辣木是一種新型藥食兩用植物,具有包括神經(jīng)保護(hù)作用在內(nèi)的多種藥理作用。本實(shí)驗(yàn)室在前期實(shí)驗(yàn)研究中,已經(jīng)有結(jié)果證實(shí)辣木籽醇提物(MSE)可以改善東莨菪堿誘導(dǎo)的小鼠學(xué)習(xí)記憶能力降低癥狀。但是辣木籽對(duì)腦卒中的神經(jīng)保護(hù)作用并不明確,因此本論文對(duì)此展開(kāi)了研究。研究目的:探究MSE對(duì)大鼠腦卒中后的神經(jīng)保護(hù)作用及認(rèn)知功能障礙的改善作用。研究方法:應(yīng)用大腦中動(dòng)脈栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO),構(gòu)建腦卒中模型。在急性期實(shí)驗(yàn)中:先分別給予缺血后小鼠不同劑量MSE(125mg/kg、250mg/kg、500mg/kg)預(yù)保護(hù)3天,探究其預(yù)保護(hù)作用。而后在再灌注后不同時(shí)間點(diǎn)(Oh、2h、4h)給予術(shù)后小鼠一次500 mg/kg MSE,探究其治療時(shí)間窗;在慢性期實(shí)驗(yàn)中:術(shù)后大鼠腹腔注射給予BrdU(50mg/kg)7天,并同時(shí)灌胃給藥MSE400mg/kg。腦缺血模型后第21天,通過(guò)為期7天的水迷宮實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)其學(xué)習(xí)記憶能力、缺血后第28天取材。利用免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)于缺血后28天檢測(cè)BrdU+/NeuN+以及 BrdU+/GFAP+細(xì)胞。運(yùn)用 Western Blot,RT-PCR 技術(shù)檢測(cè)缺血后 28 天 GAP-43/SYP、NGF/NT3/BDNF、SOD、CHAT、IL-6/IL-10、Bax/Bcl-2的蛋白表達(dá)和基因水平。同時(shí)檢測(cè)缺血后海馬組織中ACh/AchE活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1.MSE對(duì)急性腦卒中具有預(yù)保護(hù)和治療作用,最有效劑量為500mg/kg,最佳治療時(shí)間點(diǎn)為再灌注后2h。2.MSE通過(guò)促進(jìn)突觸可塑性(GAP-43、SYP)以及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF、NGF以及NT3)的產(chǎn)生,進(jìn)而促進(jìn)缺血側(cè)海馬DG區(qū)的神經(jīng)元新生,發(fā)揮促神經(jīng)發(fā)生的作用,進(jìn)一步改善認(rèn)知功能障礙。3.MSE可能通過(guò)調(diào)節(jié)膽堿能系統(tǒng)來(lái)提高學(xué)習(xí)記憶能力4.MSE可能通過(guò)抑制缺血性腦卒中誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激,炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡從而進(jìn)一步產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)論:MSE具有神經(jīng)保護(hù)作用,體現(xiàn)在對(duì)急性腦卒中產(chǎn)生預(yù)保護(hù)和治療雙重作用;以及通過(guò)促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生和調(diào)節(jié)膽堿能系統(tǒng)來(lái)改善腦卒中慢性期認(rèn)知功能障礙。
【學(xué)位單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

