發(fā)布時(shí)間：2020-11-01 01:24

　　 目的:探討人參皂苷Rg1聯(lián)合人參皂苷Rg3對(duì)鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)誘導(dǎo)的雄性生殖功能損傷模型小鼠生殖功能的改善作用,闡明人參皂苷Rg1和人參皂苷Rg3對(duì)生殖功能保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制,為其深入開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:28只清潔級(jí)雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為模型組(400mg·kg-1 DBP)、人參皂苷Rg1+DBP組(20mg·kg-1人參皂苷Rg1,400mg·kg-1 DBP)、人參皂苷Rg3+DBP組(20mg·kg-1人參皂苷Rg3,400 mg·kg-1 DBP)和聯(lián)合組(20 mg·kg-1人參皂苷Rg1,20 mg·kg-1人參皂苷Rg3,400mg·kg-1 DBP),每組7只。DBP溶于玉米油于每天上午灌胃給藥,人參皂苷Rg1和人參皂苷Rg3溶于生理鹽水于每天下午皮下注射給藥,每天各給藥1次,連續(xù)給藥35d。采用WLJY-9000型精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)各組小鼠的精子密度、精子活力和總畸形率,HE染色觀察小鼠睪丸組織病理形態(tài)表現(xiàn),采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)小鼠血清中睪酮(T)、卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)水平,采用免疫熒光法檢測(cè)睪丸組織縫隙連接蛋白43 (Cx43)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:與模型組比較,聯(lián)合組小鼠睪丸臟器系數(shù)明顯升高(P0.05),人參皂苷Rg1+DBP組、人參皂苷Rg3+DBP組和聯(lián)合組小鼠精子密度和精子活力明顯升高(P0.01);與模型組比較,人參皂苷Rg1+DBP組、人參皂苷Rg3+DBP組和聯(lián)合組小鼠血清中T和LH水平明顯升高(P0.01),FSH水平明顯降低(P0.01),小鼠睪丸組織中Cx43蛋白表達(dá)水平明顯升高(P0.05)。HE染色,模型組小鼠睪丸組織生精上皮較薄,管腔中生精細(xì)胞嚴(yán)重脫落;與模型組比較,人參皂苷Rg1+DBP組和人參皂苷Rg3+DBP組小鼠睪丸組織生精上皮變厚,管腔中脫落細(xì)胞較少;聯(lián)合組小鼠睪丸組織生精上皮結(jié)構(gòu)完整,各級(jí)生精細(xì)胞排列規(guī)則,腔內(nèi)精子豐富。析因分析,人參皂苷Rg1聯(lián)合人參皂苷Rg3可致小鼠精子活力(F=6.704,P=0.016)、血清中T水平(F=4.912,P=0.036)和睪丸組織中Cx43蛋白表達(dá)水平(F=6.937,P=0.018)升高。結(jié)論:人參皂苷Rg1和人參皂苷Rg3單獨(dú)使用及人參皂苷Rg1與人參皂苷Rg3聯(lián)合使用,可提高精子密度和精子活力,使小鼠血清中T和LH水平升高,FSH水平降低,減輕小鼠生殖功能損傷,其作用機(jī)制可能與上調(diào)Cx43表達(dá)水平發(fā)揮生精保護(hù)作用有關(guān),可抑制DBP所致的生殖功能損傷,且人參皂苷Rg1與Rg3聯(lián)合使用表現(xiàn)為協(xié)同作用。
【部分圖文】：

小鼠睪丸組織經(jīng)HE染色后，光學(xué)顯微鏡400倍下觀察生精上皮細(xì)胞層次、形態(tài)結(jié)構(gòu)、脫落細(xì)胞和管腔受損程度。模型組小鼠睪丸組織生精上皮較薄，生精上皮細(xì)胞層次紊亂，甚至缺失，數(shù)量明顯減少，管腔中生精細(xì)胞嚴(yán)重脫落，而且管腔內(nèi)精子數(shù)量稀少；與模型組比較，人參皂苷Rg1+DBP組和人參皂苷Rg3+DBP組小鼠睪丸組織生精上皮變厚，生精上皮細(xì)胞排列較規(guī)則，數(shù)量有所增加，管腔中脫落細(xì)胞較少，支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)較完整，腔內(nèi)精子數(shù)量增多；聯(lián)合組小鼠睪丸組織生精上皮較厚，生精上皮結(jié)構(gòu)完整，各級(jí)生精細(xì)胞排列規(guī)則且數(shù)量較多，曲細(xì)精管之間排列緊密，腔內(nèi)精子豐富，在生精小管之間均勻分布間質(zhì)細(xì)胞。見圖2（插頁(yè)二）。2.4 各組小鼠血清中性激素水平

與模型組（0.081 4±0.013 5）比較，人參皂苷Rg1+DBP組、人參皂苷Rg3+DBP組和聯(lián)合組小鼠睪丸組織中Cx43蛋白表達(dá)水平（0.108 6±0.006 9、0.122 9±0.025 0和0.187 1±0.025 6）均明顯升高（P<0.05）。見圖4（插頁(yè)二）。聯(lián)合作用的析因分析結(jié)果顯示：2條量-效曲線隨藥物劑量增加而遠(yuǎn)離（F=6.937,P=0.018），提示人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg3聯(lián)合應(yīng)用可增加小鼠睪丸組織中Cx43蛋白表達(dá)水平，具有協(xié)同作用。見圖5。

聯(lián)合作用的析因分析結(jié)果顯示：2條量-效曲線隨藥物劑量增加而遠(yuǎn)離（F=6.937,P=0.018），提示人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg3聯(lián)合應(yīng)用可增加小鼠睪丸組織中Cx43蛋白表達(dá)水平，具有協(xié)同作用。見圖5。3 討論
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