本研究首先提取雪靈芝粗多糖(arenaria kansuensis crude polysaccharide,AKCP),通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AKCP對(duì)小鼠免疫細(xì)胞增殖與功能的體外激活作用,再通過(guò)檢測(cè)不同劑量AKCP對(duì)環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫指標(biāo)的影響進(jìn)行驗(yàn)證。從體內(nèi)外研究水平證實(shí)了AKCP具有免疫促進(jìn)作用。在體外研究中,以不同濃度AKCP作用于體外培養(yǎng)的免疫細(xì)胞48 h,采用中性紅吞噬實(shí)驗(yàn)及NO釋放實(shí)驗(yàn)檢測(cè)巨噬細(xì)胞功能,MTT法檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞增殖及NK細(xì)胞殺傷活性,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞CD3~+、CD4~+、CD8~+亞群,ELISA法檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-2及IFN-γ的水平。結(jié)果顯示:在體外,AKCP各濃度組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬活性和NO釋放量、脾淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)及培養(yǎng)上清中IFN-γ水平、NK細(xì)胞殺傷活性均高于空白對(duì)照組(P0.05);AKCP中濃度組脾淋巴細(xì)胞CD3~+、CD4~+亞群及培養(yǎng)上清中IL-2水平也明顯升高(P0.05)。在體內(nèi)研究中,將小鼠隨機(jī)分為5組:空白對(duì)照組、環(huán)磷酰胺(CTX)模型組、AKCP高、中、低劑量組。除空白對(duì)照組外其他4組采用腹腔注射CTX建立小鼠免疫低下模型。各組分別給予蒸餾水、不同劑量AKCP灌胃,10 d后處死小鼠,檢測(cè)體重增率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、脾淋巴細(xì)胞增殖活性和CD3~+/CD4~+/CD8~+亞群、NK細(xì)胞殺傷活性、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力、血清中IL-2和IFN-γ水平。結(jié)果顯示:在體內(nèi),CTX組除NK細(xì)胞殺傷活性外的上述各項(xiàng)指標(biāo)均較對(duì)照組明顯降低(P0.05),不同劑量AKCP作用可減輕CTX所致的各項(xiàng)指標(biāo)下降,其中AKCP高、中劑量組體重增率、胸腺指數(shù)、脾淋巴細(xì)胞CD3~+及CD3~+CD8~+亞群、巨噬細(xì)胞吞噬率與吞噬指數(shù)均較CTX模型組明顯升高(P0.05),AKCP低劑量組脾臟指數(shù)、脾淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)、以及IL-2和IFN-γ水平顯著高于CTX模型組(P0.05)。以上研究結(jié)果表明,AKCP對(duì)小鼠免疫細(xì)胞的增殖與功能具有體外激活作用;對(duì)CTX所致的免疫抑制小鼠,從淋巴器官重量、淋巴細(xì)胞增殖、Th1細(xì)胞因子分泌乃至單核巨噬細(xì)胞的功能,都具有保護(hù)和促進(jìn)作用。
【學(xué)位單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類(lèi)】：R285.5
【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)表
第1章 引言
第2章 雪靈芝粗多糖對(duì)小鼠免疫細(xì)胞增殖與功能的體外激活作用
    2.1 材料與儀器
    2.2 方法
        2.2.1 雪靈芝粗多糖（AKCP）制備
        2.2.2 中性紅吞噬實(shí)驗(yàn)法及NO釋放實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能
        2.2.3 小鼠脾淋巴細(xì)胞懸液的制備
        2.2.4 MTT法檢測(cè)小鼠脾淋巴細(xì)胞體外增殖活性
        2.2.5 MTT法檢測(cè)NK細(xì)胞殺傷活性
        2.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾淋巴細(xì)胞亞群
        2.2.7 ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)IL-2 和IFN-γ水平
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 AKCP對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞體外吞噬中性紅及釋放NO功能的影響
        2.3.2 AKCP對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞體外增殖活性的影響
        2.3.3 AKCP對(duì)小鼠NK細(xì)胞體外殺傷活性的影響
        2.3.4 AKCP對(duì)體外培養(yǎng)小鼠脾淋巴細(xì)胞亞群的影響
        2.3.5 AKCP對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞體外分泌IL-2 和IFN-γ水平的影響
    2.4 小結(jié)
第3章 雪靈芝粗多糖對(duì)環(huán)磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影響
    3.1 材料與儀器
    3.2 方法
        3.2.1 雪靈芝粗多糖（AKCP）制備
        3.2.2 動(dòng)物及分組
        3.2.3 體重增率、脾臟及胸腺指數(shù)測(cè)定
        3.2.4 小鼠脾淋巴細(xì)胞懸液的制備
        3.2.5 小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性檢測(cè)
        3.2.6 NK細(xì)胞殺傷活性檢測(cè)
        3.2.7 小鼠脾淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)
        3.2.8 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能檢測(cè)
        3.2.9 小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平檢測(cè)
        3.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 AKCP對(duì)免疫抑制小鼠體重增率、胸腺及脾臟指數(shù)的影響
        3.3.2 AKCP對(duì)免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性及NK細(xì)胞殺傷活性的影響
        3.3.3 AKCP對(duì)免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞亞群的影響
        3.3.4 AKCP對(duì)免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
        3.3.5 AKCP對(duì)免疫抑制小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平的影響
    3.4 小結(jié)
第4章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介

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本文編號(hào)：2866840