。??神經(jīng)發(fā)生是指神經(jīng)干細(xì)胞，在各種外界因素刺激下生成新的神經(jīng)元，并且進(jìn)??一步構(gòu)建神經(jīng)元之間突觸聯(lián)系，從而達(dá)到促進(jìn)神經(jīng)新生的目的，同時(shí)發(fā)揮修復(fù)??中樞神經(jīng)損傷的功能。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中，祌經(jīng)發(fā)生會(huì)經(jīng)過(guò)３個(gè)階段：??①增殖：即產(chǎn)生新的細(xì)胞；②向目標(biāo)區(qū)域遷移；③最終分化為特定表型。一般情況??下，成年哺乳動(dòng)物腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞處于靜息狀態(tài)，在一定因素誘導(dǎo)下（如腦組織??的機(jī)械損傷、腦缺血缺氧損傷、氧化應(yīng)激損傷等），神經(jīng)干細(xì)胞在腦內(nèi)損傷部位??及多個(gè)場(chǎng)所的開(kāi)始大量增殖［１８］。在成年嚙齒類動(dòng)物中，大腦組織中有兩類重要??的神經(jīng)干細(xì)胞群，分別位于側(cè)腦室的視下區(qū)（ｓｕｂｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｚｏｎｅ，ＳＶＺ），和海??馬齒狀回顆粒下區(qū)（ｓｕｂｇｒａｎｕｌａｒｚｏｎｅ，ＳＧＺ）。室下區(qū)中產(chǎn)生的祌經(jīng)元會(huì)沿著頭??端遷移渠道（ｒｏｓｔａｌ?ｍｉｇｒａｔｏｒｙ?ｓｔｒｅａｍ，ＲＭＳ）遷移至嗅球。而海馬齒狀回顆粒下??區(qū)中新生的神經(jīng)元會(huì)直接匯入到海馬中的神經(jīng)環(huán)路，發(fā)揮學(xué)習(xí)和記憶功能。這??些研宄提示我們，增加海馬中神經(jīng)發(fā)生可以緩解腦卒中引起的空間認(rèn)知缺陷。??

?第二章辣木好醇提物對(duì)缺血性腦卒中后的神經(jīng)保護(hù)作用扎以固定線栓，注意動(dòng)作輕緩不要拉扯到線栓。假手術(shù)組只進(jìn)以及頸外動(dòng)脈的分離操作，并將頸外動(dòng)脈穿兩條線，分別結(jié)扎，剪斷頸外動(dòng)脈。最后結(jié)縫合皮膚，消毒，將術(shù)后的大鼠保溫放（７）拔栓：２個(gè)小時(shí)后將線栓頭端輕輕拔出到近切口處，缺血及再灌注過(guò)程中保持室溫２３－２５°Ｃ，常規(guī)分籠詞養(yǎng)ｓ??

３．１．?ＭＳＥ對(duì)小鼠急性腦缺血的預(yù)保護(hù)作用??為了評(píng)估ＭＳＥ對(duì)急性腦缺血的預(yù)保護(hù)作用，在進(jìn)行腦缺血模型之度分別為１２５ｍｇ?／?ｋｇ，２５０ｍｇ?／?ｋｇ，５００ｍｇ?／?ｋｇ的ＭＳＥ對(duì)小鼠進(jìn)行灌天。缺血再灌注２４ｈ后，取材ＴＴＣ染色。結(jié)果顯示，相比于ｖｅｈｉｃｌｅ?＋?ＭＭＳＥ給藥組的小鼠的腦梗塞體積顯著減少，尤其是給藥濃度為５００ｍｇ果最佳（圖．３．１Ａ，Ｃ，Ｐ＜０．００１）。行為學(xué)評(píng)分結(jié)果顯示，２５０ｍｇ／ｋｇ或５００ｍｇ／高劑量組可明顯減輕缺血引起的運(yùn)動(dòng)功能障礙，而低劑量給藥組效（圖．３．１Ｂ，Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?Ｐ＜?０．０１）。腦缺血可引起嚴(yán)重的腦水腫。與模型５００ｍｇ／ｋｇ?ＭＳＥ預(yù)處理后的小鼠的腦水腫體積減少了大約６０％（圖．３．１?Ｄ由此推測(cè)ＭＳＥ的神經(jīng)保護(hù)作用具有劑量依賴性，其中５００ｍｇ?／?ｋｇ的給保護(hù)作用是最為明顯的。因此，我們后期均選擇５００?ｍｇ／ｋｇ的濃度來(lái)的神經(jīng)保護(hù)作用。??
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 王曉英,張均田;人參皂甙Rg_1對(duì)自由活動(dòng)大鼠突觸可塑性的影響及其作用機(jī)制<英文>[J];Acta Pharmacologica Sinica;2001年07期

本文編號(hào)：2868886