發(fā)布時(shí)間：2020-11-02 15:44

　　 縮泉丸出自《婦人良方》,由鹽益智仁、烏藥、山藥組成。方中君藥益智仁炮制品的選擇是影響其臨床療效的關(guān)鍵,因益智仁生品主入脾經(jīng),主治脾虛而不能統(tǒng)攝涎唾的口涎自流;益智仁鹽炙后主入腎經(jīng),主治腎虛小便清長(zhǎng),夜尿頻多或遺尿。在國(guó)家十一五科技支撐和自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目的支持下,課題組多層次多角度闡明了益智仁“生品入脾·止瀉,鹽炙入腎·縮尿”中藥炮制理論的科學(xué)內(nèi)涵。本課題在前期益智仁“鹽炙入腎”的研究基礎(chǔ)上,從復(fù)方角度出發(fā),以縮泉丸“補(bǔ)腎縮尿”的功效為切入點(diǎn),研究縮泉丸中益智仁鹽炙的科學(xué)性和“鹽炙入腎-腎主水”的作用機(jī)理。目的本課題為國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目“基于益智仁鹽炙前后及分別組成縮泉丸來研究‘鹽炙入腎-腎主水’的機(jī)制”(81473353)的一部分,對(duì)縮泉丸中益智仁鹽炙科學(xué)性和“鹽炙入腎-腎主水”作用機(jī)理進(jìn)行研究。課題組前期已初步確定了縮泉丸的藥效部位及炮制前后物質(zhì)基礎(chǔ)的差異。本文在前期研究的基礎(chǔ)上,通過比較益智仁鹽炙前后組成的縮泉丸對(duì)腎陽虛多尿模型大鼠腎和膀胱功能及機(jī)體水液代謝的改善作用的差異,體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程的差異等探討縮泉丸中益智仁鹽炙的科學(xué)性及“鹽炙入腎-腎主水”的作用機(jī)理。方法采用文獻(xiàn)學(xué)、藥理學(xué)和化學(xué)相結(jié)合的手段開展益智仁鹽炙前后組成縮泉丸研究“鹽炙入腎-腎主水”作用機(jī)理。1進(jìn)行文獻(xiàn)研究,整理古方縮泉丸主治病癥、縮泉丸中益智仁和全方的研究進(jìn)展、“鹽炙入腎”研究進(jìn)展、“腎主水”研究進(jìn)展等內(nèi)容,為開展益智仁鹽炙縮泉丸增強(qiáng)“鹽炙入腎-腎主水”作用的機(jī)理研究提供理論依據(jù)。2采用藥理學(xué)方法,建立兩種大鼠多尿模型,驗(yàn)證縮泉丸溫腎縮尿的藥理作用,并比較鹽炙前后作用差異。3運(yùn)用ELISA(酶聯(lián)免疫檢測(cè))測(cè)定益智仁鹽炙前后組成的縮泉丸血中β_2-微球蛋白(β_2-MG)、白細(xì)胞介素Ⅱ(IL-2)、血清免疫球蛋白G(IgG)含量;HE染色法測(cè)定腎臟、睪丸、胸腺、脾臟的病理形態(tài)。從益智仁鹽炙前后組成的縮泉丸對(duì)模型大鼠腎臟和睪丸病理形態(tài)、腎功能、免疫功能三個(gè)方面的影響,探討縮泉丸中益智仁鹽炙對(duì)于腎臟的影響,闡明縮泉丸中益智仁“鹽炙入腎”的作用機(jī)理。4從分子水平出發(fā),運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)和蛋白質(zhì)印跡法(WB)等方法比較益智仁鹽炙前后組成的縮泉丸對(duì)模型大鼠腎臟水通道蛋白-2(AQP-2)mRNA及蛋白的表達(dá);離體膀胱逼尿肌細(xì)胞M_3R和β_3-AR mRNA及蛋白的表達(dá)以及對(duì)HPA軸的影響,從益智仁鹽炙前后組成的縮泉丸對(duì)機(jī)體水液代謝的影響,闡明縮泉丸中益智仁鹽炙“腎主水”的作用機(jī)理。5從藥代動(dòng)力學(xué)出發(fā),運(yùn)用在體單向腸灌流實(shí)驗(yàn)研究縮泉丸有效部位圓柚酮(NK)和烏藥醚內(nèi)酯(LD)的腸吸收特征及炮制對(duì)腸吸收的影響,闡明益智仁鹽炙前后組成縮泉丸腸吸收的變化。運(yùn)用HPLC-QQQ-MS測(cè)定血液中楊芽黃素(TC)、白楊素(CS)、11,12-二羥基圓柚酮(DNK)、LD、NK的含量;同時(shí)測(cè)定尿液和糞便中LD、DNK和NK的含量。通過對(duì)藥物在體內(nèi)的代謝特征,以及對(duì)于糞便、尿液的排泄影響,比較益智仁鹽炙前后組成縮泉丸代謝差異,闡明益智仁鹽炙對(duì)于縮泉丸主要藥效成分在體內(nèi)動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的影響。結(jié)果1縮泉丸石油醚部位能顯著延長(zhǎng)首次排尿時(shí)間(P0.05);顯著降低ACH激動(dòng)的豚鼠膀胱逼1對(duì)水負(fù)荷多尿模型大鼠,與模型組相比,各給藥組能夠延長(zhǎng)水負(fù)荷模型大鼠首次排尿時(shí)間(P0.05),但總排泄率無顯著性差異(P0.05);對(duì)腎陽虛多尿模型大鼠,與模型組相比,給藥后尿量顯著減少(P0.05)。表明縮泉丸具有―縮尿‖作用,且縮泉丸中君藥益智仁鹽炙后作用有增強(qiáng)的趨勢(shì)。