發(fā)布時(shí)間：2020-11-02 12:41

　　 目的:本研究采用前期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的兩個(gè)活性較好的化合物N-2(9-(4-氟-苯基)-5,8,9,10-四氫-4H-氧雜-2,3,9,11b-四氮雜-環(huán)戊二烯并[a]蒽)和BDM(9-丁基-9,10-二氫苯并吡喃[8,7-e][1,3]噁嗪-2(8H)-酮)為研究目標(biāo),探究其抗炎活性和作用機(jī)制。方法:1.體外實(shí)驗(yàn)采用脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7產(chǎn)生炎癥,通過ELISA法檢測(cè)化合物N-2和BDM對(duì)TNF-α和IL-6表達(dá)的影響;應(yīng)用Western blot法測(cè)定化合物N-2和BDM對(duì)ERK1/2、JNK、p38 MAPK、NF-κB p65和IκBα蛋白及其磷酸化水平的表達(dá);2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采取LPS經(jīng)小鼠鼻入肺引發(fā)急性肺損傷,用ELISA檢測(cè)小鼠肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的含量,并且通過Western blot法檢測(cè)ERK1/2、JNK、p38 MAPK、NF-κB p65和IκBα蛋白及其磷酸化水平的表達(dá),同時(shí)還檢測(cè)了小鼠肺組織中髓過氧化物酶含量及肺濕/干重比(W/D),觀察了肺組織病理變化。結(jié)果:1.體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在LPS作用RAW264.7細(xì)胞24h后,培養(yǎng)上清中TNF-α和IL-6的表達(dá)量明顯增高�；衔颪-2和BDM顯著地降低了TNF-α和IL-6的表達(dá)水平。Western blot結(jié)果顯示,不同濃度的化合物N-2也降低了LPS活化的ERK1/2、p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化和IκBα的降解。不同濃度的化合物BDM對(duì)LPS活化的RAW264.7細(xì)胞的MAPKs信號(hào)通路蛋白有顯著地抑制作用,而對(duì)NF-κB信號(hào)通路蛋白并無(wú)太大的影響;2.體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明,化合物N-2明顯抑制了小鼠肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的表達(dá)。另外,通過測(cè)定小鼠肺組織內(nèi)髓過氧化物酶、干濕重比以及觀察小鼠肺部病理組織變化等指標(biāo),綜合地說(shuō)明了化合物N-2對(duì)于小鼠急性肺損傷導(dǎo)致的病變有顯著地緩解,Western blot結(jié)果顯示,不同濃度的化合物N-2也降低了LPS活化的ERK1/2、p38 MAPK的磷酸化和IκBα的降解。而由于BDM對(duì)小鼠的毒性作用過于大,故其體內(nèi)試驗(yàn)沒有繼續(xù)研究。結(jié)論:基于以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們證明了化合物N-2的抗炎效果要明顯優(yōu)于化合物BDM,并且N-2在體外和體內(nèi)均有一定的抗炎作用,為該化合物的后續(xù)研究提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古民族大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

化合物N-2（A）和BDM（B）對(duì)RAW264.7細(xì)胞毒性的作用

化合物N-2對(duì)相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響

化合物BDM對(duì)相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 Shiro Kimbara;Shunsuke Kondo;;Immune checkpoint and inflammation as therapeutic targets in pancreatic carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2016年33期

2 秦麗;王毓國(guó);李敏;竇永起;;益氣活血中藥對(duì)脂多糖致急性肺損傷大鼠的防治作用[J];環(huán)球中醫(yī)藥;2016年05期

3 Fu-Cai Wang;Jing-Xuan Pei;Jun Zhu;Nan-Jin Zhou;Dong-Sheng Liu;Hui-Fang Xiong;Xiao-Qun Liu;Dong-Jia Lin;Yong Xie;;Overexpression of HMGB1 A-box reduced lipopolysaccharide-induced intestinal inflammation via HMGB1/TLR4 signaling in vitro[J];World Journal of Gastroenterology;2015年25期

4 玄玲玲;侯琦;;AMPK與肺部炎癥研究進(jìn)展[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2014年08期

5 劉濤;任成山;;炎癥介質(zhì)在急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征發(fā)病機(jī)制中的作用[J];中華肺部疾病雜志(電子版);2013年03期

6 馬李杰;李王平;金發(fā)光;;急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中華肺部疾病雜志(電子版);2013年01期

7 劉偉;金發(fā)光;;急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征的治療新進(jìn)展[J];中華肺部疾病雜志(電子版);2013年01期

8 莊先飛;俞蘇嵐;樊夢(mèng)霖;寇俊萍;;中藥復(fù)方防治急性肺損傷的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2012年17期

9 徐玉東;尹磊淼;王宇;魏穎;楊永清;;S100A8蛋白在炎癥中的作用[J];生理學(xué)報(bào);2012年02期

10 黃波;;腫瘤微環(huán)境中免疫與炎癥的調(diào)節(jié)[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2012年02期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 溫翔;喹啉并雜環(huán)類衍生物的設(shè)計(jì)合成及其抗炎活性的研究[D];延邊大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2867062