目的:觀察活血藥對(當(dāng)歸、川芎)、破血藥對(三棱、莪術(shù))調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞(VECs)中凋亡基因作用,探討活血、破血藥對防治AS的作用差異及機(jī)制,為臨床處方選藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:采用64只雄性5周齡Apo E基因缺陷小鼠(SPF級)復(fù)制AS模型。予普通飼料喂養(yǎng)至30周齡,分別對第5周齡、第30周齡的每組小鼠進(jìn)行眼眶靜脈叢采血以檢測血脂指標(biāo),對比其變化;并于第30周齡時,隨機(jī)處死2只小鼠,HE染色后觀測,顯示主動脈管腔內(nèi)有明顯斑塊形成,表明Apo E基因敲除小鼠AS模型制備成功。隨后,將小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為6組:模型組,阿托伐他汀鈣組,低劑量活血藥組,低劑量破血藥組,高劑量活血藥組,高劑量破血藥組。灌胃給藥,連續(xù)8周,無菌條件下處理動物,于透射電子顯微鏡下觀察主動脈組織病理學(xué)變化,選取RT-PCR法測定小鼠主動脈組織PLEK、PLK3基因m RNA表達(dá)量。結(jié)果:1.將Apo E基因缺陷小鼠喂養(yǎng)至30周齡,HE染色后觀測主動脈管腔內(nèi)有明顯斑塊形成。喂養(yǎng)至30周齡,模型組在透射電鏡下觀察,主動脈內(nèi)皮深大隙口,內(nèi)皮細(xì)胞已有水腫、壞死,部分內(nèi)皮細(xì)胞崩解、脫落,其內(nèi)線粒體水腫、空泡化,內(nèi)彈力膜呈現(xiàn)灶性樣破裂,其內(nèi)可見明顯脂質(zhì)顆粒。其余各組有不同程度改善。2.活血藥對(當(dāng)歸、川芎)、破血藥對(三棱、莪術(shù))均能改善AS小鼠血脂指標(biāo)(TCHO、TG、HDL-C、LDL-C)及主動脈組織病理變化,且高劑量組優(yōu)于低劑量組(P0.01),而在劑量相同時,破血藥優(yōu)于活血藥(P0.01)。3.活血藥對(當(dāng)歸、川芎)、破血藥對(三棱、莪術(shù))均可明顯下調(diào)PLEK、PLK3基因m RNA表達(dá)量(P0.01);對于下調(diào)PLEK、PLK3基因m RNA的表達(dá),破血藥優(yōu)于活血藥(P0.01或P0.05),且高、低劑量組組間存在明顯量效關(guān)系(P0.01)。結(jié)論:1.活血藥對(當(dāng)歸、川芎)、破血藥對(三棱、莪術(shù))均能改善AS小鼠主動脈組織病理,且高劑量優(yōu)于低劑量;在劑量相同時,破血藥對優(yōu)于活血藥對。2.活血藥對(當(dāng)歸、川芎)、破血藥對(三棱、莪術(shù))能通過下調(diào)PLEK、PLK3基因m RNA的表達(dá),干預(yù)VECs的內(nèi)源性凋亡路徑,抑制VECs的異常凋亡,從而保護(hù)血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)及功能,進(jìn)而發(fā)揮抗AS的作用,且其作用存在明顯的劑量依賴。
【學(xué)位單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

周齡ApoE基因缺陷小鼠主動脈HE染色（注：光鏡×100，可見明顯動脈粥樣斑塊形成

PLEK基因表達(dá)的GO分析

PLK3基因表達(dá)的GO分析
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本文編號：2864981