2縮泉丸對(duì)腎陽虛多尿模型大鼠腎臟、睪丸指數(shù)的改變均有顯著抑制作用(P0.05),對(duì)腎臟和睪丸病理損傷有顯著的改善(P0.05),并且顯著降低血清中BUN、β_2-MG含量(P0.05),IL-2、IGg含量(P0.05),且益智仁鹽炙后組成的縮泉丸作用增強(qiáng),從大鼠腎臟和睪丸病理形態(tài)、腎功能、免疫功能三個(gè)方面的影響闡明縮泉丸中益智仁“鹽炙入腎”作用機(jī)理。3縮泉丸上調(diào)腎陽虛多尿模型大鼠腎臟AQP-2 mRNA和蛋白的表達(dá)(P0.05);調(diào)整M3、β3-AR mRNA和蛋白表達(dá)(P0.05)使膀胱保持正常的收縮和舒張功能;顯著升高CRH、ATCH和cAMP濃度(P0.05),從而調(diào)整尿液的生成,且益智仁鹽炙后組成的縮泉丸作用增強(qiáng),從機(jī)體水液代謝的影響闡明縮泉丸中益智仁鹽炙“腎主水”的作用機(jī)理。4縮泉丸石油醚部位中NK、LD在各腸段吸收均較好;與益智仁生品縮泉丸相比,益智仁鹽炙縮泉丸中圓柚酮K_a和P_(eff)增大(P0.05);烏藥醚內(nèi)酯的P_(eff)增大(P0.05),從吸收角度闡明鹽炙科學(xué)性。5益智仁鹽炙縮泉丸主要入血成分DNK、NK在血中的半衰期(t_(1/2))、血藥濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC_(0-t))、體內(nèi)平均滯留時(shí)間(MRT)顯著高于益智仁生品縮泉丸(P0.05),而消除率(CL)顯著低于益智仁生品縮泉丸(P0.05);LD在血中的CL、MRT藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與益智仁生品縮泉丸相比也有顯著性差異(P0.05);益智仁鹽炙后組成的縮泉丸生物利用度均有不同程度增加,從體內(nèi)變化角度闡明鹽炙科學(xué)性。結(jié)論1益智仁鹽炙后組成的縮泉丸其縮尿作用增強(qiáng),是通過改善腎臟和睪丸病理損傷,改善腎功能,提高免疫功能,三個(gè)方面增強(qiáng)藥物“補(bǔ)腎”作用的,從藥物鹽炙增強(qiáng)“補(bǔ)腎”作用方面闡釋了中藥炮制理論“鹽炙入腎”的作用機(jī)理。2腎臟主持和調(diào)節(jié)一身水液,鹽炙后補(bǔ)腎作用增強(qiáng),可以調(diào)節(jié)機(jī)體的水液代謝平衡,益智仁鹽炙后組成的縮泉丸增強(qiáng)水液代謝平衡是通過提高腎臟AQP-2的表達(dá)增加對(duì)水的重吸收,調(diào)節(jié)膀胱逼尿肌受體的表達(dá)維持膀胱正常收縮和舒張的功能,調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌功能,三個(gè)方面進(jìn)行全身的水液代謝調(diào)節(jié)的,佐證了“腎主水”的中醫(yī)理論,并從水液代謝調(diào)節(jié)方面闡述了“腎主水”的作用機(jī)理。3益智仁鹽炙后組成的縮泉丸不僅提高了君藥益智仁入血成分生物利用度,同時(shí)還提高了配伍藥物的生物利用度,益智仁鹽炙縮尿作用增強(qiáng)可能與生物利用度增加有關(guān),從藥動(dòng)學(xué)過程揭示了益智仁鹽炙后組方的科學(xué)性。
【學(xué)位單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

各組大鼠體重變化（x—±sdn=8）

潤(rùn)無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)圖3-1 各組大鼠腎臟HE病理切片圖及組織學(xué)評(píng)分（x—±sd n=8（）1正常組，2模型組，3JGSQW組，4 R-SQW 組，5 P-SQW 組）Fig.3-1 Pathologics figureand Histological Scoring of different groups（x—±sd n=8）注：▲示與正常組比較 P<0.05，*與模型組比較 P<0.05。結(jié)果經(jīng)過對(duì)抗性給藥治療后，給藥組均能對(duì)腺嘌呤致腎臟嚴(yán)重病變（腎小球壞死、腎小管壞死、間質(zhì)增生和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等）有一定的抑制作用。通過組織

鼠睪丸 HE病理切片圖（x—±sd n=8）（1 正常組，2 模型組，3JGSQW 組，組，5 P-SQW 組）Fig.3-2 Pathologics figureand of different groups（x—±sd n=8）丸組織病變分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果正常組大鼠睪丸評(píng)分為 0.33，模型
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2867240